[논문]아세트아미노펜 유도 HepG-2 세포주 손상에 대한 굴 효소 가수분해물의 보호 효과

박시향; 문성실; 정세영; 최영준

doi:10.3746/jkfn.2014.43.8.1166

아세트아미노펜 유도 HepG-2 세포주 손상에 대한 굴 효소 가수분해물의 보호 효과
Protective Effects of Enzymatic Oyster Hydrolysate on Acetaminophen-induced HepG-2 Cell Damage 원문보기

한국식품영양과학회지 = Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition, v.43 no.8, 2014년, pp.1166 - 1173

박시향 (선마린바이오테크) , 문성실 (선진육가공연구소) , (경상대학교 해양식품공학과) , 정세영 (경희대학교 약학대학) , 최영준 (경상대학교 해양식품공학과)

초록
AI-Helper

본 연구는 굴 가수분해물이 아세트아미노펜에 의한 간독성의 무독화 효과를 HepG-2 세포를 사용하여 조사하였다. 굴 가수분해물은 굴 단백질의 가교연결을 위해 TGase로 전처리하거나(TGPN) 혹은 하지 않고(PN), 1% Protamex와 1% Neutrase 단백질 분해효소로 2단 가수분해하였다. 두 종류의 굴 가수분해물은 아세트아미노펜으로 간 손상을 유도한 세포에 각각 처리하여 세포 생존율을 측정하였으며, 세포 배양 시 배양액으로 유출된 GOT와 GPT 활성을 측정하였다. TGPN 가수분해물의 경우 아세트아미노펜만을 처리한 negative 대조군($60.7{\pm}3.2%$)에 비하여 $100{\mu}g/mL$와 $200{\mu}g/mL$의 농도에서 각각 $136.2{\pm}1.4%$와 $179.6{\pm}3.8%$의 높은 세포 생존율을 보였다. PN 가수분해물은 $100{\mu}g/mL$와 $200{\mu}g/mL$의 농도에서 각각 $107.9{\pm}8.8%$와 $130.6{\pm}7.6%$의 세포 생존율을 보였다. GOT 활성은 negative 대조군의 경우에 $38.3{\pm}0.2$ Karmen/mL이었으며, TGPN($200{\mu}g/mL$)과 PN($200{\mu}g/mL$)에서는 $19.9{\pm}0.5$와 $22.0{\pm}2.4$ Karmen/mL로 농도에 따라 유의적인 활성 감소를 확인할 수 있었다. 그리고 GPT 활성도 GOT와 같은 경향의 활성을 나타내었다. 이 같은 결과에 미루어 굴 유래 가수분해물의 간 보호 건강 기능 식품 혹은 약물 개발의 가능성을 확인하였으며 앞으로 가수분해 펩티드 중의 유효성분에 대한 구조동정과 작용 기전에 관한 연구가 필요할 것으로 보인다.

Abstract ▼ AI-Helper

This study investigated the detoxification effects of enzymatic hydrolysate from oyster on acetaminophen-induced toxicity using HepG-2 cells. Oyster hydrolysate was made with 1% Protamex and 1% Neutrase after treatment with transglutaminase (TGPN) or without (PN). Two types of oyster hydrolysate were added to human-derived HepG-2 hepatocytes damaged by acetaminophen, after which the survival rate of HepG-2 cell was measured. In addition, glutamic oxaloacetic transaminase (GOT) and glutamic pyruvic transaminase (GPT) activities in the culture media were evaluated. The survival rates of HepG-2 cells were $136.2{\pm}1.4%$ at $100{\mu}g/mL$ of TGPN and $179.6{\pm}3.8%$ at $200{\mu}g/mL$ of TGPN. These cell survival rates were higher compared to that of the negative control group ($60.7{\pm}3.2%$) treated only with acetaminophen. GOT activity was $38.3{\pm}0.2$ Karmen/mL in the negative control group, whereas it was $19.9{\pm}0.5$ for TGPN ($200{\mu}g/mL$) and $22.0{\pm}2.4$ Karmen/mL for PN ($200{\mu}g/mL$). GOT and GTP activities were shown to be dependent on TGPN concentration, and significant reduction in activities could be conformed. The detoxification efficacy of TGPN was higher compared to that of PN. These results suggest that oyster hydrolysate has potential as a healthy food or pro-drug for liver protection.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

본 연구에서는 굴에 다량 함유되어 있는 단백질을 단백질가수분해 효소로 가수분해하여 저분자의 펩타이드로 제조하였으며, 아세트아미노펜 독성에 대한 간 보호 활성을 조사할 목적으로 아세트아미노펜으로 세포 손상을 유도한 HepG-2 세포주에 미치는 굴 가수분해물의 영향을 조사하였다.
굴 가수분해물의 총 아미노산 조성의 합은 TGPN이 PN에 비하여 다소 높았으나, 조성 비율은 큰 차이를 보이지 않았다(Table 1). 이 같은 결과는 단백질 가교결합을 위해 사용한 TGase가 가수분해에 영향을 미치지 않았음을 제시한다. 가장 함량이 높은 아미노산은 glutamic acid, proline과 aspartic acid였으며, arginine의 함량도 비교적 높아 전형적인 패류 단백질의 특징을 보였다.

제안 방법

96 well에 분주한 HepG-2 세포에 아세트아미노펜을 30 mM의 농도로 처리하였고, 아세트아미노펜과 함께 굴 효소 가수분해물을 1, 10, 50, 100 및 200 μg/mL의 농도로 배지에 첨가하여 24시간 배양하였으며, 실리비닌은 간질환 및 간경변 보조치료제로 사용되는 약물로 굴 가수분해물의 아세트아미노펜 유도 손상 간세포 생존율과 비교하기 위해 비교 대조군으로 함께 세포 생존율을 측정하였다.
세포의 생존율은 독성 시험과 같이 Cell Counting Kit-8을 이용하여 측정하였다. CCK-8 kit 시약을 처리한 후 ELISA Microplate reader(VersaMax ELISA Microplate Reader, Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)로 450 nm에서 흡광도를 측정하였으며 세포의 생존율은 시료를 처리하지 않은 대조군에 대비한 시료 처리군의 흡광도 비의 백분율로 표시하였다.
GOT 및 GPT 활성은 기질액인 L-aspartic acid 및 DL-alanine 1 mL에 배양액 0.2 mL를 가해 잘 혼합한 후 37°C에서 GOT는 60분, GPT는 30분간 항온하였다.
GOT 활성은 표준곡선을 이용하여 Karmen unit으로 나타내었다. GOT와 GPT의 활성 비교를 위하여 시료를 처리하지 않은 대조군에 대비한 시료 처리군의 활성을 비교하여 백분율로 나타내었다.
TGPN과 PN 굴 가수분해물의 독성 측정은 각각의 가수분해물의 최종 농도가 50, 100 및 200 μg/mL가 되도록 배지에 녹여 사용하였다.
본 연구는 굴 가수분해물이 아세트아미노펜에 의한 간독성의 무독화 효과를 HepG-2 세포를 사용하여 조사하였다. 굴 가수분해물은 굴 단백질의 가교연결을 위해 TGase로 전 처리하거나(TGPN) 혹은 하지 않고(PN), 1% Protamex와 1% Neutrase 단백질 분해효소로 2단 가수분해하였다. 두 종류의 굴 가수분해물은 아세트아미노펜으로 간 손상을 유도한 세포에 각각 처리하여 세포 생존율을 측정하였으며, 세포 배양 시 배양액으로 유출된 GOT와 GPT 활성을 측정하였다.
굴 가수분해물의 분자량을 측정하기 위하여 Superdex HR peptide 칼럼(1.0×30 cm)을 장착한 AKTA Purifier(GE Healthcare Bio-Sciences AB, Rapsgatan, Uppsala, Sweden)에 0.20 μm nylon filter로 여과한 시료 50 μL를 loading 하였다.
굴 가수분해물의 아미노산 함량은 시료 50 mg을 5 mL의 6 N HCl로 24시간 가수분해한 후 3G-4 glass filter로 여과하여 40℃ 이하의 회전진공증발기(N-1, Rikakikai Co., Ltd., Tokyo, Japan)에서 HCl을 완전히 증발시켜 농축한 다음 citric buffer(pH 2.2)로 25 mL로 정용한 후 아미노산 자동분석기(Biochrom 20, LKB Biochrom Ltd., Cambridge, UK)로 정량 분석하였다.
아세트아미노펜 처리 시 세포 생존율은 30 mM에서 약 50∼60%의 생존율을 보였고 이 농도로 간세포의 손상을 유도하였다. 대조군은 무처리 배지로 배양하고, negative 대조군에는 아세트아미노펜만을 첨가하였으며, 실험군에는 30 mM 아세트아미노펜과 일정한 농도의 굴 가수분해물을 함께 첨가하여 24시간 동안 배양한 후 세포의 생존율을 측정하였다. 세포의 생존율은 독성 시험과 같이 Cell Counting Kit-8을 이용하여 측정하였다.
굴 가수분해물은 굴 단백질의 가교연결을 위해 TGase로 전 처리하거나(TGPN) 혹은 하지 않고(PN), 1% Protamex와 1% Neutrase 단백질 분해효소로 2단 가수분해하였다. 두 종류의 굴 가수분해물은 아세트아미노펜으로 간 손상을 유도한 세포에 각각 처리하여 세포 생존율을 측정하였으며, 세포 배양 시 배양액으로 유출된 GOT와 GPT 활성을 측정하였다. TGPN 가수분해물의 경우 아세트아미노펜만을 처리한 negative 대조군(60.
본 연구는 굴 가수분해물이 아세트아미노펜에 의한 간독성의 무독화 효과를 HepG-2 세포를 사용하여 조사하였다. 굴 가수분해물은 굴 단백질의 가교연결을 위해 TGase로 전 처리하거나(TGPN) 혹은 하지 않고(PN), 1% Protamex와 1% Neutrase 단백질 분해효소로 2단 가수분해하였다.
본 연구에서는 아세트아미노펜으로 간 손상을 유도하고 굴 가수분해물을 함께 처리하여 HepG-2 세포 배양액에 유출된 GOT와 GPT 효소 활성을 측정하였다. GOT 활성은 아세트아미노펜만을 처리한 negative 대조군에 비해 TGPN 과 PN 처리군은 농도가 증가함에 따라 유의적인 감소 효과를 보였다(Table 4).
3 mL/min의 속도로 용출하면서 용출하는 단백질과 펩타이드는 226 nm에서 검출하였다. 분자량은 같은 조건에서 용출한 carbonic anhydrase(분자량 29,000), cytochrome C(분자량 12,400), aprotinin(분자량 6,500), vitamin B₁₂(분자량 1,355) 및 carnosine(분자량 225)으로 작성한 검량곡선에 따라 측정하였다.
TGPN과 PN 굴 가수분해물의 독성 측정은 각각의 가수분해물의 최종 농도가 50, 100 및 200 μg/mL가 되도록 배지에 녹여 사용하였다. 세포의 독성은 시료를 처리하지 않고 배양한 대조군에 대비한 세포 생존율로 측정하였으며, 굴 가수분해물 TGPN과 PN 모든 가수분해물에서 독성은 나타나지 않았다(Table 2). 이 같은 결과는 100 mg 및 200 mg/kg BW/ day를 급이하여 6주 동안 사육한 rat 군에서 치사 혹은 독성을 보이지 않은 Choi의 보고(23)와 일치한다.
세포의 생존율은 독성 시험과 같이 Cell Counting Kit-8을 이용하여 측정하였다.
아세트아미노펜 유도 간세포 생존율 측정에 앞서 HepG2 세포에 대한 굴 가수분해물의 독성을 확인하였다. TGPN과 PN 굴 가수분해물의 독성 측정은 각각의 가수분해물의 최종 농도가 50, 100 및 200 μg/mL가 되도록 배지에 녹여 사용하였다.
아세트아미노펜을 통한 간세포 독성 유도 실험과 같은 방법으로 시료를 처리한 후 배양액을 취해 배양액에 유리된 GOT(glutamic oxaloacetic transaminase) 및 GPT(glutamic pyruvic transaminase) 효소의 활성을 측정하였다. GOT와 GPT의 활성은 아산셋트 GOT, GPT 측정용 시액(아산제약주식회사, 서울, 한국)을 구입하여 사용하였다.
가 유지되도록 배양하였다. 아세트아미노펜을 통한 간세포 독성 유도 실험을 실시하기 전에 굴 가수분해물의 독성을 확인하기 위해 HepG-2의 독성 시험을 수행하였다. 즉 96 well plate에 세포농도 2.
아세트아미노펜의 HepG-2 cell에 대한 독성을 유도하기 위하여 아세트아미노펜을 농도별로 처리한 다음 세포 독성을 측정하는 방법과 동일한 방법으로 세포 생존율을 측정하였다. 아세트아미노펜 처리 시 세포 생존율은 30 mM에서 약 50∼60%의 생존율을 보였고 이 농도로 간세포의 손상을 유도하였다.
즉 96 well plate에 세포농도 2.5×105 cells/mL로 분주한 다음 세포부착을 위해 24시간 배양한 후 시료를 농도별로 처리하여 세포의 독성 유무를 확인하였다.
최근의 임상연구에서 Buchard 등(11)은 hGSTP*C 변종에 의한 아세트아미노펜 간독성의 억제에 관하여 보고하였다. 한편 간독성 측정을 위한 세포주와 관련하여 간세포 독성에 미치는 식물 성분들의 선별과 영향을 평가하고(12,13) 지질 대사의 변화를 평가하기 위하여 HepG-2 세포를 사용하였다(14).

대상 데이터

아세트아미노펜을 통한 간세포 독성 유도 실험과 같은 방법으로 시료를 처리한 후 배양액을 취해 배양액에 유리된 GOT(glutamic oxaloacetic transaminase) 및 GPT(glutamic pyruvic transaminase) 효소의 활성을 측정하였다. GOT와 GPT의 활성은 아산셋트 GOT, GPT 측정용 시액(아산제약주식회사, 서울, 한국)을 구입하여 사용하였다. GOT 및 GPT 활성은 기질액인 L-aspartic acid 및 DL-alanine 1 mL에 배양액 0.
가수분해를 위한 단백질 분해 효소는 바이오 시스 사(Busan, Korea)에서 구입한 neutral protease(Neutrase)와 subtilisin protease(Protamex)를 사용하였으며, 단백질의 가교결합을 위한 transglutaminase(TGase, TG-S)는 Ajinomoto 사(Tokyo, Japan)에서 구입하였다. HepG-2 세포주는 한국세포주은행(KTCC, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였다.
1 g)은 경남 통영 연안의 양식장에서 2008년에서 2009년에 걸쳐 채취하여 인근의 가공공장에서 알굴의 형태로 급속동결 한 제품으로 가공 후 1∼2년 동안 냉동보관 한 제품을 단백질 가수분해 시료로 사용하였다. 가수분해를 위한 단백질 분해 효소는 바이오 시스 사(Busan, Korea)에서 구입한 neutral protease(Neutrase)와 subtilisin protease(Protamex)를 사용하였으며, 단백질의 가교결합을 위한 transglutaminase(TGase, TG-S)는 Ajinomoto 사(Tokyo, Japan)에서 구입하였다. HepG-2 세포주는 한국세포주은행(KTCC, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였다.
두 가지 단백질 분해효소로 가수분해하기 전에 굴 단백질의 가교결합을 위해 transglutaminase로 전 처리한 가수분해물을 TGPN이라 하고, 전처리를 수행하지 않은 가수분해물을 PN이라 하였다. 실험에 사용한 시료는 굴 가수분해물을 증류수에 일정한 농도로 녹여 사용하였다.
실험에 사용한 참굴(Crassostrea gigas, 각장: 5.8±0.4 cm, 각고: 3.2±0.4 cm, 체중: 9.8±2.1 g)은 경남 통영 연안의 양식장에서 2008년에서 2009년에 걸쳐 채취하여 인근의 가공공장에서 알굴의 형태로 급속동결 한 제품으로 가공 후 1∼2년 동안 냉동보관 한 제품을 단백질 가수분해 시료로 사용하였다.
인간 간암 세포인 HepG-2 세포는 10%(v/v) Fetal Bovine Serum(FBS), 페니실린(100 U/mL), 스트렙토마이신(100 μg/mL), 1% 비필수 아미노산, 1 mM sodium pyruvate를 첨가한 MEM 배지로 37°C, 5% CO2가 유지되도록 배양하였다.

데이터처리

통계분석은 Student's t-test를 이용하였고, 대조군에 대한 통계적 유의성은 P<0.05 수준에서 각 실험군 평균값 간의 유의성을 검증하였다.

이론/모형

굴 가수분해물의 제조는 Hur 등(20)의 방법으로 제조하였으며 단백질 분해효소인 1% Protamex와 1% Neutrase로 각각 40℃에서 1시간과 50℃에서 1시간 가수분해하였다. 두 가지 단백질 분해효소로 가수분해하기 전에 굴 단백질의 가교결합을 위해 transglutaminase로 전 처리한 가수분해물을 TGPN이라 하고, 전처리를 수행하지 않은 가수분해물을 PN이라 하였다.
5×10⁵ cells/mL로 분주한 다음 세포부착을 위해 24시간 배양한 후 시료를 농도별로 처리하여 세포의 독성 유무를 확인하였다. 시료의 독성 측정을 위한 세포의 생존율은 Cell Counting Kit-8(CCK-8, Dojindo, Kumamoto, Japan)을 이용하여 측정하였다.

성능/효과

15 g/100 g-시료였다. Cysteine과 methionine의 함황 아미노산의 총량은 TGPN과 PN에서 각각 4.87 g/100-g protein과 4.74 g/100 g-protein으로 필수 아미노산의 기준인 2.5 g/100 g-protein에 비하여 두 배 정도 높은 함량을 보였다. 함황 아미노산은 패류에 대체로 높은 함량으로 함유되어 있으며(36), 굴에 다량 함유하고 있는 글루타치온의 구성 아미노산인 시스테인, 글루탐산 및 글라이신이 글루타치온의 빠른 생성을 유도함으로써 간세포의 손상을 억제하는 것으로 추정된다(33).
GOT 활성은 negative 대조군의 경우에 38.3±0.2 Karmen/mL이었으며, TGPN(200μg/mL)과 PN(200 μg/mL)에서는 19.9±0.5와 22.0±2.4 Karmen/mL로 농도에 따라 유의적인 활성 감소를 확인할 수 있었다.
본 연구에서는 아세트아미노펜으로 간 손상을 유도하고 굴 가수분해물을 함께 처리하여 HepG-2 세포 배양액에 유출된 GOT와 GPT 효소 활성을 측정하였다. GOT 활성은 아세트아미노펜만을 처리한 negative 대조군에 비해 TGPN 과 PN 처리군은 농도가 증가함에 따라 유의적인 감소 효과를 보였다(Table 4). Negative 대조군의 경우에 38.
Negative 대조군의 경우에 38.3±0.2 Karmen/mL이었으며, TGPN(100 μg/mL)과 PN(100 μg/ mL) 농도에서 각각 24.8±3.6 Karmen/mL와 23.5±0.7 Karmen/mL로 나타났으며, TGPN(200 μg/mL)과 PN(200μg/mL)에서는 19.9±0.5와 22.0±2.4 Karmen/mL로 농도에 따라 유의적인 활성 감소를 확인할 수 있었다.
TGPN 굴 가수분해물 처리군은 PN 가수분해물 처리군에 비하여 간세포 증식률이 크게 증가하는 경향을 보였다. 비교대조군으로 실험한 실리비닌은 아세트아미노펜과 함께 처리 시 농도가 증가함에 따라 간세포 생존율이 증가하였으나, 20 μg/mL 이상의 농도에서는 오히려 세포 생존율이 감소하였다.
TGPN 및 PN 가수분해물은 약 360 Da에 해당하는 di- 혹은 tripeptide가 대부분을 차지하였으며, TGPN은 PN에 비하여 void volume에 해당하는 peak의 함량이 줄어든 대신 480 Da에 해당하는 peak가 분명히 해리되어 차이를 보이고 있었다(Fig. 1). 한편 TGPN은 PN에 비하여 360 Da 이하에서 다양한 peak 분포를 보여 분자량 분포에 확실한 차이를 보였다.
더욱이 TGPN(200 μg/mL)과 PN(200 μg/mL)은 미처리 대조군과 거의 유사한 정도까지 활성이 저하하였다. TGPN과 PN 가수분해물 모두 GOT와 GPT에서 활성이 감소하였고 TGPN이 PN보다 효과적인 것으로 나타났다. 실리비닌의 경우에는 10 μg/mL의 농도에서 유의적인 활성 감소가 인지되었으나 굴 가수분해물의 활성 저하 효능이 더 큰 것으로 나타났다.
96 well에 분주한 HepG-2 세포에 아세트아미노펜을 30 mM의 농도로 처리하였고, 아세트아미노펜과 함께 굴 효소 가수분해물을 1, 10, 50, 100 및 200 μg/mL의 농도로 배지에 첨가하여 24시간 배양하였으며, 실리비닌은 간질환 및 간경변 보조치료제로 사용되는 약물로 굴 가수분해물의 아세트아미노펜 유도 손상 간세포 생존율과 비교하기 위해 비교 대조군으로 함께 세포 생존율을 측정하였다. TGPN과 PN 굴 가수분해물은 매우 높은 간세포 생존율을 보였다. 시료 무첨가 대조군의 세포 생존율을 100으로 보았을 때 아세트아미노펜만을 처리한 negative 대조군은 60.
가장 함량이 높은 아미노산은 glutamic acid, proline과 aspartic acid였으며, arginine의 함량도 비교적 높아 전형적인 패류 단백질의 특징을 보였다. TGPN과 PN의 조단 백질 함량은 각각 49.2%와 43.7%로(20), 총 구성 아미노산의 함량인 36.69 g/100 g-시료와 30.77 g/100 g-시료에 비하여 각각 12.51 g과 12.92 g의 차이를 보였다. 이 같은 차이는 유리아미노산의 함량에 기인하는 것으로 추정된다.
이 같은 결과는 단백질 가교결합을 위해 사용한 TGase가 가수분해에 영향을 미치지 않았음을 제시한다. 가장 함량이 높은 아미노산은 glutamic acid, proline과 aspartic acid였으며, arginine의 함량도 비교적 높아 전형적인 패류 단백질의 특징을 보였다. TGPN과 PN의 조단 백질 함량은 각각 49.
굴 가수분해물의 총 아미노산 조성의 합은 TGPN이 PN에 비하여 다소 높았으나, 조성 비율은 큰 차이를 보이지 않았다(Table 1). 이 같은 결과는 단백질 가교결합을 위해 사용한 TGase가 가수분해에 영향을 미치지 않았음을 제시한다.
비교대조군으로 실험한 실리비닌은 아세트아미노펜과 함께 처리 시 농도가 증가함에 따라 간세포 생존율이 증가하였으나, 20 μg/mL 이상의 농도에서는 오히려 세포 생존율이 감소하였다.
시료 무첨가 대조군의 세포 생존율을 100으로 보았을 때 아세트아미노펜만을 처리한 negative 대조군은 60.7±3.2%의 생존율을 보인 반면 TGPN 가수분해물의 경우 각각 50 μg/ mL, 100 μg/mL 및 200 μg/mL의 농도에서 92.1±6.7%, 136.2±1.4% 및 179.6±3.8%의 높은 세포 생존율을 보여, 아세트아미노펜으로만 처리한 negative 대조군에 비해 31.4∼118.9%의 높은 간세포의 생존율 증가를 보였다(Table 3).
GPT 활성 측정에서도 GOT와 유사한 결과를 보여주었다(Table 5). 아세트아미노펜만을 처리한 negative 대조군에 비해 TGPN과 PN 처리군은 GOT와 마찬가지로 농도가 증가함에 따라 크게 감소하였다. GOT의 활성은 미처리 대조군의 경우에 18.
아세트아미노펜은 예비실험을 통해 세포 생존율이 미처리 대조군에 비해 50∼60% 사멸되는 농도가 30 mM임을 확인하였으며 동일 농도에서 HepG-2 세포의 손상을 유도하였다.
이 같은 결과는 미처리 대조군 19.5±0.7 Karmen/mL와 거의 유사한 수준까지 활성이 감소되었음을 확인하였다.
이 같은 세포 생존율의 결과는 실리비닌 용량의 2/5∼1/5에 해당하여 단일 물질인 약물과 비교할 때도 굴 가수분해물의 간세포 재생 효능이 매우 높음을 확인할 수 있었다.
즉 100 μg/mL 이상의 농도에서는 간 손상은 관측되지 않았고 배양한 세포보다 오히려 세포 증식률이 높은 것에 미루어 높은 간세포 재생 효능을 확인할 수 있었다.

후속연구

그리고 GPT 활성도 GOT와 같은 경향의 활성을 나타내었다. 이 같은 결과에 미루어 굴 유래 가수분해물의 간 보호 건강 기능 식품 혹은 약물 개발의 가능성을 확인하였으며 앞으로 가수분해 펩티드 중의 유효성분에 대한 구조 동정과 작용 기전에 관한 연구가 필요할 것으로 보인다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	보조 식품 및 대체 의약으로서 천연물 유래 생물 분자가 유력한 치료제로 간주되고 있는 이유는?	최근 보조 식품 및 대체 의약으로서 천연물 유래 생물 분자들의 개발과 수행을 위한 요구가 증가하고 있으며 제약 산업 연구를 위한 후보 물질로 사용되고 있다. 특히 천연자원에서 얻은 이들 새로운 분자들은 일반 식품에서 유래하여 안전하기 때문에 유력한 치료제로 간주되고 있다(15). 이소플라본의 일종인 genistein은 아세트아미노펜 생물 전환을 저해하고 대사와 항산화 효소 활성의 조절을 통해 산화 스트레스에 저항하기 때문에 아세트아미노펜 유도 간독성을 방지하고 간을 보호한다고 보고하였다(16).
	아세트아미노펜은 무엇인가?	아세트아미노펜은 진통 및 해열제로 전 세계에 걸쳐 널리 사용되고 있는 약물로, 과도한 투약은 심각하고 치명적인간 손상을 유도하고 간세포 괴사의 원인이 된다(1,2). 아세트아미노펜에 의해 유도된 간 손상에 관한 연구에 따르면 아세트아미노펜은 체내에서 시토크롬 P450에 의해 Nacetyl-p-benzoquinone imine(NAPQI)과 같은 높은 반응 성의 대사 중간생성물이 되는데 이것이 간 괴사의 원인이다 (3).
	아세트아미노펜의 과도한 투약은 어떤 문제가 생기는가?	아세트아미노펜은 진통 및 해열제로 전 세계에 걸쳐 널리 사용되고 있는 약물로, 과도한 투약은 심각하고 치명적인간 손상을 유도하고 간세포 괴사의 원인이 된다(1,2). 아세트아미노펜에 의해 유도된 간 손상에 관한 연구에 따르면 아세트아미노펜은 체내에서 시토크롬 P450에 의해 Nacetyl-p-benzoquinone imine(NAPQI)과 같은 높은 반응 성의 대사 중간생성물이 되는데 이것이 간 괴사의 원인이다 (3).

참고문헌 (37)

Choi JH, Choi CY, Lee KJ, Hwang YP, Chung YC, Jeong HG. 2009. Hepatoprotective effects of an anthocyanin fraction from purple-fleshed sweet potato against acetaminophen-induced liver damage in mice. J Med Food 12: 320-326.

원문보기 상세보기
Williams CD, McGill MR, Farhood A, Jaeschke H. 2013. Fas receptor-deficient lpr mice are protected against acetaminophen hepatotoxicity due to higher glutathione synthesis and enhanced detoxification of oxidant stress. Food Chem Toxicol 58: 228-235.

상세보기
Hinson JA, Reid AB, McCullough SS, James LP. 2004. Acetaminophen-induced hepatoxicity: role of metabolic activation, reactive oxygen/nitrogen species, and mitochondrial permeability transition. Drug Metab Rev 36: 805-822.

상세보기
Hinson JA, Pike SL, Pumford NR, Mayeux PR. 1998. Nitrotyrosine-protein adducts in hepatic centrilobular areas following toxic doses of acetaminophen in mice. Chem Res Toxicol 11: 604-607.

상세보기
Beckman JS, Koppenol WH. 1996. Nitric oxide, superoxide, and peroxynitrite: the good, the bad and ugly. Am J Physiol 271: C1424-1437.
Nerland DE, Cai J, Pierce WM Jr, Benz FW. 2001. Covalent binding of acrylonitrile to specific rat liver glutathione S-transferses in vivo. Chem Res Toxicol 14: 799-806.

상세보기
Mitchell JR, Jollow DJ, Potter WZ, Davis DC, Gillette JR, Brodie BB. 1973. Acetaminophen-induced hepatic necrosis. I. Role of drug metabolism. J Pharmacol Exp Ther 187: 185-194.

상세보기
Saito C, Zwingmann C, Jaeschke H. 2009. Novel mechanisms of protection against acetaminophen hepatotoxicity in mice by glutathione and N-acetylcysteine. Hepatology 51: 246-254.
Allameh A, Vansoun EY, Zarghi A. 1997. Role of glutathione conjugation in protection of weanling rat liver against acetaminophen-induced hepatotoxicity. Mech Ageing Dev 95: 71-79.

상세보기
Dragovic S, Venkataraman H, Begheijn S, Vermeulen NP, Commandeur JN. 2014. Effect of human glutathione Stransferase hGSTP1-1 polymorphism on the detoxification of reactive metabolites of clozapine, diclofenac and acetaminophen. Toxicol Lett 224: 272-281.

상세보기
Buchard A, Eefsen M, Semb S, Andersen SE, Morling N, Bendtsen F, Larsen FS, Dalhoff K. 2012. The role of the glutathione S-transferase genes GSTT1, GSTM1, and GSTP1 in acetaminophen-poisoned patients. Clin Toxicol (Phila) 50: 27-33.

상세보기
Thabrew MI, Hughes RD, McFarlane IG. 1997. Screening of hepatoprotective plant components using a HepG2 cell cytotoxicity assay. J Pharm Pharmacol 49: 1132-1135.

상세보기
Lee EG, Kim KB, Jeong JM. 2006. Hepatoprotective effects of poly herbal formulation (Hepa-1000) on t-BHP-induced toxicity in human hepatoma cells. J Korean Soc Food Sci Nutr 35: 1121-1126.

원문보기 상세보기
Mochizuki Y, Maebuchi M, Kohno M, Hirotsuka M, Wadahama H, Moriyama T, Kawada T, Urade R. 2009. Changes in lipid metabolism by soy ${\beta}$ -conglycinin-derived peptides in HepG2 cells. J Agric Food Chem 57: 1473-1480.

상세보기
Ghosh J, Sil PC. 2013. Arjunolic acid: A new multifunctional therapeutic promise of alternative medicine. Biochimie 95: 1098-1109.

상세보기
Fan YJ, Rong Y, Li PF, Dong WL, Zhang DY, Zhang L, Cui MJ. 2013. Genistein protection against acetaminophen-induced liver injury via its potential impact on the activation of UDP-glucuronosyltransferase and antioxidant enzymes. Food Chem Toxicol 55: 172-181.

상세보기
Sharma S, Singh R, Rana S. 2011. Bioactive peptides: a review. INT J Bioautomation 15: 223-250.
Fiat AM, Migliore-Samour D, Jolles P, Drouet L, Bal dit Sollier C, Caen J. 1993. Biologically active peptides from milk proteins with emphasis on two examples concerning antithrombotic and immunomodulating activities. J Dairy Sci 76: 301-310.

상세보기
Mazoyer E, Levy-Toledano S, Rendu F, Hermant L, Lu H, Fiat AM, Jolles P, Caen J. 1990. KADS, a new peptide derived from human lactotransferrin, inhibits platelet aggregation and release reaction. Eur J Biochem 194: 43-49.

상세보기
Hur SI, Park SH, Lee SS, Choung SY, Choi YJ. 2013. Antioxidative effect of oyster hydrolysate on the serum and hepatic homogenate in SD-rats. J Korean Soc Food Sci Nutr 42: 1940-1948.

원문보기 상세보기
Xie CL, Ha JM, Choung SY, Jin SK, Choi YJ. 2014. Physicochemical properties and stability of the spray-dried oyster hydrolysate with antihpertensive effect by pilot scale processing. J Aquat Food Prod Technol (In Press).
Ashie INA, Lanier TC. 2000. Transglutaminases in seafood processing. In Seafood Enzymes. Haard NF, Simpson BK, eds. Marcel Dekker, Inc., Manhattan, NY, USA. p 147-166.
Choi YJ. 2007. Production of microbial media and functional peptides using under-utilized oyster. Ministry of Oceans and Fisheries project No 20040078.
Kim YK, Kim YH, Kim DH, Lee KT. 2005. Cytoprotective effects of natural flavonoids on carbon tetrachloride-induced toxicity in primary cultures of rat hepatocytes. Kor J Pharmacogn 36: 224-228.
Lauterburg BH, Corcoran GB, Mitchell JR. 1983. Mechanism of action of N-acetylcysteine in the protection against the hepatotoxicity of acetaminophen in rats in vivo. J Clin Invest 71: 980-991.

상세보기
Tucker JR. 1998. Late-presenting acute acetaminophen toxicity and the role of N-acetylcysteine. Pediatr Emerg Care 14: 424-426.

상세보기
Adam Algren D. 2008. Review of N-acetylcysteine for the treatment of acetaminophen toxicity in pediatrics. Presented at second meeting of the Subcommittee of the Expert Committee on the Selection and Use of Essential Medicines. Geneva, Switzerland.
Golestan Jahromi M, Nabavizadeh F, Vahedian J, Nahrevanian H, Dehpour AR, Zare-Mehrjardi A. 2010. Protective effect of ghrelin on acetaminophen-induced liver injury in rat. Peptides 31: 2114-2117.

상세보기
Kheradmand A, Alirezaei M, Birjandi M. 2010. Ghrelin promotes antioxidant enzyme activity and reduces lipid peroxidation in the rat ovary. Regul Pept 162: 84-89.

상세보기
Pradhan SC, Girish C. 2006. Hepatoprotective herbal drug, silymarin from experimental pharmacology to clinical medicine. Indian J Med Res 124: 491-504.

상세보기
Ferrandiz ML, Bustos G, Paya M, Gunasegaran R, Alcaraz MJ. 1994. Hispidulin protection against hepatotoxicity induced by bromobenzene in mice. Life Sci 55: PL145-150.
Barriault C, Audet M, Yousef IM, Tuchweber B. 1994. Protection by indomethacin against the lethality and hepatotoxicity of phalloidin in mice. Toxicol Lett 71: 257-269.

상세보기
Wu G, Fang YZ, Yang S, Lupton JR, Turner ND. 2004. Glutathione metabolism and its implications for health. J Nutr 134: 489-492.

상세보기
Williamson JM, Boettcher B, Meister A. 1982. Intracellular cysteine delivery system that protects against toxicity by promoting glutathione synthesis. Proc Natl Acad Sci USA 79: 6246-6249.

상세보기
Davern TJ 2nd, James LP, Hinson JA, Polson J, Larson AM, Fontana RJ, Lalani E, Munoz S, Shakil AO, Lee WM. 2006. Measurement of serum acetaminophen-protein adducts in patients with acute liver failure. Gastroenterology 130: 687-694.

상세보기
NFRDI. 2009. Chemical composition of marine products in Korea. National Fisheries Research and Development Institute, Busan, Korea. p 112.
Chung IK, Kim JS, Hur MS. 2006. Improving the functional properties of oyster hydrolysates by two-step enzymatic hydrolysis. J Kor Fish Soc 39: 269-277.

원문보기 상세보기

저자의 다른 논문 :

LOADING...

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증