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문제 정의
- 본 연구의 목적은 피막이풀로부터 항산화 기능이 있는지 OH와 DPPH의 활성, 환원력, 리폭시게나아제의 저해 활성이 있는지 조사하였다.
제안 방법
- 0)를 이용하였다. 50% 소거능을 나타내는 IC50은이 관계를 이용한 InStat3 software를 사용하여 산출하였다[13].
- Cho 등[5]의 방법에 따랐다. Fenton 반응에 의해 유리되는 OH 라디칼을 측정하였다. 반응물은 60 μl 1.
- 알루미늄 호일로 덮어 빛의 침투를 막고 37℃에서 30분 동안반응시켰다. 최적 농도(optical density, OD)를 UVmini-1240 Reader (Shimadzu, Kyoto, Japan)를 사용하여 파장 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조구로는 L-Ascorbic acid (1.
- )로 한정하였다. 피막이를 채집하여 소독하여 이물질과 물기를 제거한 후 잎과 줄기 두 부분으로 나누었다. 각 시료 30 g을 -70℃의 액체질소를 이용하여 잘 마쇄하였다.
- 피막이풀 추출물의 1, 1- diphenyl 2-picrylhyorazyl (DPPH) 항산화 활성 측정은 Brand-Williams 등[3]의 방법을 변형하였다. DPPH 용액은 5 mg DPPH를 2 ml 에탄올에 용해시켜 4℃ 에 두었다.
- 피막이풀 추출물의 농도는 0.1, 0.5, 1.0, 2.0, 4.0, 8.0 mg/ml 으로 제조하였다.
- 피막이풀을 이용한 OH 및 DPPH 활성 소거능을 평가하였다(Table 1). 0.
- 피막이풀이 LOX에 대한 저해작용이 있는지 조사하였다 (Table 1). LOX 저해율은 0.
- 환원력 평가는 Oyaizu 등의 방법을 변형하여 측정하였다 [12]. 에탄올에 용해한 시료 2.
- 5 ml를 첨가하여 반응을 종료하고 4, 000 rpm에서 10분간 원심분리하여 상등액을 회수하였다. 회수한 상등액은 증류수로 2배 희석한 후, 신선하게 조제된 0.1% ferric chloride 용액과 5 : 1 (v/v) 비율로 혼합하고 700 nm에서 흡광도를 측정하여 평가하였으며, 대조구로는 L-Ascorbic acid (1.0 μg/ml) (Sigma Co., U.S.A.)를 사용하였다.
대상 데이터
- 파장 490 nm에서 흡광도를 측정하였다. Nordihydroguaiaretic acid (NDGA)을 양성 대조구 저해제로 사용하였다.
- 5분간 상온에서 반응시킨 후 분광광도계(Shimadzu, UV-1800, Japan)로 흡광도를 측정하였다. OH 라디칼 소거 효과의 양성대조군으로는 thiourea를 이용하였다.
- 대조군인 저해제 well에는 저해제 10 μl를 주입하고 90 μl soybean LOX 용액을 추가하였다. 기질로 수산화칼륨 완충액에 녹인 아라키돈산(arachidon- ic acid) 또는 리놀렌산(linoleic acid)을 사용하였다. 반응을 중지시키기 위해 Chromogen 100 μl를 추가하여 96-well plate의 뚜껑을 덮고 5분간 교반(shaker)하였다.
- 최적 농도(optical density, OD)를 UVmini-1240 Reader (Shimadzu, Kyoto, Japan)를 사용하여 파장 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조구로는 L-Ascorbic acid (1.0 μg/ ml) (Sigma Co., U.S.A.)를 사용하였다.
- 피막이속(Hydrocotyle)에는 큰피막이(H. ramiflora), 큰잎피막이(H. nepalensis), 선피막이(H. maritima), 제주피막이(H. ja- ponica) 등이 있으나 본 연구에서는 가장 널리 분포하는 피막이 (H. sibthorpioides Lam.)로 한정하였다. 피막이를 채집하여 소독하여 이물질과 물기를 제거한 후 잎과 줄기 두 부분으로 나누었다.
데이터처리
- 각 분석은 3회씩 실시하였으며 평균±표준오차로 표시하였다. 라디칼 소거능은 시료 첨가구와 비 첨가구의 백분율로 표시하였으며, 저해율은 다음 식으로 계산하였다.
이론/모형
- 피막이풀 추출물의 hydroxyl radical (OH)의 소거 활성 측정은 Cho 등[5]의 방법에 따랐다. Fenton 반응에 의해 유리되는 OH 라디칼을 측정하였다.
성능/효과
- 05). NDGA을 대조군으로 사용했을 때 잎 추출물은 상대적으로 약 43.9%, 줄기는 30.1%의 저해효과를 나타내었다(Fig. 1).
- 0% 였다[19]. 따라서 피막이의 DPPH 활성은 다른 식물과 비교해도 매우 높은 것으로 나타났다.
- 본 연구에서 피막이의 OH 라디칼 활성은 78.8%이었다 (Table 1). 이는 국산 블루베리 착즙액의 약 50%보다 높았다 [6].
- DPPH 소거능 역시 농도 의존적이었다. 잎과 줄기로 구분할 경우 농도 증가에 따른 DPPH 소거능은 잎이 줄기보다 매우 높게 나타났으며 유의성을 나타내었다(t = 9.055, p>0.05).
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