본 연구는 산업 부산물의 이용성 증진을 위하여 폐자원인 녹차씨껍질 추출물의 항산화 활성 및 신경세포 보호 효과에 관하여 평가하였다. 녹차씨껍질로부터 유용성 성분을 얻기 위하여 에탄올 추출을 한 결과 약 1.44%의 추출물의 수율을 얻을 수 있었고, 항산화 활성에 관하여 평가하기 위하여 라디칼 소거능 및 xanthine oxidase 저해능, 환원력을 평가한 결과, 녹차씨껍질 추출물의 농도가 증가할수록 항산화 활성이 유의적으로 증가하는 것으로 나타났다. 또한, 이러한 녹차씨껍질 추출물의 뇌신경세포 보호 효과에 관하여 알아보기 위하여 생쥐의 해마 유래 뇌신경세포에 녹차씨껍질 추출물을 처리한 후 $H_2O_2$로 산화적인 스트레스를 유도하여 세포독성에 관하여 알아본 결과, 녹차씨껍질 추출물의 처리는 농도 의존적으로 뇌신경 세포의 생존율을 증가시켰으며, 이에 따라 항산화 효소인 SOD 활성이 증가하고 지질과산화 생성물인 MDA level이 감소한 것을 알 수 있었다. 이상의 결과들로 녹차씨껍질 추출물의 항산화 활성 및 뇌신경세포 보호 효과에 관하여 확인할 수 있었으며, 추후 어떤 메커니즘으로 신경세포를 보호하는지 추가적인 연구가 필요할 것으로 생각한다. 또한, 이러한 결과를 활용하여 녹차씨껍질을 기능성 소재로 활용한다면 폐자원인 녹차씨껍질을 재활용하는 차원에서 그 경제적 가치가 매우 클 것으로 생각한다.
본 연구는 산업 부산물의 이용성 증진을 위하여 폐자원인 녹차씨껍질 추출물의 항산화 활성 및 신경세포 보호 효과에 관하여 평가하였다. 녹차씨껍질로부터 유용성 성분을 얻기 위하여 에탄올 추출을 한 결과 약 1.44%의 추출물의 수율을 얻을 수 있었고, 항산화 활성에 관하여 평가하기 위하여 라디칼 소거능 및 xanthine oxidase 저해능, 환원력을 평가한 결과, 녹차씨껍질 추출물의 농도가 증가할수록 항산화 활성이 유의적으로 증가하는 것으로 나타났다. 또한, 이러한 녹차씨껍질 추출물의 뇌신경세포 보호 효과에 관하여 알아보기 위하여 생쥐의 해마 유래 뇌신경세포에 녹차씨껍질 추출물을 처리한 후 $H_2O_2$로 산화적인 스트레스를 유도하여 세포독성에 관하여 알아본 결과, 녹차씨껍질 추출물의 처리는 농도 의존적으로 뇌신경 세포의 생존율을 증가시켰으며, 이에 따라 항산화 효소인 SOD 활성이 증가하고 지질과산화 생성물인 MDA level이 감소한 것을 알 수 있었다. 이상의 결과들로 녹차씨껍질 추출물의 항산화 활성 및 뇌신경세포 보호 효과에 관하여 확인할 수 있었으며, 추후 어떤 메커니즘으로 신경세포를 보호하는지 추가적인 연구가 필요할 것으로 생각한다. 또한, 이러한 결과를 활용하여 녹차씨껍질을 기능성 소재로 활용한다면 폐자원인 녹차씨껍질을 재활용하는 차원에서 그 경제적 가치가 매우 클 것으로 생각한다.
The objective of this study was to evaluate the antioxidant activity of green tea seed shell as an industrial byproduct. Green tea seed shell extract (GTSSE) was obtained by ethanol extraction, and the yield was $1.4{\pm}0.22%$. The radical scavenging activities [1,1-diphenyl-picrylhydraz...
The objective of this study was to evaluate the antioxidant activity of green tea seed shell as an industrial byproduct. Green tea seed shell extract (GTSSE) was obtained by ethanol extraction, and the yield was $1.4{\pm}0.22%$. The radical scavenging activities [1,1-diphenyl-picrylhydrazyl and 2,2'-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)], xanthine oxidase inhibition activity, and reducing power of GTSSE dose-dependently increased. To estimate the neuroprotective effect of GTSSE, viability was tested in HT22 mouse hippocampal cells. GTSSE treatment induced cytotoxicity at a concentration higher than $100{\mu}g/mL$ but not at a concentration lower than $50{\mu}g/mL$. Using this optimal concentration range, GTSSE treatment significantly increased cell viability in $H_2O_2$-treated HT22 cells. Further, GTSSE treatment increased superoxide dismutase activity and decreased the malonaldehyde level, a product of lipid peroxidation, in HT22 cells. Therefore, these results indicate that green tea seed shell extract may be useful for the development of antioxidant materials and have potential activity to prevent and treat neuro-degenerative diseases such as Alzheimer's disease.
The objective of this study was to evaluate the antioxidant activity of green tea seed shell as an industrial byproduct. Green tea seed shell extract (GTSSE) was obtained by ethanol extraction, and the yield was $1.4{\pm}0.22%$. The radical scavenging activities [1,1-diphenyl-picrylhydrazyl and 2,2'-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)], xanthine oxidase inhibition activity, and reducing power of GTSSE dose-dependently increased. To estimate the neuroprotective effect of GTSSE, viability was tested in HT22 mouse hippocampal cells. GTSSE treatment induced cytotoxicity at a concentration higher than $100{\mu}g/mL$ but not at a concentration lower than $50{\mu}g/mL$. Using this optimal concentration range, GTSSE treatment significantly increased cell viability in $H_2O_2$-treated HT22 cells. Further, GTSSE treatment increased superoxide dismutase activity and decreased the malonaldehyde level, a product of lipid peroxidation, in HT22 cells. Therefore, these results indicate that green tea seed shell extract may be useful for the development of antioxidant materials and have potential activity to prevent and treat neuro-degenerative diseases such as Alzheimer's disease.
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문제 정의
녹차씨껍질의 항산화 활성에 관하여 알아보기 이전에 녹차씨껍질 에탄올 추출물 추출 수율에 관하여 평가해 보았다. 녹차씨로부터 껍질 부분을 분리하여 녹차씨껍질 100 g을 에탄올을 이용하여 24시간 동안 추출한 후, 회전식 감압 농축기로 농축하여 동결 건조한 다음 수율에 관하여 평가해보았다(Table 1).
따라서 본 연구에서는 녹차 재배 시 산업 부산물로 발생하는 녹차씨껍질의 이용성을 증대시키기 위하여 녹차씨껍질 에탄올 추출물의 항산화 활성 및 신경세포 보호 효과에 관하여 평가하였다.
녹차씨의 경우는 외피를 제거하고 오일을 추출하는 데 일부가 사용되는 것으로 알고 있으나, 현재까지 대량생산을 위한 산업적인 적용이 많이 이루어지지 않는 추세이다. 따라서 산업적인 부산물로서 이러한 외피 부분을 재활용한다면 그 경제적인 가치가 매우 클 것으로 생각하여(9) 본 연구에서는 녹차씨 외피 추출물의 생리활성에 관하여 알아보았다.
따라서 신경세포에서 SOD 활성 저하는 세포독성으로 이어지고, 이는 알츠하이머, 파킨슨병과 같은 뇌질환을 일으킨다(31). 본 실험에서 GTSSE가 과산화수소 유도 독성으로부터 세포를 보호하는 것이 세포 내 SOD 활성 증가에 따른 것인지 평가하였다(Fig. 4A). GTSSE를 12.
따라서 지질과산화 생성물인 MDA는 알츠하이머나 파킨슨병을 포함한 뇌질환 연구에서 신경세포의 지질과산화의 정도를 측정하는 지표로 널리 사용된다(35). 본 실험에서 GTSSE가 과산화수소로 유도되는 MDA를 억제하는지 평가하였다(Fig. 4B). GTSSE를 12.
제안 방법
5, 25, 50 μg/mL) 녹차씨껍질 추출물과 H2O2를 동시 처리하였다. 37oC, 5% CO2 조건으로 12시간 동안 배양한 후 3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide(MTT, Sigma-Aldrich Co.)분석을 통해 세포독성을 산출하였다. MTT assay는 MTT 용액(5 mg/mL)을 30 μL씩 각각 well에 첨가하고 2시간 동안 배양한 후 배양 상등액을 제거하고 생성된 formazan crystal을 dimethyl sulfoxide(DMSO, Sigma-Aldrich Co.
6 well plate에 HT22 cell을 1×106 cells/well로 분주하고, 37°C, 5% CO2 incubator에서 6시간 동안 배양하면서 세포를 완전히 부착시킨 후 농도별(12.5, 25, 50 μg/mL) 녹차씨껍질 추출물과 H2O2를 동시 처리하였다.
GTSSE가 생쥐 유래 해마세포의 세포독성에 미치는 영향을 평가하기 위하여 HT22 cell에 농도별 GTSSE를 처리하여 GTSSE에 대한 세포생존율을 MTT 방법을 통하여 평가하였다(Fig. 3A). GTSSE를 6.
GTSSE를 12.5, 25, 50 μg/mL의 농도로 처리한 후 바로 H2O2를 처리하여 세포독성을 유도한 다음 세포 내 SOD 활성을 측정해 본 결과, 농도 의존적으로 세포 내 SOD 활성을 증가시켰다(Fig. 4A).
HT22 cell을 5×104 cells/well씩 96 well plate(SPL, Pocheon, Korea)에 분주하고, 37°C, 5% CO2 incubator에서 12시간 동안 배양하면서 세포를 완전히 부착시킨 후 농도별(6.25, 12.5, 25, 50 μg/mL) 녹차씨껍질 추출물과 H2O2를 동시 처리하였다.
Xanthine oxidase 저해능은 Stripe와 Della Corte(17)의 방법을 일부 변형하여 분석하였다. 0.
녹차씨껍질 추출물의 1,1-diphenyl-picrylhydrazyl(DPPH, Sigma-Aldrich Co.) 라디칼 소거능은 Blois 등(15)의 방법을 일부 수정하여 분석하였다. 메탄올에 용해된 0.
녹차씨껍질 추출물의 총폴리페놀 함량은 Folin-Denis 방법(13)을 일부 수정하여 분석하였다. 10 mg/mL 농도의 추출물 20 μL에 증류수 400 μL를 가한 다음, 2 N FolinCiocalteu phenol reagent(Sigma-Aldrich Co.
녹차씨껍질 추출물의 총플라보노이드의 함량은 Davis 방법(14)을 일부 변형하여 분석하였다. 2 mg/mL 농도의 추출물 500 μL에 diethylene glycol(Sigma-Aldrich Co.
녹차씨껍질 추출물이 H2O2 유도 독성으로부터 생성되는 HT22 세포에서의 MDA level을 평가하기 위해 MDA 586 kit(Oxis Research, Portland, OR, USA)을 이용하였다. 위의 1 mg/mL로 정량한 cell lysate를 이용하여 제조자가 제시한 지침에 따라 MDA level을 측정하였다.
녹차씨껍질의 항산화 활성에 관하여 알아보기 이전에 녹차씨껍질 에탄올 추출물 추출 수율에 관하여 평가해 보았다. 녹차씨로부터 껍질 부분을 분리하여 녹차씨껍질 100 g을 에탄올을 이용하여 24시간 동안 추출한 후, 회전식 감압 농축기로 농축하여 동결 건조한 다음 수율에 관하여 평가해보았다(Table 1).
농도별(0.25, 0.5, 1 및 2 mg/mL) 녹차씨껍질 추출물 100 μL에 0.2 M sodium phosphate buffer(pH 6.6) 100μL 및 1% potassium ferricyanide(Sigma-Aldrich Co.)100 μL를 각각 첨가하여 50°C 항온수조에서 20분 반응시킨 후 10% trichloroacetic acid(Sigma-Aldrich Co.) 100 μL를 가하고 12,000 rpm에서 10분 동안 원심분리 하였다.
따라서 GTSSE가 6.25~50 μg/mL의 농도에서 H2O2로 유도된 산화 독성으로부터 세포를 보호하는지 평가하였다(Fig. 3B).
메탄올에 용해된 0.1 mM의 DPPH 용액 100 μL에 농도별 녹차씨껍질 추출물(7.8, 15.6, 31.25, 62.5 및 125 μg/mL)을 첨가한 후 암실에서 30분간 반응시킨 다음 microplate reader를 이용하여 517 nm에서 흡광도를 측정하였다.
37oC, 5% CO2 조건으로 12시간 동안 배양한 후 cell lysis buffer(Cell Signaling, Danvers, MN, USA)를 첨가하여 ice에서 5분 반응시키고, sonication 시킨 후 13,000 rpm에서 10분간 원심분리 하여 cell lysate를 분리하였다. 분리된 cell lysate는 BCA protein detection kit(Thermo Scientific, Rockford, IL, USA)을 사용하여 1 mg/mL의 농도로 단백질 정량하여 기질로 사용하였으며, 측정 과정은 제조자가 제시한 지침에 따라 진행하였다.
유도 독성으로부터 생성되는 HT22 세포에서의 MDA level을 평가하기 위해 MDA 586 kit(Oxis Research, Portland, OR, USA)을 이용하였다. 위의 1 mg/mL로 정량한 cell lysate를 이용하여 제조자가 제시한 지침에 따라 MDA level을 측정하였다.
이 용액에 20% Na2CO3 400 μL를 가한 후 37°C에서 30분 동안 반응시킨 다음 microplate reader를 이용하여 765 nm에서 흡광도를 측정하였다. 총폴리페놀 정량은 gallic acid(Sigma-Aldrich Co.)를 표준물질로 사용하여 작성한 표준곡선으로부터 산출하였다.
4(WhatmanⓇ, Kent, UK)를 사용하여 감압 여과한 후 rotary evaporator(Heidolph Instruments, Schwabach, Germany)를 이용하여 농축한 다음 동결 건조하여 본 실험에 사용하였다. 추출물에 대한 추출 수율은 추출 전의 시료 무게에 대한 감압 농축 후 추출물 무게를 측정하여 나타내었다.
환원력의 측정은 시료가 Fe+3 이온을 Fe+2로 환원시키는 능력이 강할수록 진한 녹색에 가깝게 발색되어 높은 흡광도 값을 나타내는 비색법의 원리를 응용하여 측정하였다(26). 환원력이 클수록 과산화 지질 및 활성산소를 제거하여 성인병을 예방하는 효과가 있으므로 환원력을 유지하는 능력이 큰 물질일수록 그 이용가치가 크다(27).
희석된 ABTS 용액 1 mL에 농도별로 제조한 시료(62.5 125, 250, 500 및 1,000 μg/mL)20 μL를 처리한 후 microplate reader를 이용하여 760 nm에서 흡광도를 측정하였다.
대상 데이터
본 실험에 사용된 녹차씨는 전라남도 보성군에서 구입하여 사용하였다. 실험에 사용된 녹차씨껍질은 녹차씨를 둘러싼 가장 바깥 부분의 껍질을 사용하였다.
녹차씨껍질 분말 100 g에 95% 에탄올 1 L를 넣고 상온에서 24시간 동안 교반하면서 추출하였다. 상등액을 Filter paper No. 4(WhatmanⓇ, Kent, UK)를 사용하여 감압 여과한 후 rotary evaporator(Heidolph Instruments, Schwabach, Germany)를 이용하여 농축한 다음 동결 건조하여 본 실험에 사용하였다. 추출물에 대한 추출 수율은 추출 전의 시료 무게에 대한 감압 농축 후 추출물 무게를 측정하여 나타내었다.
본 실험에 사용된 녹차씨는 전라남도 보성군에서 구입하여 사용하였다. 실험에 사용된 녹차씨껍질은 녹차씨를 둘러싼 가장 바깥 부분의 껍질을 사용하였다. 분리된 녹차씨껍질을 증류수로 깨끗하게 세척한 후 25°C 상온에서 24시간 건조한 다음 실험용 분쇄기(NSG-100 2SS, Hanil, Seoul, Korea)를 이용하여 분쇄하였다.
데이터처리
Statistical analysis was performed by unpaired Student's t-test within ###P<0.001 vs control group and *P<0.05, **P<0.01 when compared to the PBS group.
Statistical analysis was performed by unpaired Student's t-test within *P<0.05, ***P<0.001 when compared to the control group (CON).
이상의 실험에서 얻어진 결과는 Statistical Package for Social Sciences(SPSS, 10.0, IBM, Chicago, IL, USA)를 이용하여 one-way ANOVA test로 분석하였으며, 시료 간의 유의성은 Duncan's multiple range test로 P<0.05 수준에서 비교하였고, Student's t-test로 *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001 수준에서 비교하였다.
이론/모형
녹차씨껍질 추출물의 2,2'-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)(ABTS, Sigma-Aldrich Co.)라디칼 소거능은 Re 등(16)의 방법을 이용해서 측정하였다.
녹차씨껍질 추출물이 미치는 SOD 활성은 SOD assay kit(Dojindo, Kyushu, Japan)을 이용하여 측정하였다. 6 well plate에 HT22 cell을 1×106 cells/well로 분주하고, 37°C, 5% CO2 incubator에서 6시간 동안 배양하면서 세포를 완전히 부착시킨 후 농도별(12.
성능/효과
GTSSE를 12.5, 25, 50 μg/mL의 농도로 처리한 후 바로 H2O2를 처리하여 세포독성을 유도한 다음 MDA level을 측정해 본 결과, 농도 의존적으로 MDA level을 감소시켰다.
GTSSE를 6.25, 12.5, 25, 50, 100 μg/mL의 농도로 처리하였을 때 100 μg/mL의 농도에서는 세포독성이 나타났으며, 그 이하의 농도에서는 농도 의존적으로 세포생존율이 증가하는 것으로 관찰되었다.
3B). 그 결과 GTSSE의 처리는 농도 의존적으로 H2O2가 유도하는 산화 독성으로부터 세포를 보호하는 효과가 관찰되었다. 신경세포에서의 ROS의 과발현은 DNA 파괴, 변형과 같은 세포 손상을 유발해 세포자살을 일으키며, 결과적으로 알츠하이머, 파킨슨병과 같은 질환을 초래하게 된다(29).
그중 green tea seed shell extract(GTSSE)에 함유된 폴리페놀양을 gallic acid equivalents/g으로 환산하여 표시한 결과 녹차씨껍질 추출물에 286.7±0.16 mg/g으로 관찰되었으며, 플라보노이드양을 naringin equivalents/g으로 환산하여 표시한 결과 4.4±0.03 mg/g으로 관찰되었다.
따라서 xanthine oxidase를 억제한다면 요산과 초과산화물 등의 생성으로 인한 통풍과 고요산혈증 같은 질환 치료에 유용하게 사용될 수 있으므로 xanthine oxidase 저해능이 큰 물질일수록 그 이용가치가 크다고 할 수 있다(24). 본 실험에서 농도별로 제조한 GTSSE(0.25, 0.5, 1 및 2 mg/mL)의 xanthine oxidase 저해능에 대해 조사한 결과, 시료의 xanthine oxidase 저해능이 농도 의존적으로 증가하는 것으로 관찰되었다(Fig. 2A). Xanthine oxidase 저해작용을 가지는 대표적인 물질로는 flavonoid류가 있으며, 이들 중 녹차에 다량 함유된 EC, EGC, ECG 등의 물질들이 기전의 연구에서 xanthine oxidase 저해 활성이 높게 유지되는 것으로 보고되고 있다(25).
환원력이 클수록 과산화 지질 및 활성산소를 제거하여 성인병을 예방하는 효과가 있으므로 환원력을 유지하는 능력이 큰 물질일수록 그 이용가치가 크다(27). 본 실험에서 농도별로 제조한 GTSSE(0.25, 0.5, 1 및 2 mg/mL)의 환원력을 조사한 결과, GTSSE는 농도 의존적으로 환원력을 증가시키는 것으로 관찰되었으며(Fig. 2B), 이는 녹차씨껍질 추출물에 다량 함유된 유용한 성분인 폴리페놀과 플라보노이드 성분과 관계가 있다고 생각한다. 기존 연구에 의하면 폴리페놀 및 플라보노이드 함량은 다양한 항산화 실험 중 DPPH 라디칼 소거 활성, ABTS 라디칼 소거 활성 및 환원력과 밀접한 관계를 갖고 있다고 보고하였다(28).
본 실험에서 농도별로 제조한 GTSSE(62.5 125, 250, 500 및 1,000 μg/mL)의 ABTS 라디칼 소거능에 대해 조사한 결과, 시료의 ABTS 라디칼 소거 활성이 농도 의존적으로 증가하는 것으로 관찰되었다(Fig. 1B).
본 연구에서도 녹차씨껍질로부터 추출한 GTSSE의 DPPH 라디칼 소거능에 관하여 알아본 결과, GTSSE의 농도(7.8, 15.6, 31.25, 62.5 및 125 μg/mL)가 증가할수록 DPPH 라디칼 소거능이 유의적으로(P<0.05) 증가하는 것으로 관찰되었다(Fig. 1A).
후속연구
Lim 등(19)의 연구에 의하면 녹차씨 메탄올 추출물의 catechin류 함량을 high pressure liquid chromatography(HPLC)로 분석한 결과, (-)-epicatechin gallate(ECG) 821±95 μg/g, gallate 112±72 μg/g, caffeine 155±42 μg/g, (-)-epigallocatechin(EGC) 116±72 μg/g, (-)-epigallocatechin gallate(EGCG) 108±32 μg/g, (-)-epicatechin(EC) 37±44 μg/g 등의 다양한 catechin이 검출되었다고 보고하고 있으며, 이와 유사하게 Noh 등(12)의 연구에서 녹차씨껍질 에틸아세테이트(EtOAC) 층에서도 녹차에서 발견되는 모든 종류의 catechin이 검출되었다고 보고하고 있다. 따라서 본 연구에서도 녹차씨껍질 추출물의 항산화 활성을 알아보기 위하여 추출한 녹차씨껍질 에탄올 추출물도 이와 같은 다양한 녹차 catechin을 포함할 것으로 생각한다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
활성산소종의 종류는?
생체 내에서 다양한 경로로 생성되는 superoxide radical(O2-), hydroxyl radical(HO･), hydrogen peroxide(H2O2), 일중항산소(1O2)와 같은 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)은 생체에 치명적인 독성을 일으키며(1), 세포 구성성분인 지질, 단백질, 당, DNA 등에 대해 비선택적, 비가역적으로 손상을 초래하므로 암을 비롯한 뇌신경질환, 심장질환, 동맥경화, 염증, 류마티스, 자가면역질환 등의 각종 질병과 노화의 주원인으로 알려져 있다(2,3). 따라서 생체 내 활성산소 발생 억제를 위해 항산화 물질의 개발에 관한 연구들이 급격히 증가하고 있으며, 강력한 항산화 능력을 갖춘 butylated hydroxytoluene(BHT) 같은 합성 항산화제가 개발되었지만, 간 독성 등 다양한 부작용을 유발하여 이를 대체할 수 있는 식품 유래 천연 항산화제 개발이 절실히 요구되고 있는 추세이다(4).
녹차씨 외피 추출물의 생리활성 효능은?
녹차 부산물의 부가가치를 높이기 위해 일부 연구가 진행되고 있다. 녹차는 잎 외에 녹차나무 뿌리와 씨에서도 다량의 폴리페놀이 있다고 보고되었으며(10), 녹차씨에서 추출한 오일은 모발손상 방지 효과가 있고(11), 녹차씨 외피 추출물은 미백 효과가 있으며 항염증 효과가 뛰어나다고 보고되었다(9,12). 하지만 녹차씨껍질 추출물의 항산화 활성 및 신경세포 보호 효과에 관한 연구는 전무후무한 실정이다.
녹차의 폴리페놀 성분인 catechin에 포함되는 것은?
녹차는 전 세계적으로 널리 이용되며, 주로 잎을 가공하여 기능성 식품과 음료, 화장품 등의 다양한 제품을 제조한다. 녹차의 폴리페놀 성분인 catechin에는 (-)-epicatechin(EC), (-)-epigallocatechin(EGC), (-)-epicatechin-3-gallate(ECG), (-)-epigallocatechin-3-gallate(EGCG) 등이 있고 이 폴리페놀들은 항염증, 항암, 미백 등의 다양한 효과가 밝혀졌으며(5-7), 특히 이러한 녹차 catechin류는 blood-brain barrier를 통과하여 중추신경계의 대사 조절에도 관여한다고 밝혀졌다(8). 녹차 폴리페놀의 다양한 기능성이 밝혀지면서 녹차는 단순한 기호식품이 아닌 건강 기능적인 면에서 우수성을 인정하는 기호음료로 소비형태가 전환되었고, 이에 따라 녹차에 대한 수요는 현재 꾸준히 증가하는 추세다.
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