Oxytetracycline과 neomycin 복합제의 약욕에 따른 양식 넙치(Paralichthys olivaceus)의 근육내 잔류량 변화 Muscle distribution level after dipping administration of a combination of oxytetracycline and neomycin in olive flounder, Paralichthys olivaceus원문보기
본 연구에서는 넙치 (평균체장 및 무게: $20{\pm}2.0cm$, $70{\pm}5.0g$)에 옥시테트라사이클린(oxytetracycline, OTC)-네오마이신(neomycin, N) 복합제를 25-10 ppm 및 50-20 ppm으로 용해하여 2일 동안, 3시간씩 약욕을 실시하였고, 약물투여 중지 후 1일, 5일, 14일, 40일째에 시험군별로 각각 5마리씩 넙치의 근육을 채취하여 항생제 잔류농도를 조사하였다. OTC와 N 표준용액을 농도별로 희석하여 표준곡선을 작성한 결과 각각 $R^2=0.9999$, $R^2=0.9952$로 양호한 직선성을 나타내었고, OTC와 N 회수율은 각각 90~93%, 88~95%가 관찰되었다. 잔류농도에 대한 측정결과, OTC와 N 복합제를 25-10 ppm 투여한 시험군에서 1일째 OTC는 $0.97{\pm}0.084{\mu}g/ml$이 검출되었고, N은 $0.118{\pm}0.079{\mu}g/ml$이 검출되었으나 5일째 이후부터 검출이 되지 않았다. OTC와 N 복합제를 50-20 ppm 투여한 시험군에서 1일째 OTC는 $1.324{\pm}0.062{\mu}g/ml$이 검출되었고 N은 $0.788{\pm}0.05{\mu}g/ml$이 검출되었으나 5일째 이후부터 검출이 되지 않았다.
본 연구에서는 넙치 (평균체장 및 무게: $20{\pm}2.0cm$, $70{\pm}5.0g$)에 옥시테트라사이클린(oxytetracycline, OTC)-네오마이신(neomycin, N) 복합제를 25-10 ppm 및 50-20 ppm으로 용해하여 2일 동안, 3시간씩 약욕을 실시하였고, 약물투여 중지 후 1일, 5일, 14일, 40일째에 시험군별로 각각 5마리씩 넙치의 근육을 채취하여 항생제 잔류농도를 조사하였다. OTC와 N 표준용액을 농도별로 희석하여 표준곡선을 작성한 결과 각각 $R^2=0.9999$, $R^2=0.9952$로 양호한 직선성을 나타내었고, OTC와 N 회수율은 각각 90~93%, 88~95%가 관찰되었다. 잔류농도에 대한 측정결과, OTC와 N 복합제를 25-10 ppm 투여한 시험군에서 1일째 OTC는 $0.97{\pm}0.084{\mu}g/ml$이 검출되었고, N은 $0.118{\pm}0.079{\mu}g/ml$이 검출되었으나 5일째 이후부터 검출이 되지 않았다. OTC와 N 복합제를 50-20 ppm 투여한 시험군에서 1일째 OTC는 $1.324{\pm}0.062{\mu}g/ml$이 검출되었고 N은 $0.788{\pm}0.05{\mu}g/ml$이 검출되었으나 5일째 이후부터 검출이 되지 않았다.
In the present study, we performed a dipping of olive flounder (average length and weight: $20{\pm}2.0cm$, $70{\pm}5.0g$) for a period of three hours a day, over two days, in a melted complex of oxytetracycline (OTC) and neomycin (N), by dissolving 25-10 ppm or 50-20 ppm in wat...
In the present study, we performed a dipping of olive flounder (average length and weight: $20{\pm}2.0cm$, $70{\pm}5.0g$) for a period of three hours a day, over two days, in a melted complex of oxytetracycline (OTC) and neomycin (N), by dissolving 25-10 ppm or 50-20 ppm in water. Subsequently, the remaining antibiotic density in muscle tissue collected from olive flounder was investigated, 1, 5, 14 and 40 days after discontinuation of the medication. 5 fish were used from each group. The standard graph drawn from the results of diluting two standard solutions of OTC and N based on various density levels, showed a relatively straight line with an $R^2$ of 0.9999 and 0.9952, respectively. The recovery rate of OTC was shown to be 90-93% and N, 88-95%. Upon measurement of the remaining antibiotic density in the test group that had been exposed to 25-10 ppm of the complex of OTC and N, $0.97{\pm}0.084{\mu}g/ml$ of OTC and $0.118{\pm}0.079{\mu}g/ml$ N were detected on 1 day of the test. No antibiotic density was detected after day 5 of the test. Regarding the test group that were exposed to 50-20 ppm of the complex of OTC and N, $1.324{\pm}0.062{\mu}g/ml$ of OTC and $0.788{\pm}0.05{\mu}g/ml$ N were detected on day 1 of the test, and no antibiotic density was detected after day 5 of the test.
In the present study, we performed a dipping of olive flounder (average length and weight: $20{\pm}2.0cm$, $70{\pm}5.0g$) for a period of three hours a day, over two days, in a melted complex of oxytetracycline (OTC) and neomycin (N), by dissolving 25-10 ppm or 50-20 ppm in water. Subsequently, the remaining antibiotic density in muscle tissue collected from olive flounder was investigated, 1, 5, 14 and 40 days after discontinuation of the medication. 5 fish were used from each group. The standard graph drawn from the results of diluting two standard solutions of OTC and N based on various density levels, showed a relatively straight line with an $R^2$ of 0.9999 and 0.9952, respectively. The recovery rate of OTC was shown to be 90-93% and N, 88-95%. Upon measurement of the remaining antibiotic density in the test group that had been exposed to 25-10 ppm of the complex of OTC and N, $0.97{\pm}0.084{\mu}g/ml$ of OTC and $0.118{\pm}0.079{\mu}g/ml$ N were detected on 1 day of the test. No antibiotic density was detected after day 5 of the test. Regarding the test group that were exposed to 50-20 ppm of the complex of OTC and N, $1.324{\pm}0.062{\mu}g/ml$ of OTC and $0.788{\pm}0.05{\mu}g/ml$ N were detected on day 1 of the test, and no antibiotic density was detected after day 5 of the test.
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문제 정의
옥시테트라사이클린 및 네오마이신은 에드워드병, 비브리오병, 연쇄구균병 등의 예방과 치료에 효과가 있는 것으로 알려져 있으며, 넙치의 대한 옥시테트라사이클린 휴약기간은 40일로 권고하고 있으며, 네오마이신의 넙치에 대한 휴약기간은 정해지지 않았으나, 잉어에서 5일째로 규정되어 있다 (NFRDI, 2010). 본 시험에서는 OTC-N 복합제를2 5-10 ppm, 50-20 ppm 농도로 2일 동안, 3시간씩 약욕을 실시하고 두 항생제의 잔류량의 변화를 분석하고자 하였다. 시험군에 약욕을 실시한 후, 1일째에 OTC는 25-10 ppm 투여군에서 0.
본 연구에서는 넙치 양식장에서 세균성 질병의 예방이나 치료를 위하여 사용되고 있는 OTC와 N 복합제에 대한 식품위생학적 안전 확보를 위하여 HPLC (high performance liquid chromatography)를 이용하여 OTC와 N의 잔류량 변화를 조사하였다.
제안 방법
Column (Shimadzu, Japan)은 C18 (4.6 mm × 250 mm, 5 μm)를 사용하여, 이동상으로 methanol : acetonitrile : 0.01 M oxalic acid (10:12:78, v/v/v)를 1 ml/min의 유속으로 흘려주었으며, injection volume은 100 μl, column 온도는 30℃의 조건으로 UV 360nm에서 분석하였다.
OTC (0.1, 0.2, 0.5 ppm) 및 N (0.25, 0.5, 1.0 ppm)을 이동상에 녹인 표준용액을 HPLC에 20 μl 주입하여 도출된 peak면적에 의하여 표준곡선을 작성하였다.
넙치(평균체장 및 무게: 20±2.0 cm, 70±5.0 g)는 총 2개의 110 L 원형플라스틱 수조에 각 수조당 40마리씩 나누어 주었다.
본 연구에서는 넙치 (평균체장 및 무게: 20±2.0cm, 70±5.0 g)에 옥시테트라사이클린(oxytetracycline, OTC)-네오마이신(neomycin, N) 복합제를 25-10 ppm및 50-20 ppm으로 용해하여 2일 동안, 3시간씩 약욕을 실시하였고, 약물투여 중지 후 1일, 5일, 14일, 40일째에 시험군별로 각각 5마리씩 넙치의 근육을 채취하여 항생제 잔류농도를 조사하였다.
수산물에서 N을 분석하기 위한 HPLC chromatography system(Shimadzu, Japan)으로 column (Shimadzu, Japan)은 C18 (2.1 mm × 150 mm, 3 μm)을 사용하여, 이동상으로 heptafluorobutyric acid (HFBA) : acetonitrile을 gradient (10% B용매를 15분 동안 40%까지 증가시키고 5분간 유지하였으며 1분간 다시 10%로 감소시킨 후 4분간 유지)로 이용하였으며 유속은 0.4ml/min로 하였다.
0 ppm)을 이동상에 녹인 표준용액을 HPLC에 20 μl 주입하여 도출된 peak면적에 의하여 표준곡선을 작성하였다. 시료에 대한 회수율은 OTC 0.2, 0.5 ppm농도와 N 0.5, 1.0 ppm 농도로 넙치의 근육에 첨가한 후, 시료의 전처리 방법에 따라 추출 후, HPLC에 주입하여 표준용액과 머무름 시간을 비교하여, 해당 피크의 면적 값을 표준용액의 직선 희귀방정식에 대입하여 계산하였다.
진탕기를 이용하여 10분간 진탕한 후, 1,200 × g에서 10분간 원심분리하였다.
대상 데이터
실험에 사용된 OTC-N 복합제는 Komipharm사(본 제재 1 kg 중 OTC 250 g, N 100 g)에서 구입하여 25-10 ppm, 50-20 ppm으로 용해 한 후, 2일 동안, 3시간씩 약욕을 실시하였고(Table 1), 약물투여 중지 후 1일, 5일, 14일, 40일째에 시험군 별로 5마리씩 모은 넙치 근육을 사용하여 실험을 실시하였다.
실험에 사용된 실험어는 제주도내 양식장에서 어류질병에 대한 이력이 없는 넙치를 구입하여, 제주대학교 해양과환경연구소로 운송시켜 1주 동안 시판 배합사료를 공급하면서 실험환경에 적응할 수 있도록 순치하였다. 넙치(평균체장 및 무게: 20±2.
성능/효과
062 μg/ml이 검출되었고, 5일째 이후부터 검출이 되지 않았다(Table 3). 25-10 ppm 및 50-20 ppm 투여군에서 1일째에 검출된 결과는 최대잔류허용기준인 0.2 ppm을 넘었으나, 5일째 이후부터 최대잔류허용 기준치 이하로 검출되었다. 이러한 결과는 Kim et al.
OTC (0.1, 0.2, 0.5 ppm) 및 N (0.25, 0.5, 1.0 ppm)표준용액을 농도별로 희석하여 HPLC로 분석한 다음 농도별에 따른 peak 면적 비를 이용하여 표준곡선을 작성한 결과, 각각 R2= 0.9999, R2= 0.9952로 넓이가 비례하여 양호한 직선성(r2>0.995)을 나타내었다(Fig. 3).
OTC와 N 표준용액을 농도 별로 희석하여 표준곡선을 작성한 결과 각각 R2= 0.9999, R2= 0.9952로 양호한 직선성을 나타내었고, OTC와 N 회수율은 각각 90∼93%, 88∼95%가 관찰되었다.
05 μg/ml이 검출되었고, 5일째 이후부터 검출이 되지 않았다(Table 4). 검출된 그룹 모두 1일째에 0.5 ppm을 넘지 않아 식품의약품안전청에 명시한 잔류허용 기준치 이하로 검출되었으며, 잔류량 분석기간 5일부터 40일까지 검출이 되지 않았다. 그러므로, 넙치에 대한 N의 안정적인 휴약기간 설정이 가능하다고 여겨지나 양식 현장에서 발생하는 다양한 문제점의 해결과 항생제의 올바른 처방을 위하여 더 많은 데이터의 축척을 위한 연구가 필요할 것이다.
본 실험의 N 결과, 1일째에 25-10 ppm 투여군에서 0.118±0.079 μg/ml, 50-20 ppm 투여군에서 0.788±0.05 μg/ml이 검출되었고, 5일째 이후부터 검출이 되지 않았다(Table 4).
0 ppm으로 spiking한 경우 회수율은 각각 100%, 98%, 97%로 보고하였다. 본 실험의 회수율 결과, 근육에 0.2, 0.5 ppm으로 첨가한 각각의 농도의 평균 회수율은 90.12%, 93.65%를 나타내었다(Table 2). 이러한 결과는 Hah et al.
잔류농도에 대한 측정결과, OTC와 N 복합제를 25-10 ppm 투여한 시험군에서 1일째 OTC는 0.97±0.084 μg/ml이 검출되었고, N은 0.118±0.079 μg/ml이 검출되었으나 5일째 이후부터 검출이 되지 않았다.
이러한 결과는 국내의 식품안전과 관련하여 동물용 의약품의 식품 내 검출분석법은 계속 수정·보완되고 있다. 현재 본 연구에 사용된 HPLC 분석기와 다른 액체크로마토그래프/질량분석기를 이용한 방법으로 회수율의 편차를 보이는 것으로 여겨진다.
후속연구
5 ppm을 넘지 않아 식품의약품안전청에 명시한 잔류허용 기준치 이하로 검출되었으며, 잔류량 분석기간 5일부터 40일까지 검출이 되지 않았다. 그러므로, 넙치에 대한 N의 안정적인 휴약기간 설정이 가능하다고 여겨지나 양식 현장에서 발생하는 다양한 문제점의 해결과 항생제의 올바른 처방을 위하여 더 많은 데이터의 축척을 위한 연구가 필요할 것이다.
이번 연구의 결과는 OTC 및 N을 복합제로 사용하였을 때 넙치의 근육내 항생제의 잔류량를 조사한 것으로서 각 항생제에 대한 휴약기간 내에 배출이 일어나 두 항생제가 검출되지 않은 것을 확인할 수 있었으며, 향후에는 이러한 복합제가 세균에 대하여 상승작용을 유발시켜 강력한 항균력을 나타내는지에 대한 연구가 필요한 것으로 여겨진다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
옥시테트라사이클린이란?
옥시테트라사이클린(oxytetracycline, OTC)은 테트라사이클린계 항생물질에 속하며, 세균의 리보솜에서 단백질 합성을 억제하여 세균의 성장을 저해하는 정균작용을 갖는 광범위한 항생제이고, 주로 Streptococcus sp., Edwardsiella sp.
옥시테트라사이클린의 투여 방식은?
, Pseudomonas sp. 등에 효과를 나타내며, 예방과 치료를 하기 위해 경구투여 및 약욕의 방법으로 사용되고 있다(KAHPA, 2001).
양식어류의 항생제 사용 증가로 나타날 수 있는 부정적인 영향은?
그러나 어류에 대한 소비량이 증가하면서 양식 어류의 공급이 증가되고 그에 따라 고밀도 사육방법이 성해하면서 양식어류에서 질병 발생률이 증가되고 있다. 일반적으로 어류 질병에 대한 대처 방법으로 항생제를 사용하고 있으며, 주로 질병 발생을 예방하거나 치료를 목적으로 사용되었으나, 최근에는 사료와 혼합하여 어류의 성장 촉진을 위한 목적으로도 사용되어지고 있다(Jo et al., 2010; Son et al., 2011). 이러한 어류양식장에서의 항생제 사용 증가는 질병 원인균의 항생제 내성을 증가시켜 질병에 대한 약품의 효율성이 떨어뜨릴 뿐만 아니라, 잔류허용기준치를 초과한 수산물을 지속적으로 섭취할 경우 인체에 내성이 생겨 질병 치료가 제대로 되지 않는 등의 직·간접적인 영향을 미칠 수 있다. 그러나 이러한 의약품은 사용방법과 용량 및 출하 전 휴약기간 등을 준수하면 어체 내에서 소실되기 때문에 안전성을 확보할 수 있다 (KFDA,2009).
참고문헌 (12)
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