$\require{mediawiki-texvc}$
  • 검색어에 아래의 연산자를 사용하시면 더 정확한 검색결과를 얻을 수 있습니다.
  • 검색연산자
검색연산자 기능 검색시 예
() 우선순위가 가장 높은 연산자 예1) (나노 (기계 | machine))
공백 두 개의 검색어(식)을 모두 포함하고 있는 문서 검색 예1) (나노 기계)
예2) 나노 장영실
| 두 개의 검색어(식) 중 하나 이상 포함하고 있는 문서 검색 예1) (줄기세포 | 면역)
예2) 줄기세포 | 장영실
! NOT 이후에 있는 검색어가 포함된 문서는 제외 예1) (황금 !백금)
예2) !image
* 검색어의 *란에 0개 이상의 임의의 문자가 포함된 문서 검색 예) semi*
"" 따옴표 내의 구문과 완전히 일치하는 문서만 검색 예) "Transform and Quantization"
쳇봇 이모티콘
안녕하세요!
ScienceON 챗봇입니다.
궁금한 것은 저에게 물어봐주세요.

논문 상세정보

Vibrio parahaemolyticus에 대한 단클론성 항체 개발과 고감도 면역선택여과법의 개발

Production of Monoclonal Antibodies against Vibrio parahaemolyticus and Development of High Sensitive Immuno-Selective Filtration Method

초록

본 연구에서는 V. parahaemolyticus를 신속정확하게 고감도로 검출하기 위해 단클론성 항체를 개발하고 이를 이용하여 일반적인 효소면역분석법(ELISA)과 효소면역분석법의 낮은 민감도를 보완할 수 있는 면역선택여과법(ISF)을 개발하여 민감도 및 효율성을 비교분석 하였다. 먼저 heat killed V. parahaemolyticus (HKVP)를 준비하여 7주령 BALB/c mouse에 면역한 후 세포융합 및 클로닝을 통해 HKVP 4H9-9번 및 16번 2종의 hybridoma cell을 확보하였다. Western blot을 통해 보다 특이성이 높은 것으로 확인된 HKVP 4H9-9번 항체를 대량 생산정제하여 분석법을 확립한 결과 검출한계가 ID-ELISA법은 $10^6cell/mL$, ISF 법은 $5{\times}10^1cell/mL$로 나타나 ISF법의 민감도가 매우 높은 것으로 확인되었다. 분석효율성은 ID-ELISA법의 경우 분석을 위해 9단계의 과정을 거쳐 총 16시간의 분석시간이 소요된 반면, ISF법의 경우 3단계의 과정을 거쳐 1시간 이내에 분석을 완료할 수 있는 것으로 확인되었다. 교차반응성의 경우 두 분석법 모두 일부 Vibrio spp. (IDELISA법: V. alginolyticus, ISF법: V. vulnificus)과 S. aureus에 반응성이 있는 것으로 확인되었지만 V. parahaemolyticus에 보다 강한 반응성을 나타내었기 때문에 V. parahaemolyticus에 특이적인 분석법인 것으로 확인되었다. 특히 ISF법은 ELISA법 보다 민감도가 높고 분석에 소요되는 시간도 짧아 V. parahaemolyticus를 신속하게 분석하는데 활용이 가능할 것으로 판단된다.

Abstract

The objectives of this study are to produce monoclonal antibodies (MAbs) against Vibrio parahaemolyticus and to develop an immuno-selective filtration (ISF) method for the rapid and sensitive detection of V. parahaemolyticus. The characterization of the MAb produced from HKVP 4H9-9 hybridoma cell was validated by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and western blot. The produced MAb was specific to V. parahaemolyticus and showed weak cross-reaction to V. alginolyticus, V. vulnificus and Staphylococcus aureus. After optimization of the method, $5{\times}10^1cell/mL$ of V. parahaemolyticus in a pure culture could be detectable. Although weak cross-reactivity to V. vulnificus, V. alginolyticus and Staphylococcus aureus was observed, the ISF was confirmed to be highly specific to V. parahaemolyticus. Especially, the ISF showed the most sensitivity compared to the immunoassays currently reported is easier to perform and quicker than ID-ELISA.

참고문헌 (22)

  1. Joseph, S.W., Colwell, R.R. and Kaper, J.B.: Vibrio parahaemolyticus and related halophilic vibrios. Crit. Rev. Microbiol. 10, 77-123 (1983). 
  2. Mead, P.S., Slutsker, L., Dietz, V., McGaig, L.F., Bresee, J.S., Shapiro, C., Griffin, P.M. and Tauxe, R.V.: Food-related illness and death in the United States. Emerg. Infect. Dis. 5, 607-625 (1999). 
  3. Han, A,R., Yoon, Y.J. and Kim, J.W.: Antibiotic resistance and plasmid profile of Vibrio parahaemolyticus strains isolated from Kyunggi-Incheon coastal area. Kor. J. Microbiol. 48, 22-28 (2012). 
  4. Martinez, J.L. and Baquero, F.: Mutation frequencies and antibiotic resistance. Antimicrob. Agents Chemother. 44, 1771- 1777 (2000). 
  5. Available from http://www.foodsafetykorea.go.kr/portal/healthyfoodlife/ foodPoisoningStat.do?menu_no=519&menu_grp= MENU_GRP02, Accessed Nov. 12 (2015). 
  6. Available from http://www.mfds.go.kr/index.do?mid=675&seq =28027&cmd=v, Accessed Nov. 12 (2015). 
  7. Available from http://www.index.go.kr/potal/main/EachDtl-PageDetail.do?idx_cd=1317, Accessed Nov. 12 (2015). 
  8. Chen, C.H. and Chang, T.C.: An enzyme-linked immunosorbent assay for the rapid detection of Vibrio parahaemolyticus. J. Food Prot. 8, 873-878 (1995). 
  9. Kumar, B.K., Raghunath, P., Devegowda, D., Deekshit, V.K., Venugopal, M.N. and Karunasagar, I.: Development of monoclonal antibody based sandwich ELISA for the rapid detection of pathogenic Vibrio parahaemolyticus in seafood. Int. J. Food Microbiol. 145, 244-249 (2011). 
  10. Guo, A., Sheng, H., Zhang, M., Wu, R. and Xie, J.: Development and evaluation of a colloidal gold immunochromatography strip for rapid detection of Vibrio parahaemolyticus in food. J. Food Qual. 35, 366-371 (2012). 
  11. Kawatsu, K., Ishibashi, M. and Tsukamoto, T: Development and evaluation of a rapid, simple, and sensitive immunochromatographic assay to detect thermostable direct hemolysin produced by Vibrio parahaemolyticus in enrichment cultures of stool specimens. J. Clin. Microbiol. 44, 1821-1827 (2006). 
  12. Shim, W.B., Choi, J.G., Kim, J.Y., Yang, Z.Y., Lee, K.H., Kim, M.G., Ha, S.D., Kim, K.S., Kim K.Y., Kim, C.H., Ha, K.S., Eremin, S.A. and Chung, D.H.: Production of monoclonal antibody against Listeria monocytogenes and its application to immunochromatography strip test. J. Microbiol. Biotechnol. 17, 1152-1161 (2007), 
  13. Ryu, H.J., Kim, J.S., Kim, K.Y., Nam, B.R., Nam, M.J., Shim, W.B., Kim, N.S., Cho, Y.J. and Chung, D.H.: Production of monoclonal antibody against Escherichia coli O157: H7 and development of enzyme linked immunosorbent assay. Korean J. Food Sci. Technol. 42, 329-334 (2010). 
  14. Liu, Y., Che, Y. and Li, Y.: Rapid detection of Salmonella typhimurium using immunomagnetic separation and immunooptical sensing method. Sens. Actuator B-Chem. 72, 214-218 (2001). 
  15. Sung, Y.J., Suk, H.J., Sung, H.Y., Li, T. Poo, H. and Kim, M.G.: Novel antibody/gold nanoparticle/magnetic nanoparticle nanocomposites for immunomagnetic separation and rapid colorimetric detection of Staphylococcus aureus in milk. Biosens. Bioelectron. 43, 432-439 (2013). 
  16. Shim, W.B. Song, J.E. Mun, H.Y., Chung, D.H. and Kim, M.G.: Rapid colorimetric detection of Salmonella typhimurium using a selective filtration technique combined with antibody-magnetic nanoparticle nanocomposites. Anal. Bioanal. Chem. 406, 859-866 (2014). 
  17. Kohler, G. and Milstein, C.: Continuous cultures of fused cells producing antibody of predefined specificity. Nature. 256, 495-501 (1975). 
  18. McKearn, T.J., Weiss, A., Stuart, F.P. and Fitch, F.W.: Selective suppression of humoral and cell-mediated immune responses to rat alloantigens by monoclonal antibodies produced by hybridoma cell lines. Transplant P. 11, 932-935 (1979). 
  19. Siragusa, G.R. and Johnson, M.G.: Monoclonal antibody specific for Listeria monocytogenes, Listeria innocua, Listeria welshimeri. Appl. Environ. Microb. 56, 1897-1904 (1990). 
  20. Sakazaki, R.: Propsal of Vibrio alginolyticus for the biotype 2 of Vibrio parahaemolyticus. Japan. J Med. Sci. Biol. 21, 359-362 (1968). 
  21. Zhong, Q., Dong, Y., Wang, L. and He B.: Development of IgY-based sandwich enzyme linked immunosorbent assay for the detection of Vibrio parahaemolyticus. In Information Technology and Agricultural Engineering. Springer Berlin Heidelberg, pp. 517-524 (2012). 
  22. Liu, Y., Zhang, Z., Wang, Y., Zhao, Y., Lu, Y., Xu, X., Yan, J. and Pan, Y.: A highly sensitive and flexible magnetic nanoprobe labeled immunochromatographic assay platform for pathogen Vibrio parahaemolyticus. Int. J. Food Microbiol. 211, 109-116 (2015). 

이 논문을 인용한 문헌 (0)

  1. 이 논문을 인용한 문헌 없음

원문보기

원문 PDF 다운로드

  • ScienceON :

원문 URL 링크

원문 PDF 파일 및 링크정보가 존재하지 않을 경우 KISTI DDS 시스템에서 제공하는 원문복사서비스를 사용할 수 있습니다. (원문복사서비스 안내 바로 가기)

상세조회 0건 원문조회 0건

과제정보

DOI 인용 스타일