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문제 정의
- syringae pv. syringae에 의한 세균점무늬병 방제를 위한 박과종자 처리약제를 선발하기 위하여 농용항생제 등 6종 약제의 병원균 생장억제효과와 종자처리 및 유묘기 처리에 의한 방제 효과를 조사하였다.
제안 방법
- 4시간 진탕 후 애호박 종자를 35℃ 건조기에서 24시간 건조하여 병원균 감염종자를 조제하였다.
- Syringae pv. syringae NWB SC131 균주 현탁액 150 ml를 첨가하여 진탕배양기에서 200rpm으로 4시간 동안 진탕하였다. 4시간 진탕 후 애호박 종자를 35℃ 건조기에서 24시간 건조하여 병원균 감염종자를 조제하였다.
- syringae NWSC 131 현탁액(108 cfu/ml) 100 μl를 도말하고, 병원균이 도말된 배지 중앙에 화염 멸균된 5 mm 코르크보러(cork borer)를 이용하여 agar plug를 제거하였다.
- syringae pv. syringae에 의한 세균점무늬병 방제 효과를 검정하였다. 병원균을 접종하고 약제를 처리하지 않은 약제 무처리구에서 발병율은 87.
- syringae pv. syringae의 생장억제 효과가 높은 방제약제를 선발하기 위하여 시판중인 살균제 5종(Streptomycin 20% WP, oxtetracycline 17% WP, oxolinic acid 20% WP, streptomycin 5% + validamycin-A 15% WP, oxytetracycline 1.5% + streptomycin 18.8% WP와 dimethyl benzyl ammonium chlorides 10% + dimethyl ethylbenzyl ammonium chlorides 10% SL을 대상으로 항세균활성을 평판배지에서 검정하였다.
- Pseudomonas syringae pv. syringae의한 애호박 세균점무늬병 방제를 위한 종자처리용 약제를 선발하기 위하여 현재 판매되고 있는 6종의 살균제의 병원균에 대한 생장억제효과를 검정하였다. 검정결과 oxytetracycline 170 ppm 처리 시 생장저지환의 크기가 20.
- 각각의 약제에 침지 처리한 애호박종자를 온실에서 플라스틱 폿트에 파종하여 병 발생 결과를 조사하였다. 그 결과 streptomycin 20% WP와 oxytetracycline 1.
- 병원균 감염종자에 대한 약제 침지 효과를 조사하기 위하여 Streptomycin 20%, oxytetracycline 17% WP와 oxytetracyclin 1.5% + streptomycin 18.8% WP 2,000배액, 1,000배액, 500배액에 각각의 인공감염종자 30g씩을 4시간 동안 침지한 후 King’s B배지에 도말하여 병원균의 감염농도를 조사 하였고, 온실(25 ± 3℃)에서 50구 폿트에 파종하여 2주 후 발생한 점무늬병 발생 정도를 조사하였다.
- 병원균 생장억제 실험에서 우수한 생장억제효과를 보인 oxytetracycline 1.5% + streptomycin sulfate 18.8% WP와 oxytetracycline 17% WP를 대상으로 온실에서 유묘기에 병원균에 대한 약제 방제효과를 검정하였다. 애호박 종자를 50구 폿트에 파종하여 25 ± 3℃ 온실조건에 재배하였다.
- 병원균 접종 후 18시간 동안 암조건, 상대습도 80%을 유지시켰다. 병원균 접종 24시간 후에 선발한 항생제 1,000배액을 1회 분무 살포하고 7일 후 세균점늬병 발병률과 방제효과를 조사하였다.
- 본 연구에 사용한 약제 각 1,000배액을 50 μl를 뚫어 놓은 agar plug에 넣은 후 28℃, 48시간 배양하고, agar plug 주변에 생긴 생장 저지원(clear zone)의 직경을 측정하여 병원균에 대한 생장억제 효과를 조사하였다.
- 애호박 종자를 50구 폿트에 파종하여 25 ± 3℃ 온실조건에 재배하였다.
- 애호박 종자처리를 위해 선발한 3가지 약제(oxytetracycline 17% WP, Oxytetracycline 1.5% + streptomycin sulfate 18.8% WP, Streptomycin 20% WP)의 500배액 처리에서 병원균 콜로니가 자라지 못했다. Streptomycin 20% WP의 2,000배액 처리구에서는 280 cfu/g, oxytetracycline 17% WP 2,000배액 처리구에서는 80 cfu/g 각각 검출되었다.
대상 데이터
- Syringae pv. syringae NWB SC131을 108cfu/ml 농도로 분무 접종하였다. 병원균 접종 후 18시간 동안 암조건, 상대습도 80%을 유지시켰다.
데이터처리
- a)Values denoted by the same letter are not significantly different by Duncan’s multiple range test (P ≤ 0.05).
- 모든 실험은 3반복으로 수행되었으며, 결과들은 평균값으로 표시하였다. 처리 평균간 비교를 위하여 SAS 프로그램(SAS Institute, Inc.
- 처리 평균간 비교를 위하여 SAS 프로그램(SAS Institute, Inc., Cary, NC, USA)을 이용해 ANOVA 분석 및 Ducan 다중검정(P ≤ 0.05)을 수행하였다.
성능/효과
- 8% WP의 500배액, 1,000배액 처리는 100% 방제가를 보여주었고, oxytetracycline 17% WP의 1,000배액 처리에서 96%의 높은 방제가를 보여주었다. 2,000배액의 침종처리는 streptomycin 20% WP 60%, oxytetracycline 17% WP 90%, oxytetracycline 1.5% + streptomycin sulfate 18.8% WP는 96%의 방제가를 보여 주었다(Table 3). 종자처리에 의한 병방제 효과는 병원균의 방제 및 병 발생 모두에서 oxytetracycline 1.
- 8% WP, Streptomycin 20% WP)의 500배액 처리에서 병원균 콜로니가 자라지 못했다. Streptomycin 20% WP의 2,000배액 처리구에서는 280 cfu/g, oxytetracycline 17% WP 2,000배액 처리구에서는 80 cfu/g 각각 검출되었다. Oxytetracycline 1.
- 5 mm로 가장 컸으며, oxytetracycline 15 ppm + streptomycin 188 ppm, oxolinic acid 20 ppm, streptomycin 200 ppm 처리 순으로 생장 저지환의 크기가 확인되었다. Streptomycin 50 ppm + validamycin-A 150 ppm 처리의 생장저지원은 4.0 mm로 확인되었으며, dimethyl benzyl ammonium chlorides 100 ppm + dimethyl ethylbenzyl ammonium chlorides 100 ppm 처리는 생장억제 효과가 없는 것으로 나타났다(Table 1, Fig. 1). 이상의 결과를 살균제 성분별로 보면 생장저지환의 크기가 가장 큰 oxytetracycline 17% WP와 oxytetracycline 1.
- syringae의한 애호박 세균점무늬병 방제를 위한 종자처리용 약제를 선발하기 위하여 현재 판매되고 있는 6종의 살균제의 병원균에 대한 생장억제효과를 검정하였다. 검정결과 oxytetracycline 170 ppm 처리 시 생장저지환의 크기가 20.5 mm로 가장 컸으며, oxytetracycline 15 ppm + streptomycin 188 ppm, oxolinic acid 20 ppm, streptomycin 200 ppm 처리 순으로 생장 저지환의 크기가 확인되었다. Streptomycin 50 ppm + validamycin-A 150 ppm 처리의 생장저지원은 4.
- 각각의 약제에 침지 처리한 애호박종자를 온실에서 플라스틱 폿트에 파종하여 병 발생 결과를 조사하였다. 그 결과 streptomycin 20% WP와 oxytetracycline 1.5% + streptomycin sulfate 18.8% WP의 500배액, 1,000배액 처리는 100% 방제가를 보여주었고, oxytetracycline 17% WP의 1,000배액 처리에서 96%의 높은 방제가를 보여주었다. 2,000배액의 침종처리는 streptomycin 20% WP 60%, oxytetracycline 17% WP 90%, oxytetracycline 1.
- 4%로 나타났으며, 병원균을 접종하지 않은 무처리구에는 병 발생이 확인되지 않았다. 병원균을 접종 후 oxytetracycline 1.5% + streptomycin sulfate 18.8% WP와 oxytetracycline 17% WP 각각 1,000배액을 살포한 처리에서 발병율은 25%와 44.2% 나타났으며, 이를 방제가로 환산하였을 때 oxytetracycline 1.5% + streptomycin sulfate 18.8% WP는 71.4%, oxytetracycline 17% WP는 49.4%으로 95% 신뢰수준에서 유의한 차이가 있는 것으로 확인되었다(Table 2). 병원균을 접종하고 약제를 처리하지 않은 대조구의 발병율이 87.
- 4%으로 95% 신뢰수준에서 유의한 차이가 있는 것으로 확인되었다(Table 2). 병원균을 접종하고 약제를 처리하지 않은 대조구의 발병율이 87.4%로 매우 좋은 점을 감안하면 oxytetracycline 1.5% + streptomycin sulfate 18.8% WP의 71.4% 방제가는 매우 높은 것으로 판단되면 oxytetracycline 17% WP의 처리도 이 병의 방제에 효과적인 것으로 생각된다.
- syringae에 의한 세균점무늬병 방제 효과를 검정하였다. 병원균을 접종하고 약제를 처리하지 않은 약제 무처리구에서 발병율은 87.4%로 나타났으며, 병원균을 접종하지 않은 무처리구에는 병 발생이 확인되지 않았다. 병원균을 접종 후 oxytetracycline 1.
- 병원균의 생장억제 활성은 oxytetracycline 17% WP가 oxytetracyclin 1.5% + streptomycin sulfate 18.8% WP 보다 높았는데, 애호박의 유묘에 처리에 의한 방제효과는 oxytetracycline 1.5% + streptomycin 18.8% WP의 효과가 oxytetracycline 17% WP 보다 높았다. Streptomycin은 단백질합성 억제제로 1950년대 후반부터 식물병 방제를 위하여 streptomycin 등 항생제를 사용하기 시작 한 후 Pss에 대한 streptomycin 저항성이 보고(Sundin and Bender, 1993)되었으며, 국내에서도 참다래꽃썩음병을 일으키는 Pseudomonas syringae pv.
- 1). 이상의 결과를 살균제 성분별로 보면 생장저지환의 크기가 가장 큰 oxytetracycline 17% WP와 oxytetracycline 1.5% + streptomycin 18.8% WP 모두 oxytetracycline를 가지고 있는 살균제로 애호박 세균점무늬병 병원균인 P. syringae pv. syringae의 생장억제효과는 oxytetracycline이 가장 높은 것으로 생각되며, validamycin-A를 많이 포함한 streptomycin 5% + validamycin-A 15% WP의 생장저지환은 4.
- 8% WP는 96%의 방제가를 보여 주었다(Table 3). 종자처리에 의한 병방제 효과는 병원균의 방제 및 병 발생 모두에서 oxytetracycline 1.5% + streptomycin sulfate 18.8% WP 처리가 가장 높은 효과를 보여 주었고, 다른 2가지 약제도 1,000배액 이상의 농도에서 종자침종 처리가 효과적임을 보여주었다.
- 2). 종자처리에 의한 종자에 오염된 병원균의 방제효과는 oxytetracycline 1.5% + streptomycin sulfate 18.8% WP가 가장 높았다.
후속연구
- syringae pv. syringae에 의한 애호박 세균점무늬병에 대해서도 방제효과가 있는 것으로 확인되어 향후 농약 품목 적용확대를 위한 포장실험 및 약해시험이 보완 된다면 애호박 세균점무늬병 방제약제로 사용 가능할 것으로 기대된다.
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