[논문]생선 내장으로부터 분리된 프로바이오틱 유산균에 의한 히스타민 생산균의 제어

임은서; 이남걸

doi:10.7845/kjm.2016.6041

생선 내장으로부터 분리된 프로바이오틱 유산균에 의한 히스타민 생산균의 제어
Control of histamine-forming bacteria by probiotic lactic acid bacteria isolated from fish intestine 원문보기

Korean journal of microbiology = 미생물학회지, v.52 no.3, 2016년, pp.352 - 364

초록
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본 연구에서는 생선 내장으로부터 분리된 유산균의 프로바이오틱 특성과 아민 산화효소(diamine oxidase, DAO) 및 박테리오신 생산을 통한 히스타민 분해능을 조사하였다. 조기, 가자미, 명태 및 우럭 내장으로부터 분리된 총 97종의 유산균 중에서 CIL08, CIL16, FIL20, FIL31, PIL45, PIL49, PIL52 및 RIL60 균주는 인공 소화액에 대한 저항성이 강하고, HT-29 상피세포에 대해서도 높은 부착력을 보였으며, 항생제(amoxicillin, ampicillin, erythromycin, penicillin G, streptomycin, tetracycline 및 vancomycin)에 대한 내성도 강한 것으로 나타났다. 게다가 이들 균주들은 히스티딘이 함유된 탈카르복시화 액체배지 내에서 히스타민을 생산하지 않았다. 특히 DAO를 생산하는 것으로 추정되는 CIL08, FIL20, PIL52 및 RIL60 등의 4균주는 히스타민 분해능이 유의하게 높았다. FIL20, FIL31 및 PIL52 유산균이 생산한 박테리오신에 의해선 Enterococcus aerogenes CIH05, Serratia marcescens CIH09, Enterococcus faecalis FIH11, Pediococcus halophilus FIH15, Lactobacillus sakei PIH16, Enterococcus faecium PIH19, Leuconostoc mesenteroides RIH25 혹은 Aeromonas hydrophilia RIH28의 증식과 히스타민 생성량이 유의하게 감소되었다. 또한 생선 내장에서 분리된 히스타민 생성균과 히스타민 분해능 혹은 박테리오신 생산능을 가진 CIL08, FIL20, PIL52 및 RIL60 유산균과 혼합 배양에 의해 히스타민 축적량이 감소되었다. 히스타민 생성을 억제하는 프로바이오틱 유산균의 배양학적 특성과 16S rRNA 염기서열 분석을 통해 Pediococcus pentosaceus CIL08, Lactobacillus plantarum FIL20, Lactobacillus paracasei FIL31, Lactobacillus sakei PIL52 및 Leuconostoc mesenteroides RIL60으로 동정되었다.

Abstract ▼ AI-Helper

In this study, we examined in vitro the potential probiotic properties of lactic acid bacteria (LAB) obtained from the fish intestine and their ability to degrade histamine through the production of diamine oxidase (DAO) enzymes and bacteriocin. Among 97 LAB strains isolated from the intestine of croaker, flatfish, pollack, and rockfish, CIL08, CIL16, FIL20, FIL31, PIL45, PIL49, PIL52, and RIL60 isolates exhibited excellent survival rates under simulated gastrointestinal tract conditions, high adhesion ability to HT-29 epithelial cells, and resistance to the antibiotics such as amoxicillin, ampicillin, erythromycin, penicillin G, streptomycin, tetracycline, or vancomycin. In addition, these strains did not produce histamine in decarboxylating broth containing histidine. In particular, 4 strains (CIL08, FIL20, PIL52, and RIL60) that may produce DAO were significantly able to degrade histamine. The bacteriocins produced by FIL20, FIL31, and PIL52 LAB inhibited the growth and histamine production of Enterococcus aerogenes CIH05, Serratia marcescens CIH09, Enterococcus faecalis FIH11, Pediococcus halophilus FIH15, Lactobacillus sakei PIH16, Enterococcus faecium PIH19, Leuconostoc mesenteroides RIH25, or Aeromonas hydrophilia RIH28. Histamine-producing strains isolated from fish intestine were found to reduce histamine accumulation during co-culture with CIL08, FIL20, PIL52, and RIL60 LAB showing histamine degradation or bacteriocin production ability. The probiotic strains preventing histamine formation were identified as Pediococcus pentosaceus CIL08, Lactobacillus plantarum FIL20, Lactobacillus paracasei FIL31, Lactobacillus sakei PIL52, and Leuconostoc mesenteroides RIL60 with high similarity based on 16S rRNA gene sequencing.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

따라서 본 연구에서는 생선 내장으로부터 분리된 유산균 중 프로바이오틱 균주로서 적합하고 히스타민 분해능이 있는 균주를 선발하여 히스타민 생성균에 대한 제어 효과를 확인하였다.
본 연구에서는 생선 내장으로부터 분리된 유산균의 프로바이오틱 특성과 아민 산화효소(diamine oxidase, DAO) 및 박테리오신 생산을 통한 히스타민 분해능을 조사하였다. 조기, 가자미, 명태 및 우럭 내장으로부터 분리된 총 97종의 유산균 중에서 CIL08, CIL16, FIL20, FIL31, PIL45, PIL49, PIL52 및 RIL60 균주는 인공 소화액에 대한 저항성이 강하고, HT-29 상피세포에 대해서도 높은 부착력을 보였으며, 항생제(amoxicillin, ampicillin, erythromycin, penicillin G, streptomycin, tetracycline 및 vancomycin)에 대한 내성도 강한 것으로 나타났다.
생선은 단백질 함량이 높아서 부패 발생 가능성이 높고 특히 히스티딘은 표피나 내장에 분포하는 아미노산 탈탄산 효소생산균에 의해 과량의 히스타민으로 분해되어 이를 섭취한 경우 알레르기 식중독을 유발하게 되므로 본 연구에서는 프로바이오틱 유산균이 생산한 항균물질과 히스타민 분해능에 의한 유해 아민 축적량 감소 효과를 살펴보았다. 프로바이오틱 유산균은 강산이나 담즙산 등의 소화액에 대한 저항성으로 인체 소화기관을 통과하는 동안 생존하여 장에 도달한 후 장 점막상피세포에 부착하고 항생제에 대한 내성으로 인해 장관 내에서 증식하는 동안 항균물질을 생산하여 장내에 유입된 유해균의 증식을 억제시킨다.

제안 방법

37°C에서 24시간 배양한 후 well 주변에 저해환을 생성한 최소 농도를 측정하여 항생제에 대한 minimum inhibitory concentration(MIC)를 구하였다(Musikasang et al., 2012).
50°C 정도로 식힌 MRS agar [agar 1.0% (v/v), 10 ml]에 세균 세포 현탁액(1%, v/v)을 접종하고 혼합한 후 MRS agar (10 ml) 평판배지 위에 중층하여 응고시켰다.
생선 내장(25 g)을 균질화한 시료 용액 1 ml를 채취하여 Brain Heart Infusion (BHI) agar (Difco) 배지 상에 37°C, 48시간 평판 배양하여 얻은 집락을 순수 분리 배양한 다음 BHI agar 사면배지에 계대 배양하였다. BHI broth 상에서 준비된 배양액은 히스티딘이 첨가된 탈카르복시화 배지 상에서 히스타민 생성능을 조사하여 양성 반응을 나타낸 균주를 대상으로 BHI agar 사면배지에 계대 배양 후 그람염색, 세포형태, 포자형성능, 카탈라아제 및 옥시다아제 생성능을 확인하였다. 또한 UNI-L (5′-AGAGTTTGATCATGGCTCAG-3′)와 UNI-R (Escherichia coli 1410-1391; 5′-GTGTGACGGGC GGTGTGTAC-3′) primer를 사용하여 16S rRNA 염기서열을 분석하여 동정하였다.
FIL31과 PIL52 균주는 포도당을 분해하여 가스를 생성하였으나, CIL08, FIL20 및 RIL60 균주는 가스를 생성하지 않았다. CIL08, PIL52 및 RIL60 균주는 L형의 유산을 생성하였고, CIL08, FIL20 및 RIL60은 catalase를 생성하였다. 한편, 당 발효능과 염기서열 분석을 통해 P.
HT-29 세포에 대한 부착능 : 인체 유래 상피세포에 대한 실험 균주의 부착능은 Osmanagaoglu 등(2010)의 방법을 일부 변형하여 측정하였다. HT-29는 Korean Cell Line Bank (KCLB)로부터 분양 받은 다음 56°C, 30분간 가열 처리한 10% (v/v) fetal bovine serum (FSB, Gibco), 2 mM L-glutamine, 1 mM sodium pyruvate, 100 U/ml penicillin 및 0.
MRS broth로부터 얻은 유산균 배양 상등액 내 유산의 영향을 배제하기 위해 6 N NaOH를 이용하여 pH 6.5로 조정하고, 과산화수소를 제거하기 위해 catalase (Sigma-Aldrich, 1 mg/ml)를 처리한 다음 황산암모늄[60% (w/v)]을 첨가하여 단백질 침전을 위해 교반(4°C, overnight)하였다.
Microtiter plate의 각 well에 유산균 전 배양액, 음성 대조군(Pseudomonas aeruginosa BK19) 혹은 양성 대조군(Enterococcus faecalis ATCC 29212)의 배양액(50 μl)과 히스티딘(2%, w/v)이 첨가된 탈카르복시화 액체배지(100 μl)를 분주하고 난 후 35°C, 72시간 동안 혐기적인 조건(Anoxomat system, MART Co.) 하에서 배양한 다음 자색으로 변한 경우 양성으로 판정하였다.
)를 이용하여 DNA를 증폭(94°C에서 4분간 initial denaturation, 94°C에서 30초간 denaturation, 55°C에서 30초간 annealing, 72°C에서 1분간 extension, 72°C에서 7분간 final extension, 35 cycle) 시켰다. PCR 산물은 전기영동(1.5% agarose gel)하여 밴드를 확인하고 QIA quick PCR purification kit (Qiagen)로 정제하였다. 정제 산물은 DNA sequencer (ABI Prism® 3730 Avant Genetic Analyzer, Applied Biosystem)로 분석하고 난 후 The National Center for Biotechnology Information (NCBI, http://www.
Plate well에 BHI broth를 분주하고 이진 희석법으로 농도를 맞춘 박테리오신 용액과 히스타민 생성 균주의 세포 현탁액 1% (v/v)를 첨가한 다음 37°C에서 24시간 배양한 후 microplate reader를 이용하여 흡광도(600 nm)를 측정하였다.
0)로 2회 세척하고 2% formalin으로 overnight 고정하고 나서 2% eosin Y로 염색한 후에 1% acetic acid로 2회 세척하였다. 그런 다음 microplate reader(BioTek, Inc.)를 이용하여 570 nm에서 흡광도를 측정하여 HT-29 세포에 대한 유산균의 부착능을 측정하였다.
또한 UNI-L (5′-AGAGTTTGATCATGGCTCAG-3′)와 UNI-R (Escherichia coli 1410-1391; 5′-GTGTGACGGGC GGTGTGTAC-3′) primer를 사용하여 16S rRNA 염기서열을 분석하여 동정하였다.
5로 조정하여 인공 위액을 제조한 다음 유산균을 접종하고 37°C, 2시간 배양하였다. 무균적으로 배양액(1 ml)을 채취하고 MRS agar 상에서 표준한천평판배양법으로 잔존하는 생균수를 측정하였다. 한편, PBS (pH 8.
배양 직후 배양액을 채취하여 원심분리(7,000 × g, 10분, 4°C)하고 얻은 상등액은 0.22 μm membrane filter로 여과한 후 앞서 언급한 방법에 따라 HPLC를 사용하여 히스타민 함량을 측정하였다.
평판 배지 위에 자란 독립된 집락을 선택하여 trypticase soy agar (TSA, Difco) 상에서 순수 분리하고 히스타민 분해능을 조사하기 위해 histamine dihydrochloride (h-TSB, 50 ppm)이 첨가된 trypticase soy broth (TSB)에 접종하고 35°C에서 24시간 동안 배양하였다. 배양액 내에 잔존하는 히스타민의 함량은 Eerola 등(1993)과 Mah 등(2003)의 방법을 일부 변형하여 high pressure liquid chromatography (HPLC, Shimadzu)로 측정하였다. 즉, 히스타민 표준용액(500ppm) 및 세포 배양액 1 ml에 0.
) 평판배지에 접종하여 호기적인 조건 하에서 37°C, 48시간 배양한 후 투명환을 생성하는 집락만을 유산균으로 간주하고 이를 순수 분리 배양하여 MRS agar 사면배지에 계대 배양하였다. 분리된 유산균주를 대상으로 프로바이오틱 균주로서의 적합하고 히스타민 분해능 및 히스타민 생성균에 대한 박테리오신의 항균 활성을 나타내는 균주를 최종 선발하여 동정하였다. 즉, 형태학적 및 배양학적 특성과 API 50 CHL system (bioMérieux)으로 당 분해능을 조사하였고, DNA를 추출 정제하여 27F (5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′)와 1492R (E.
용균된 세포 현탁액은 85°C에서 약 20분간 가열한 다음 원심분리(13,000 × g, 5분, 4°C)하여 세포 잔해물을 제거하고 상등액으로부터 얻은 DNA는 70% 알코올을 처리하여 침전시켜 중합효소연쇄반응(polymerase chain reaction, PCR)을 위한 template DNA로 사용하였다.
원심분리(12,000 × g, 30분, 4°C)해서 침전물만을 모으고 20 mM PBS (pH 6.5)에 현탁시킨 다음 molecular weight cut-off가 1,000 Da인 투석막(Spectrum Medical Industries, Inc.)을 이용하여 4°C, 24시간 동안 투석해서 조 박테리오신 용액을 조제하였다.
인공 소화액 하에서의 생존율 : 실험 균주의 위액 및 담즙액에 대한 저항성은 Grimoud 등(2010)의 방법을 일부 변형하여 조사하였으며, MRS broth (100 ml)에 전 배양액(1%, v/v)을 접종하고 호기적인 조건 하에서 37°C, 24시간 배양한 후 배양액을 원심분리(7,000 × g, 10분, 4°C)하여 세포만을 모으고, PBS (pH 7.0)로 2회 세척하고 난 다음 1.0 × 108 CFU/ml로 세포수를 조정하였다.
정제 산물은 DNA sequencer (ABI Prism® 3730 Avant Genetic Analyzer, Applied Biosystem)로 분석하고 난 후 The National Center for Biotechnology Information (NCBI, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)의 Basic Local Align Search Tool (BLAST) 프로그램을 활용하여 염기서열의 상동성을 확인하였다(Chen et al., 2008).
즉, 0.0005% pyridoxal-HCl(Sigma-Aldrich)와 0.5% L-histidine hydrochloride monohydrate를 혼합한 TSB (h-TSB)에 히스타민 생성균을 접종하고 35°C에서 24시간 배양하였다.
즉, BHI broth와 MRS broth 배양액으로부터 각각 얻은 히스타민 생성균과 프로바이오틱 유산균의 세포현탁액(1.0 × 106 CFU/ml) 1% (v/v)씩 BHI broth에 접종한 다음 37°C에서 24시간 배양하여 얻은 배양액으로부터 잔존하는 히스타민 함량을 HPLC로 측정하였다.
즉, 실험 균주는 MRS broth에 접종하여 호기적인 조건 하에서 37°C, 24시간 동안 배양한 후 원심분리(7,000 × g, 10분, 4°C)하였다.
즉, 형태학적 및 배양학적 특성과 API 50 CHL system (bioMérieux)으로 당 분해능을 조사하였고, DNA를 추출 정제하여 27F (5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′)와 1492R (E. coli numbering 1492-1511; 5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′) primer으로 DNA를 증폭(97°C에서 5분간 initial denaturation, 94°C에서 1분간 denaturation, 54°C에서 30초간 annealing, 72°C에서 1분간 extension, 72°C에서 4분간 final extension, 30 cycle) 시킨 후 DNA sequencer (ABI Prism® 3730 Avant Genetic Analyzer, Applied Biosystems)로 분석하여 염기서열의 상동성 (homology)을 확인하였다(Tajabadi et al., 2013).
즉, 히스타민 생성 균주는 BHI broth에 접종하여 37°C, 24시간 배양한 후 원심분리(7,000 × g, 10분, 4°C)하여 세포를 모으고 PBS (pH 7.0)로 2회 세척한 다음 세균 세포수를 1.0 × 105 CFU/ml로 조정하였다.
평판 배지 위에 자란 독립된 집락을 선택하여 trypticase soy agar (TSA, Difco) 상에서 순수 분리하고 히스타민 분해능을 조사하기 위해 histamine dihydrochloride (h-TSB, 50 ppm)이 첨가된 trypticase soy broth (TSB)에 접종하고 35°C에서 24시간 동안 배양하였다.
프로바이오틱 유산균의 히스타민 분해능은 Lee 등(2015)의 방법을 일부 변형하여 측정하였다. 즉, 실험 균주는 MRS broth에 접종하여 호기적인 조건 하에서 37°C, 24시간 동안 배양한 후 원심분리(7,000 × g, 10분, 4°C)하였다.
한편, MRS broth에서 37°C, 24시간 동안 배양한 유산균 배양액을 원심분리(7,000 × g, 10분, 4°C)하여 세포를 모은 뒤 PBS(pH 7.0)로 세척한 다음 유산균수(1.0 × 108 CFU/ml)를 조정하고 HT-29 세포가 있는 well에 접종한 후 37°C, 2시간 동안 배양하였다.
한편, PBS (pH 8.0)에 oxgall (0.5%,Sigma-Aldrich)를 첨가하여 인공 담즙액을 제조한 다음 유산균 세포 현탁액(1.0 × 108 CFU/ml)을 접종하고 37°C, 3시간 배양한 다음 MRS agar 평판배지 상에서 생균수를 측정하였다.
한편, 유산균 분리를 위해 균질화 한 시료 용액 1 ml를 채취하여 1% (w/v) CaCO3가 첨가된 Lactobacilli MRS agar (BD Difco Co.) 평판배지에 접종하여 호기적인 조건 하에서 37°C, 48시간 배양한 후 투명환을 생성하는 집락만을 유산균으로 간주하고 이를 순수 분리 배양하여 MRS agar 사면배지에 계대 배양하였다.
항생제에 대한 내성 : 실험 균주는 MRS broth에 접종한 다음 37°C에서 24시간 배양한 후 배양액을 원심분리(7,000 × g, 10분, 4°C)하여 세포를 모으고 PBS (pH 7.0)로 2회 세척하여 동일한 buffer에 세균 세포 (1.0 × 106 CFU/ml)를 현탁 시켰다.
히스타민 생성 억제능이 있는 유산균과 생선 내장으로부터 분리된 히스타민 생성균을 혼합 배양한 후 히스타민 함량 변화를 측정하였다. 즉, BHI broth와 MRS broth 배양액으로부터 각각 얻은 히스타민 생성균과 프로바이오틱 유산균의 세포현탁액(1.
히스타민 함량 분석을 위해 Nova-Pak C18 컬럼 (150 × 3.9mm, Waters, Milford)을 사용하였고, 이동상 ammonium acetate(0.1 M, solvent A)와 acetonitrile (solvent B)의 유속은 1 ml/min, 시료는 20 μl로 주입하였으며 254 nm에서 흡광도를 측정하였다.

대상 데이터

HT-29는 Korean Cell Line Bank (KCLB)로부터 분양 받은 다음 56°C, 30분간 가열 처리한 10% (v/v) fetal bovine serum (FSB, Gibco), 2 mM L-glutamine, 1 mM sodium pyruvate, 100 U/ml penicillin 및 0.1 mg/ml streptomycin을 첨가한 Dulbecco’s modified Eagle’s minimal essential medium (DMEM, Sigma-Aldrich)에 접종하고 37°C, 5% CO2 조건 하에서 배양하였다.
생선 내장(25 g)을 균질화한 시료 용액 1 ml를 채취하여 Brain Heart Infusion (BHI) agar (Difco) 배지 상에 37°C, 48시간 평판 배양하여 얻은 집락을 순수 분리 배양한 다음 BHI agar 사면배지에 계대 배양하였다.

데이터처리

항목별 총 3회 실험하여 얻은 측정값은 평균±표준편차로 나타내었으며, SPSS 프로그램(Ver. 12.0)의 paired t-test를 통해 대조구와의 유의적인 차이(P<0.05)를 검증하였다.

이론/모형

)을 이용하여 4°C, 24시간 동안 투석해서 조 박테리오신 용액을 조제하였다. 생선 내장으로부터 분리된 히스타민 생산균에 대한 박테리오신 용액의 항균 활성은 microtiter plate method (Holo et al., 1991)에 따라 측정하였다. 즉, 히스타민 생성 균주는 BHI broth에 접종하여 37°C, 24시간 배양한 후 원심분리(7,000 × g, 10분, 4°C)하여 세포를 모으고 PBS (pH 7.
히스타민 생성능 : 실험 균주의 히스타민 생성능은 히스티딘을 첨가한 탈카르복시화 배지(decarboxylating medium) 상에서 측정하였다(Bover-Cid and Holzapfel, 1999). 즉, 전구체 아미노산(L-histidine monohydrochloride monohydrate, Sigma-Aldrich, 1 g/L)과 pyridoxal 5-phosphate (1 mg/L)가 첨가된 탈카르복시화 액체배지(decarboxylating broth)에 실험 균주를 접종하고 35°C에서 48시간 동안 5회 전 배양하였다.

성능/효과

생선 내장으로부터 분리된 히스타민 생성균과 히스타민 분해능 및 박테리오신 생산능이있는 유산균 세포 현탁액을 BHI broth에 접종하여 37°C에서 24시간 혼합 배양한 후 배양액 내에 잔존하는 히스타민 함량을 측정한 결과는 Table 4와 같다. CIL08 및 RIL60 균주들의 히스타민 분해능에 의해 배양액 내에 잔존하는 히스타민 함량이 대조구에 비해 유의하게 감소되었다. FIL20 및 PIL52 균주들은 히스타민 분해능뿐만 아니라 박테리오신 생산능이 확인되었으나, BHI broth 상에서 FIL20의 박테리오신 활성은 MRS broth에서 생산된 활성의 50% 수준이었고, PIL52 균주의 박테리오신 활성은 BHI broth에서 나타나지 않았다.
생선 내장으로부터 분리된 유산균 중 프로바이오틱 균주로서 적합하고 히스타민 분해능이 있으며 박테리오신 생산에 의한 히스타민 생성균의 항균 활성을 나타낸 균주를 최종 선발하여 형태학적 및 배양학적 특성, API 50 CHL kit에 의한 당 발효능 및 16S rRNA 염기서열 분석을 통해 동정한 결과는 Table 5와 같다. CIL08과 RIL60 균주는 구균인 반면, FIL20, FIL31 및 PIL52 균주는 간균이었고 5균주 모두 운동성이 없는 그람 양성균이었다. FIL31과 PIL52 균주는 포도당을 분해하여 가스를 생성하였으나, CIL08, FIL20 및 RIL60 균주는 가스를 생성하지 않았다.
CIL16, FIL31, PIL45 및 PIL49 균주는 히스타민 분해능을 보이지 않았으나, CIL08, FIL20, PIL52 및 RIL60 균주는 대조구의 히스타민 함량을 약 20–30% 정도 감소시킨 것으로 나타났으며, 그 중에서 RIL60의 분해능이 가장 높게 나타났다.
CIL08 및 RIL60 균주들의 히스타민 분해능에 의해 배양액 내에 잔존하는 히스타민 함량이 대조구에 비해 유의하게 감소되었다. FIL20 및 PIL52 균주들은 히스타민 분해능뿐만 아니라 박테리오신 생산능이 확인되었으나, BHI broth 상에서 FIL20의 박테리오신 활성은 MRS broth에서 생산된 활성의 50% 수준이었고, PIL52 균주의 박테리오신 활성은 BHI broth에서 나타나지 않았다. 따라서 FIL20과 PIL52 균주들의 히스타민 생성능에 대한 감소 효과는 BHI broth 상에서 다소 낮게 나타났으며, FIL31 균주도 BHI broth 내에서는 박테리오신 활성이나타나지 않아 히스타민 축적량이 대조구와 차이가 없었다.
특히 DAO를 생산하는 것으로 추정되는 CIL08, FIL20, PIL52 및 RIL60 등의 4균주는 히스타민 분해능이 유의하게 높았다. FIL20, FIL31 및 PIL52 유산균이 생산한 박테리오신에 의해선 Enterococcus aerogenes CIH05, Serratia marcescens CIH09, Enterococcus faecalis FIH11, Pediococcus halophilus FIH15, Lactobacillus sakei PIH16, Enterococcus faecium PIH19, Leuconostoc mesenteroides RIH25 혹은 Aeromonas hydrophilia RIH28의 증식과 히스타민 생성량이 유의하게 감소되었다. 또한 생선 내장에서 분리된 히스타민 생성균과 히스타민 분해능 혹은 박테리오신 생산능을 가진 CIL08, FIL20, PIL52 및 RIL60 유산균과 혼합 배양에 의해 히스타민 축적량이 감소되었다.
FIL20의 박테리오신 처리에 의해서 S. marcescens CIH09, E. faecalis FIH11, L. sakei PIH16 및 L. mesenteroides RIH25의 히스타민 함량을 56–76% 정도 감소시켰고, FIL31의 박테리오신에 의해서도 E. aerogenes CIH05 (29%), P. halophilus FIH15 (74%) 및 A. hydrophilia RIH28 (38%)의 히스타민 생성을 억제하는 효과가 나타났다.
mesenteroides에 대해선 32 AU/ml의 활성을 나타내었다. FIL31의 박테리오신 활성을 측정한 결과, E. aerogenes (256 AU/ml), A. hydrophila (128 AU/ml) 및 P. halophilus (32 AU/ml)에 대한 항균 활성을 나타내었다. PIL52의 박테리오신은 E.
halophilus (32 AU/ml)에 대한 항균 활성을 나타내었다. PIL52의 박테리오신은 E. faecium에 대해 가장 높은 항균 활성(1,024 AU/ml)을 나타내었고, E. aerogenes에 대해선 512 AU/ml의 활성을 나타내었다.
lactis subsp. lactis VR84 및 EG46과 티라민 생성능이 있는 E. faecalis EF37을 혼합 배양한 결과, EF37의 균수는 유의하게 감소되었으며, 초기 접종량에 따라 증식 속도와 최대 균수에 차이가 있었으므로 바이오제닉 생성균의 초기 접종량이 적을수록 티라민 축적량은 감소되었다고 하였다. 생선을 발효하는 동안 바이오제닉 아민 축적 감소를 위한 발효 스타터의 영향을 살펴본 결과, AO 활성이 있는 S.
조기 내장으로부터 분리된 히스타민 생성균인 CIH03, CIH05 및 CIH09의 염기서열 분석 결과 상동성 99% 이상의 Morganella morganii, Enterobacter aerogenes 및 Serratia marcescens으로 각각 동정되었다. 가자미로부터 분리된 FIH11과 FIH15는 각각 E. faecalis와 Pediococus halophilus으로 동정되었고, 명태 내장으로부터 분리된 PIH16, PHI19 및 PIH21은 L. sakei, E. faecium 및 Citrobacter freundii 등으로 확인되었다. 그리고 우럭으로부터 히스타민 생성능이 높은 RIH25 및 RIH28 균주는 상동성 99.
5로 조정한 인공 위액에서 2시간 배양했을 때 FIL31과 PIL52는 초기 균수(10⁸CFU/ml)로부터 약 1 log cycle 이하만 감소되었고, 그 이외의 균주도 10⁶ CFU/ml 이상을 유지하였다. 게다가 oxgall 0.5% 하에서 3시간 배양한 후 CIL08, FIL20 및 FIL31은 10⁸ CFU/ml을 유지하였고, CIL16, PIL45, PIL49 및 RIL60은 10⁷ CFU/ml 이상 생존하였으나, PIL52는 다른 균주들에 비해 담즙액 하에서 저항성이 다소 낮았다. 분리된 10균주의 HT-29 세포에 대한 부착능은 6.
cremoris 등으로 확인되었다. 게다가 수산식품 등에 주로 분포하는 그람 양성 및 음성의 병원성균과 부패균에 대한 해산어로부터 분리된 유산균(E. faecium, Enterococcus sanguinicola, E. faecalis, Enterococcus gallinarum, Enterococcus cassseliflavus, Enterococcus mundtii, Enterococcus pseudoavium, L. lactis 및 Carnobacterium sp.)의 박테리오신 생성능을 조사한 결과, L. monocytogenes, Staphylococcus aureus, A. hydrophila, Aeromonas salmonicida, Vibrio anguillarum 및 Carnobacterium 등에 대해 강한 항균 활성을 나타내었고, B. cereus, Bacillus pumilus, B. subtilis, Brochotrix thermosphacta 및 S. aureus에 대해서도 항균 효과가 나타났다(Chahad et al., 2012). Nugrahani 등(2016)은 L.
faecium 및 Citrobacter freundii 등으로 확인되었다. 그리고 우럭으로부터 히스타민 생성능이 높은 RIH25 및 RIH28 균주는 상동성 99.7%와 99.0%의 L. mesenteroides 및 Aeromonas hydrophilia로 동정되었다. 이와 같이 생선 내장으로부터 히스타민 생성능이 높은 10균주를 대상으로 프로바이오틱 균주로 추정되는 유산균 8종의 박테리오신 활성을 조사한 결과, CIL08, CIL16, PIL45, PIL49 및 RIL60 유산균은 히스타민 생성균에 대해 항균활성을 나타내는 박테리오신을 생산하지 않았다.
FIL20 및 PIL52 균주들은 히스타민 분해능뿐만 아니라 박테리오신 생산능이 확인되었으나, BHI broth 상에서 FIL20의 박테리오신 활성은 MRS broth에서 생산된 활성의 50% 수준이었고, PIL52 균주의 박테리오신 활성은 BHI broth에서 나타나지 않았다. 따라서 FIL20과 PIL52 균주들의 히스타민 생성능에 대한 감소 효과는 BHI broth 상에서 다소 낮게 나타났으며, FIL31 균주도 BHI broth 내에서는 박테리오신 활성이나타나지 않아 히스타민 축적량이 대조구와 차이가 없었다.
, 2015). 따라서 본 결과와 이미 보고된 결과에 따르면 세균의 히스타민 분해능은 균종 및 배양조건에 따라 상이하며, 유산균의 분해능은 DAO 생성에 기인하는 것으로 추정된다.
hydrophilia RIH28 (38%)의 히스타민 생성을 억제하는 효과가 나타났다. 또한 PIL52의 박테리오신도 E. aerogenes CIH05의 히스타민 생성량을 25% 감소시키고, E. faecium PIH19의 생성량도 약 20% 감소시켰다.
FIL20, FIL31 및 PIL52 유산균이 생산한 박테리오신에 의해선 Enterococcus aerogenes CIH05, Serratia marcescens CIH09, Enterococcus faecalis FIH11, Pediococcus halophilus FIH15, Lactobacillus sakei PIH16, Enterococcus faecium PIH19, Leuconostoc mesenteroides RIH25 혹은 Aeromonas hydrophilia RIH28의 증식과 히스타민 생성량이 유의하게 감소되었다. 또한 생선 내장에서 분리된 히스타민 생성균과 히스타민 분해능 혹은 박테리오신 생산능을 가진 CIL08, FIL20, PIL52 및 RIL60 유산균과 혼합 배양에 의해 히스타민 축적량이 감소되었다. 히스타민 생성을 억제하는 프로바이오틱 유산균의 배양학적 특성과 16S rRNA 염기서열 분석을 통해 Pediococcus pentosaceus CIL08, Lactobacillus plantarum FIL20, Lactobacillus paracasei FIL31, Lactobacillus sakei PIL52 및 Leuconostoc mesenteroides RIL60으로 동정되었다.
5시간 노출되었을 때에도 생존하였으며, 고농도의 담즙 하에서도 강한 저항성을 나타내었다고 하였다. 본 연구에서 분리된 유산균은 기존에 보고된 유산균들과 배양조건과 균종에 따라 활성의 차이는 있지만, 인공 위액과 담즙액에 대한 저항성과 상피세포에 대한 부착능 및 항생제에 대한 내성이 비교적 높은 것으로 확인되었다.
분리된 10균주의 HT-29 세포에 대한 부착능은 6.9–31.4%로 균주에 따라 다소 차이가 있었으나, 특히, CIL08, FIL20 및 PIL45는 20% 이상의 부착능을 나타내었다.
프로바이오틱 유산균은 강산이나 담즙산 등의 소화액에 대한 저항성으로 인체 소화기관을 통과하는 동안 생존하여 장에 도달한 후 장 점막상피세포에 부착하고 항생제에 대한 내성으로 인해 장관 내에서 증식하는 동안 항균물질을 생산하여 장내에 유입된 유해균의 증식을 억제시킨다. 생선 내장으로부터 분리된 유산균 중에서 L. plantarum FIL20 균주는 인공 소화액 및 항생제에 대한 저항성이 높고 장관 상피세포에 대한 부착능이 높으므로 프로바이오틱 균주로서 적합한 것으로 나타났다. 또한 히스타민 분해능 및 박테리오신 생산능을 모두 가지고 있어 일부 히스타민 생성균에 대한 항균 활성 및 히스타민 생성량을 감소시키므로 유해 아민 저감화에 효과적일 것으로 사료된다.
mesenteroides 및 Aeromonas hydrophilia로 동정되었다. 이와 같이 생선 내장으로부터 히스타민 생성능이 높은 10균주를 대상으로 프로바이오틱 균주로 추정되는 유산균 8종의 박테리오신 활성을 조사한 결과, CIL08, CIL16, PIL45, PIL49 및 RIL60 유산균은 히스타민 생성균에 대해 항균활성을 나타내는 박테리오신을 생산하지 않았다. 하지만 FIL20, FIL31 및 PIL52 유산균은 일부 히스타민 생성균에 대해 항균력을 나타내었으며, 박테리오신 활성은 히스타민 생성 균주에 따라 다소 차이가 있었다.
생선 내장으로부터 히스타민을 생성하는 균주를 16S rRNA 염기서열 분석을 통해 동정하고 프로바이오틱으로 적합하다고 추정되는 유산균 박테리오신의 항균 활성을 측정한 결과는 Table 2와 같다. 조기 내장으로부터 분리된 히스타민 생성균인 CIH03, CIH05 및 CIH09의 염기서열 분석 결과 상동성 99% 이상의 Morganella morganii, Enterobacter aerogenes 및 Serratia marcescens으로 각각 동정되었다. 가자미로부터 분리된 FIH11과 FIH15는 각각 E.
본 연구에서는 생선 내장으로부터 분리된 유산균의 프로바이오틱 특성과 아민 산화효소(diamine oxidase, DAO) 및 박테리오신 생산을 통한 히스타민 분해능을 조사하였다. 조기, 가자미, 명태 및 우럭 내장으로부터 분리된 총 97종의 유산균 중에서 CIL08, CIL16, FIL20, FIL31, PIL45, PIL49, PIL52 및 RIL60 균주는 인공 소화액에 대한 저항성이 강하고, HT-29 상피세포에 대해서도 높은 부착력을 보였으며, 항생제(amoxicillin, ampicillin, erythromycin, penicillin G, streptomycin, tetracycline 및 vancomycin)에 대한 내성도 강한 것으로 나타났다. 게다가 이들 균주들은 히스티딘이 함유된 탈카르복시화 액체배지 내에서 히스타민을 생산하지 않았다.
게다가 이들 균주들은 히스티딘이 함유된 탈카르복시화 액체배지 내에서 히스타민을 생산하지 않았다. 특히 DAO를 생산하는 것으로 추정되는 CIL08, FIL20, PIL52 및 RIL60 등의 4균주는 히스타민 분해능이 유의하게 높았다. FIL20, FIL31 및 PIL52 유산균이 생산한 박테리오신에 의해선 Enterococcus aerogenes CIH05, Serratia marcescens CIH09, Enterococcus faecalis FIH11, Pediococcus halophilus FIH15, Lactobacillus sakei PIH16, Enterococcus faecium PIH19, Leuconostoc mesenteroides RIH25 혹은 Aeromonas hydrophilia RIH28의 증식과 히스타민 생성량이 유의하게 감소되었다.
하지만 FIL20, FIL31 및 PIL52 유산균은 일부 히스타민 생성균에 대해 항균력을 나타내었으며, 박테리오신 활성은 히스타민 생성 균주에 따라 다소 차이가 있었다. 특히, E. faecalis와 L. sakei 등에 대한 FIL20의 박테리오신 활성은 128 AU/ml, S. marcescens에 대한 활성은 64 AU/ml이고 L. mesenteroides에 대해선 32 AU/ml의 활성을 나타내었다. FIL31의 박테리오신 활성을 측정한 결과, E.
한편, 선발된 8종의 유산균은 모두 히스타민 생성능이 없는 것으로 확인되었다. 프로바이오틱 균주 선발 기준으로는 소화액에 대한 강한 저항성이 있어야 하고 장관 상피세포에 부착하여 항균물질을 생산함으로써 장내 유해 미생물의 증식을 억제할 수 있어야만 하는데 본 연구에서 선발된 8종은 이러한 조건을 in vitro 상에서 충족하였다.
CIL08, PIL52 및 RIL60 균주는 L형의 유산을 생성하였고, CIL08, FIL20 및 RIL60은 catalase를 생성하였다. 한편, 당 발효능과 염기서열 분석을 통해 P. pentosaceus CIL08, L. plantarum FIL20, L. paracasei FIL31, L. sakei PIL52 및 L.mesenteroides RIL60으로 동정되었다.
항생제에 대한 내성은 균주에 따라 큰 차이를 보였는데, CIL08 균주는 amoxicillin, streptomycin 및 vancomycin, CIL16 균주는 ampicillin, penicillin G 및 streptomycin, FIL20 균주는 penicillin G, tetracycline, vancomycin, FIL31 균주는 ampicillin, erythromycin, penicillin G, streptomycin 및 vancomycin, PIL45 균주는 amoxicillin 및 etrythromycin, PIL49 균주는 erythromycin, tetracycline 및 vancomycin, PIL52 균주는 ampicillin, penicillin G, tetracycline 및 vancomycin, RIL60 균주는 amoxicillin, ampicillin 및 vancomycin 등에 대한 저항성이 강한 것으로 나타났다. 한편, 선발된 8종의 유산균은 모두 히스타민 생성능이 없는 것으로 확인되었다. 프로바이오틱 균주 선발 기준으로는 소화액에 대한 강한 저항성이 있어야 하고 장관 상피세포에 부착하여 항균물질을 생산함으로써 장내 유해 미생물의 증식을 억제할 수 있어야만 하는데 본 연구에서 선발된 8종은 이러한 조건을 in vitro 상에서 충족하였다.
4%로 균주에 따라 다소 차이가 있었으나, 특히, CIL08, FIL20 및 PIL45는 20% 이상의 부착능을 나타내었다. 항생제에 대한 내성은 균주에 따라 큰 차이를 보였는데, CIL08 균주는 amoxicillin, streptomycin 및 vancomycin, CIL16 균주는 ampicillin, penicillin G 및 streptomycin, FIL20 균주는 penicillin G, tetracycline, vancomycin, FIL31 균주는 ampicillin, erythromycin, penicillin G, streptomycin 및 vancomycin, PIL45 균주는 amoxicillin 및 etrythromycin, PIL49 균주는 erythromycin, tetracycline 및 vancomycin, PIL52 균주는 ampicillin, penicillin G, tetracycline 및 vancomycin, RIL60 균주는 amoxicillin, ampicillin 및 vancomycin 등에 대한 저항성이 강한 것으로 나타났다. 한편, 선발된 8종의 유산균은 모두 히스타민 생성능이 없는 것으로 확인되었다.
또한 생선 내장에서 분리된 히스타민 생성균과 히스타민 분해능 혹은 박테리오신 생산능을 가진 CIL08, FIL20, PIL52 및 RIL60 유산균과 혼합 배양에 의해 히스타민 축적량이 감소되었다. 히스타민 생성을 억제하는 프로바이오틱 유산균의 배양학적 특성과 16S rRNA 염기서열 분석을 통해 Pediococcus pentosaceus CIL08, Lactobacillus plantarum FIL20, Lactobacillus paracasei FIL31, Lactobacillus sakei PIL52 및 Leuconostoc mesenteroides RIL60으로 동정되었다.

후속연구

또한 히스타민 분해능 및 박테리오신 생산능을 모두 가지고 있어 일부 히스타민 생성균에 대한 항균 활성 및 히스타민 생성량을 감소시키므로 유해 아민 저감화에 효과적일 것으로 사료된다. 게다가 프로바이오틱 유산균은 소화액에 대한 저항성이 높아 체내에 유입된 아미노산 탈탄산 효소 생산균의 제어에도 유용하며, 히스타민 분해능이 있는 유산균을 발효 스타터로 이용할 경우 발효 식품의 저장성 향상과 품질 개선 효과를 얻을 수 있을 것으로 판단된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	바이오제닉 아민은 무엇인가?	바이오제닉 아민(biogenic amine)은 알데히드나 케톤의 아미노화와 아미노기 전이화 및 아미노산의 탈탄산반응에 의해 주로 형성되는 염기성 질소 화합물이다. 이는 저분자의 유기 염기로서 화학 구조에 따라 지방족 화합물(putrescine, cadaverine, spermine, spermidine), 방향족 화합물(tyramine, phenylethylamine) 및 헤테로 고리 화합물(histamine, tryptamine)등으로 분류된다.
	식품에 존재하는 바이오제닉 아민이 인체에 미치는 영향은 무엇인가?	바이오제닉 아민은 어육이나 식육 가공품, 유제품, 와인, 맥주, 과일 뿐만 아니라 땅콩이나 초콜릿 등 다양한 식품에서 검출되는데 이는 식품 내에 함유된 Bacillus, Citrobacter, Clostridium, Klebsiella, Escherichia, Proteus, Pseudomonas, Salmonella, Shigella, Photobacterium, Lactobacillus, Pediococcus 및 Streptococcus 등의 미생물이나 동식물의 대사과정에 의해 주로 합성된다(Santos, 1996). 적당한 양의 히스타민, 트립타민, 베타-페닐에틸아민 및 티라민 등은 향정신성 약물이나 혈관 수축 효과 등으로 인체에 중요한 생리학적 효과를 나타내는 활성 아민으로 작용하지만, 식품 내에 함유된 과량의 일부 아민은 고혈압, 두통, 설사, 발진, 염증 등을 비롯하여 히스타민 중독이나 티라민 독성과 같은 식이성 질환의 원인이 되기도 한다. 게다가 유해 아민은 암을 유발하는 전구체로서 알려져 있다(Shalaby, 1996).
	바이오제닉 아민은 식품내에서 주로 어떻게 합성되는가?	이는 저분자의 유기 염기로서 화학 구조에 따라 지방족 화합물(putrescine, cadaverine, spermine, spermidine), 방향족 화합물(tyramine, phenylethylamine) 및 헤테로 고리 화합물(histamine, tryptamine)등으로 분류된다. 바이오제닉 아민은 어육이나 식육 가공품, 유제품, 와인, 맥주, 과일 뿐만 아니라 땅콩이나 초콜릿 등 다양한 식품에서 검출되는데 이는 식품 내에 함유된 Bacillus, Citrobacter, Clostridium, Klebsiella, Escherichia, Proteus, Pseudomonas, Salmonella, Shigella, Photobacterium, Lactobacillus, Pediococcus 및 Streptococcus 등의 미생물이나 동식물의 대사과정에 의해 주로 합성된다(Santos, 1996). 적당한 양의 히스타민, 트립타민, 베타-페닐에틸아민 및 티라민 등은 향정신성 약물이나 혈관 수축 효과 등으로 인체에 중요한 생리학적 효과를 나타내는 활성 아민으로 작용하지만, 식품 내에 함유된 과량의 일부 아민은 고혈압, 두통, 설사, 발진, 염증 등을 비롯하여 히스타민 중독이나 티라민 독성과 같은 식이성 질환의 원인이 되기도 한다.

참고문헌 (51)

Allameh, S.K., Daud, H., Yusoff, F.M., Saad, C.R., and Ideris, A. 2012. Isolation, identification and characterization of Leuconostoc mesenteroides as a new probiotic from intestine of snakehead fish (Channa Striatus). Afr. J. Biotechnol. 11, 3810-3816.
Bajpai, V.K., Han, J.H., Nam, G.J., Majumder, R., Park, C.S., Lim, J.H., Paek, W.K., Rather, I.A., and Park, Y.H. 2016. Characterization and pharmacological potential of Lactobacillus sakei 111 isolated from fresh water fish Zacco koreanus. DARU J. Pharm. Sci. 24, 1-12.

상세보기
Balcazar, J.L., Vendrell, D., De Blas, I., and Ruiz-Zarzuela, I. 2008. Characterization of probiotic properties of lactic acid bacteria from intestinal microbiota of fish. Aquacuture 278, 188-191.

상세보기
Bover-Cid, S. and Holzapfel, W.H. 1999. Improved screening procedure for biogenic amine production by lactic acid bacteria. Int. J. Food Microbiol. 52, 33-41.
Chahad, O.B., Bour, M.E., Calo-Mata, P., Boudabous, A., and Barros-Velazquez, J. 2012. Discovery of novel biopreservation agents with inhibitory effects on growth of food-borne pathogens and their application to seafood products. Res. Microbiol. 163, 44-54.

상세보기
Chen, H.C., Kung, H.F., Chen, W.C., Lin W.F., Hwang, D.F., Lee Y.C., and Tsai, Y.H. 2008. Determination of histamine and histamine-forming bacteria in tuna dumpling implicated in a food-borne poisoning. Food Chem. 106, 612-618.

상세보기
Cho, G.S., Do, H.K., Bae, C.Y., Cho, G.S., Whang, C.W., and Shin, H.K. 2006. Candidate of probiotic bacteria isolated from several jeotgals: Korean traditional fermented seafoods. J. Food Sci. Nutr. 11, 140-145.
Dapkevicius, M.L.N.E., Nout, M.J.R., Rombouts, F.M., Houben, J.H., and Wymenga, W. 2000. Biogenic amine formation and degradation by potential fish silage starter microorganisms. Int. J. Food Microbiol. 57, 107-114.

상세보기
Eerola, S., Hinkkanen, R., Lindfors, E., and Hirvi, T. 1993. Liquid chromatographic determination of biogenic amines in dry sausages. J. Assoc. Off. Anal. Chem. Int. 75, 575-577.
Garcia-Ruiz, A., Gonzalez-Rompinelli, E.M., Bartolome, B., and Moreno-Arribas, M.V. 2011. Potential of wine-associated lactic acid bacteria to degrade biogenic amines. Int. J. Food Microbiol. 148, 115-120.

상세보기
Ghanbari, M., Jami, M., Domig, K.J., and Kneifel, W. 2009. Seafood biopreservation by lactic acid bacteria-A review. LWT-Food Sci. Technol. 54, 315-324.
Ghanbari, M., Rezaei, M., Jami, M., and Nazari, R.M. 2013. Isolation and characterization of Lactobacillus species from intestinal contents of beluga (Huso huso) and Persian sturgeon (Acipenser persicus). Iran. J. Vet. Res. 10, 152-157.
Grimoud, J., Durand, H., Courtin, C., Monsan, P., Ouarne, F., Theodorou, V., and Roques, C. 2010. In vitro screening of probiotic lactic acid bacteria and prebiotic glucooligosaccharides to select effective synbiotics. Anaerobe 16, 493-500.

상세보기
Gomez-Sala, B., Munoz-Atienza, E., Sanchez, J., Basanta, A., Herranz, C., Hernandez, P.E., and Cintas, L.M. 2015. Bacteriocin production by lactic acid bacteria isolated from fish, seafood and fish products. Eur. Food Res. Technol. 241, 341-356.

상세보기
Holo, H., Nilssen, O., and Nes, I.F. 1991. Lactococcin A, a new bacteriocin from Lactococcus lactis subsp. cremoris: isolation and characterization of the protein and its gene. J. Bacteriol. 173, 3879-3887.

상세보기
Joosten, H.M. and Nunez, M. 1996. Prevention of histamine formation in cheese by bacteriocin-producing lactic acid bacteria. Appl. Environ. Microbiol. 62, 1178-1181.

상세보기
Kim, M.W. and Kim, Y.M. 2006. Isolation and identification of histamine degrading bacteria from Kwamegi. Kor. J. Life Sci. 16, 120-125.

원문보기 상세보기
Kim, M.K., Mah, J.H., and Hwang, H.J. 2009. Biogenic amine formation and bacteria contribution in fish, squid and shellfish. Food Chem. 116, 87-95.

상세보기
Klaenhammer, T.R. 1993. Genetics of bacteriocins produced by lactic acid bacteria. FEMS Microbiol. Rev. 12, 39-86.

상세보기
Kongkiattikajorn, J. 2015. Potential of starter culture to reduce biogenic amines accumulation in som-fug, a Thai traditional fermented fish sausage. J. Ethn. Foods 2, 186-194.

상세보기
Lakshamanan, R., Shakila, R.J., and Jeyasekaran, G. 2002. Survival of amine-forming bacteria during the ice storage of fish and shrimp. Food Microbiol. 19, 617-625.

상세보기
Lee, Y.C., Lin, C.S., Liu, F.L., Huang, T.C., and Tsai, Y.H. 2015. Degradation of histamine by Bacillus polymyxa isolated from salted fish products. J. Food Drug Anal. 23, 836-844.

상세보기
Leuschner, R.G., Heidel, M., and Hammes, W.P. 1998. Histamine and tyramine degradation by food fermenting microorganisms. Int. J. Food Microbiol. 39, 1-10.

상세보기
Linares, D.M., Martin, M.C., Ladero, V., Alvarez, M.A., and Fernandez, M. 2011. Biogenic amines in dairy products. Crit. Rev. Food Sci. 51, 691-703.

상세보기
Mah, J.H., Ahn, J.B., Park, J.H., Sung, H.C., and Hwang, H.J. 2003. Characterization of biogenic amine-producing microorganisms isolated from Myeolchi-Jeot, Korean salted and fermented anchovy. J. Microbiol. Biotechnol. 13, 692-699.

원문보기 상세보기
Mah, J.H. and Hwang, H.J. 2009. Inhibition of biogenic amine formation in a salted and fermented anchovy by Staphylococcus xylosus as a protective culture. Food Control 114, 168-173.
Maijala, R.L., Erola, S.H., Aho, M.A., and Hirn, J.A. 1993. The effect of GDL-induced pH decrease on the formation of biogenic amines in meat. J. Food Prot. 50, 125-129.
Middlebrooks, B.L., Toom, P.M., Douglas, W.L., Harrison, R.E., and Mcdowell, S. 1988. Effects of storage time and temperature on the microflora and amine development in Spanish mackerel (Scoberomorus maculatus). J. Food Sci. 53, 1024-1029.

상세보기
Migaw, S., Ghrairi, T., Belguesmia, Y., Choiset, Y., Berjeaud, J.M., Chobert, J.M., Hani, K., and Haertle, T. 2014. Diverstiy of bacteriocinogenic lactic acid bacteria isolated from Mediterranean fish viscera. World J. Microbiol. Biotechnol. 30, 1207-1217.

상세보기
Morii, H., Cann, D.C., and Taylor, L.Y. 1988. Histamine formation by luminous bacteria in mackerel stored at low temperatures. B. Jpn. Soc. Sci. Fish. 54, 299-305.

상세보기
Murooka, Y., Doi, N., and Harada, T. 1979. Distribution of membrane bound monoamine oxidase in bacteria. Appl. Environ. Microbiol. 38, 565-569.

상세보기
Musikasang, H., Sohsomboon, N., Tani, A., and Maneerat, S. 2012. Bacteriocin-producing lactic acid bacteria as a probiotic potential from Thai indigenous chickens. Czech J. Anim. Sci. 57, 137-149.

상세보기
Naila, A., Flint, S., Fletcher, G., Bremer, P., and Meerdink, G. 2010. Control of biogenic amines in food-existing and emerging approaches. J. Food Sci. 75, R139-R150.

상세보기
Nirunya, B., Suphitchaya, C., and Tipparat, H. 2008. Screening of lactic acid bacteria from gastrointestinal tracts of marine fish for their potential use as probiotics. Songklanakarin J. Sci. Technol. 30, 141-147.
Nugrahani, A., Anik, H., and Hariati, M. 2016. Characterization of bacteriocin Lactobacillus casei on histamine-forming bacteria. J. Life Sci. Biomed. 6, 15-21.
Osmanagaoglu, O., Kiran, F., and Ataoglu, H. 2010. Evaluation of in vitro probiotic potential of Pediococcus pentosaceus OZF isolated from human breast milk. Probiotics Antimicrob. Proteins 2, 162-174.

상세보기
Ozogul, F. 2011. Effects of specific lactic acid bacteria species on biogenic amine production by foodborne pathogen. Int. J. Food Sci. Technol. 46, 478-484.

상세보기
Priyadarshani, W.M.D. and Rakshit, S.K. 2011. Screening selected strains of probiotic lactic acid bacteria for their ability to produce biogenic amines (histamine and tyramine). Int. J. Food Sci. Technol. 46, 2062-2069.

상세보기
Santos, M.H.S. 1996. Biogenic amines: their importance in foods. Int. J. Food Microbiol. 29, 213-231.

상세보기
Shakila, R.J., Vasundhara, T.S., and Rao, D.V. 1996. Inhibitory effect of spices on in vitro histamine production and histidine decarboxylase activity of Morganella morganii and on the biogenic amine formation in mackerel stored at 30 degrees C. Z. Lebensm. Unters. Forsch. 203, 71-76.

상세보기
Shalaby, A.R. 1996. Significance of biogenic amines to food safety and human health. Food Res. Int. 29, 675-690.

상세보기
Straub, B.W., Kicherer, M., Schilcher, S.M., and Hammes, W.P. 1995. The formation of biogenic amines by fermentation organisms. Z. Lebensm. Unters. Forsch. 201, 79-82.

상세보기
Tabanelli, G., Montanari, C., Bargossi, E., Lanciotti, R., Gatto, V., Felis, G., Torriani, S., and Gardini, F. 2014. Control of tyramine and histamine accumulation by lactic acid bacteria using bacteriocin forming lactococci. Int. J. Food Microbiol. 190, 14-23.

상세보기
Tajabadi, N., Mardan, M., Saari, N., Mustafa, S., Bahreini, R., and Manap, M.Y.A. 2013. Identification of Lactobacillus plantarum, Lactobacillus pentosus and Lactobacillus fermentum from honey stomach of honeybee. Braz. J. Microbiol. 44, 717-722.
Ten Brink, B., Damink, C., Joosten, H.M.L., and Veld, J.H.J. 1990. Occurrence and formation of biologically active amines in foods. Int. J. Food Microbiol. 11, 73-84.

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Thiruneelakandan, G., Sesuraj, V.J., Babu, V., Senthikumar, V., Kathiresan, K., Sivakami, R., and Anthoni, S.A. 2013. Efficacy of preserving sea foods using marine Lactobacillus. Sci. Technol. Arts Res. J. 2, 10-13.
Todorov, S.D., Furtado, D.N., Saad, S.M.I., Tome, E., and Franco, B.D.G.M. 2011. Potential beneficial properties of bacteriocinproducing lactic acid bacteria isolated from smoked salmon. J. Appl. Microbiol. 110, 971-986.

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Visciano, P., Schirone, M., Tofalo, R., and Suzzi, G. 2012. Biogenic amines in raw and processed seafood. Front. Microbiol. 3, 1-10.
Yongjin, H., Wenshui, X., and Xiaoyong, L. 2007. Changes in biogenic amines in fermented silver carp sausages inoculated with mixed starter cultures. Food Chem. 104, 188-195.

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Zaman, M.Z., Bakar, F.A., Selamat, J., and Bakar, J. 2010. Occurrence of biogenic amines and amines degrading bacteria in fish sauce. Czech. J. Food Sci. 28, 440-449.

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Zaman, M.Z., Bakar, F.A., Jinap, S., and Bakar, J. 2011. Novel starter cultures to inhibit biogenic amines accumulation during fish sauce fermentation. Int. J. Food Microbiol. 145, 84-91.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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