[논문]한우에서 거세에 의한 Testosterone 결핍이 사이토카인의 변화에 미치는 영향 연구

김성범; 조아라; 최창용; 정영훈; 류재규; 김은주; 도윤정

doi:10.7853/kjvs.2017.40.4.227

한우에서 거세에 의한 Testosterone 결핍이 사이토카인의 변화에 미치는 영향 연구
The change aspects between testosterone and cytokines by castration in Hanwoo cattle 원문보기

韓國家畜衛生學會誌 = Korean journal of veterinary service, v.40 no.4, 2017년, pp.227 - 233

김성범 (농촌진흥청 국립축산과학원 가축질병방역팀) , 조아라 (농촌진흥청 국립축산과학원 가축질병방역팀) , 최창용 (농촌진흥청 국립축산과학원 가축질병방역팀) , 정영훈 (농촌진흥청 국립축산과학원 가축질병방역팀) , 류재규 (농촌진흥청 국립축산과학원 가축질병방역팀) , 김은주 (농촌진흥청 국립축산과학원 가축질병방역팀) , 도윤정 (농촌진흥청 국립축산과학원 가축질병방역팀)

Abstract ▼ AI-Helper

The purpose of this study is to determine the changes of cytokines and immune cells in blood in castrated Hanwoo. The cytokine production and the number of immune cells were determined by collecting blood from jugular vein before castration and on 1, 7, and 28 days then after. Results of the hematological test showed that the number of leukocyte tend to increase after castration, and it significantly decreased on day 7 and day 28 (P<0.05). Lymphocytes decreased significantly on day 1 and 7 (P<0.05), and then recovered as in neutrophils on day 28. The levels of serum testosterone, TNF-a, IL-6, and anti-inflammatory IL-10 significantly decreased (P<0.05) after castration. There was also a decrease in IL-2, $IFN-{\gamma}$, and IL-4 but showed no significant difference when compared to intact ones. These results suggest that testosterone-deficiency does not affect the number of immune cells in blood, but has a close relationship with cytokine production.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

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문제 정의

이와 같이 실험동물을 이용한 성호르몬과 면역인 자간의 연관성에 대한 연구는 진행된 바 있으나, 산업동물인 소에서의 거세 전ㆍ후 생체변화 연구는 육질변화 및 사양관리에 대해 집중되어 있다. 기존 보고를 토대로 소에서 역시 거세 후 호르몬 변화에 의해 혈중 면역인자의 수치가 영향을 받을 것으로 기대되며, 이를 확인하기 위하여 본 연구에서는 한우 거세 전ㆍ후 혈중 호르몬 변화와 그에 따른 백혈구 및 사이토카인 변화를 조사하여 비교 분석하였다.
본 연구는 한우에서 외과적 수술로 고환을 제거했을 경우 테스토스테론 결핍에 따른 면역세포의 변화를 알아보기 위해 수행하였다. 사이토카인 생산량과 면역세포수를 거세 전ㆍ후 1일, 7일, 28일째에 경정맥에서 채혈한 혈액을 분석하여 확인하였다.
이와 같이 실험동물을 이용한 성호르몬과 면역인 자간의 연관성에 대한 연구는 진행된 바 있으나, 산업동물인 소에서의 거세 전ㆍ후 생체변화 연구는 육질변화 및 사양관리에 대해 집중되어 있다. 기존 보고를 토대로 소에서 역시 거세 후 호르몬 변화에 의해 혈중 면역인자의 수치가 영향을 받을 것으로 기대되며, 이를 확인하기 위하여 본 연구에서는 한우 거세 전ㆍ후 혈중 호르몬 변화와 그에 따른 백혈구 및 사이토카인 변화를 조사하여 비교 분석하였다.

제안 방법

Th1의 면역반응에 해당하는 사이토카인 IL-2, TNF-α, IFN-γ와 Th2에 해당되는 IL-4, IL-6, IL-10은 거세 전ㆍ후 채혈하여 분리된 혈청으로 분석하였다.
거세 전ㆍ후 테스토스테론과 cortisol 수치을 비교분석하였다(Fig. 1). 혈청 내 테스토스테론은 거세 전 3.
거세 후 테스토스테론 결핍에 따라 Th1/Th2에 의해 생산되는 사이토카인을 비교하였다(Fig. 2). IL-2는 거세 전 37.
본 연구는 한우에서 외과적 수술로 고환을 제거했을 경우 테스토스테론 결핍에 따른 면역세포의 변화를 알아보기 위해 수행하였다. 사이토카인 생산량과 면역세포수를 거세 전ㆍ후 1일, 7일, 28일째에 경정맥에서 채혈한 혈액을 분석하여 확인하였다. 혈액학적 검사에 있어 백혈구수는 거세 전보다 거세 후 1일에서 증가하였지만 유의적인 차이는 없었고, 7일과 28일에서 거세 전보다 유의적으로 감소하였다(P＜0.
본 연구의 시험동물은 국립축산과학원에 보유중인 한우 중 거세 대상축인 8두(평균체중 230 kg, 9개월령)를 공시하였으며, 5가지 주요 전염병(우 결핵, 요네병, 구제역, 브루셀라증, 소 백혈병)에 감염되지 않았다는 것을 확인하였다. 시료채취는 거세수술 전부터 거세수술 후 1일, 7일, 28일까지 경정맥에서 채혈하여 검사 목적에 따라 EDTA처리 및 비처리 채혈 병에 보존하였다. 또한, 연구에 사용된 시험동물의 관리 및 절차에 관해서는 국립축산과학원 동물실험윤리위원회(Wanju, Korea)의 승인(승인번호: 2015-673)을 받아 수행하였다.
한우 8두에 대해 거세 전ㆍ후 시간에 따른 혈중 백혈구, 호중구, 림프구, 단핵구, 호산구수를 분석하였다(Table 1).
혈액학적 분석은 혈액 일반 성분 자동 분석기(IDEXX ProCyte Dx Hematology Analyzer, IDEXXLaboratories, Maine, USA)를 이용하여, 시료채취 당일 1시간 이내에 백혈구(white blood cell), 호중구(NE, neutrophils), 림프구(LY, lymphocytes), 단핵구(MO, monocytes), 호산구(EO, eosinophils)를 분석하였다.
혈청 내 Cortisol, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-γ, TNF-α에 대해 ELISA kits (Cusabio Biotech Co., Ltd, Wuhan, Hubei Province, China)를 사용하였고, 마이크로 플레이트 리더(Spectra Max i3)와 Soft Max Pro6.4.1로 그 결과를 측정 및 분석하였다.

데이터처리

시험에서 얻어진 모든 분석 치는 각 처리구별로 평균±표준오차로 표시하였으며, 거세 전(Be C: before castration)을 대조구로 하여 이에 대한 그룹 간의 유의성 검증 SPSS 통계 프로그램(2012, version 21.0)을 이용하여 P-value가 0.05 미만인 경우 유의성이 있는 것으로 평가하였다.

이론/모형

1로 그 결과를 측정 및 분석하였다. 테스토스테론 분석은 네오딘벳랩(cobas 8000 e601)에 의뢰하여 Electrochemiluminescence 방법으로 분석하였다.

성능/효과

거세 후 7일에 11.00±0.84×103/μL로 나타나 거세 전보다 유의적으로 감소하였으며(P＜0.05), 28일에 12.29±0.93×103/μL로 거세 전보다 유의적으로 감소하지만(P＜0.05), 거세 후 7일 보다는 증가함으로써 거세 전으로 회복되는 경향을 보였다.
그러나 염증 반응과 밀접한 관계를 가지는 TNF-α, IL-6, IL-10에서 대조적인 결과를 확인하였다.
그러나TNF-α, IL-6, IL-10에서 대조적인 결과를 확인하였다.
또한 거세 후 1일, 7일, 28일에 동일하게 사이토카인의 생산량을 측정하였으며, 그 중 TNF-α, IL-6, IL-10이 유의적으로 감소하는(P＜0.05) 것을 확인하였다.
05), 28일 역시 감소하지만 7일 보다 증가하는 양상을 보였다. 림프구수는 거세 전보다 거세 후 1일과 7일에 유의적으로 감소하였고(P＜0.05), 28일에는 거세 전으로 회복되는 양상을 보였다. 혈청 내 테스토스테론은 거세 후 유의적으로 감소한 것을 확인하였다(P＜0.
Cohen 등(1990)이 보고한 바에 의하면 Holstein에서 거세 후 테스토스테론은 3시간 이후 감소하며, Cortisol은 거세 후 6시간에 높아졌다가 다시 감소하는 것으로 나타났다. 본 결과에서도 테스토스테론은 거세 전보다 거세 후 1일부터 유의적으로 감소하였으며(P＜0.05), Cortisol의 경우 거세 전과 거세 후 1일에 비슷한 경향을 보였고, 7일 이후 감소하는 경향을 보였으나 유의적인 차이는 없었다(Fig. 1). 고환을 제거함으로써 테스토스테론 결핍상태는 유지되며, 거세로 인한 cortisol 수치는 시간이 지남에 따라 안정을 찾는 것으로 판단된다.
본 연구의 결과 혈액학적 검사에서 백혈구, 호중구, 림프구 숫자는 거세 수술 이후 28일에서 거세 전으로 회복되는 경향을 보였으며, 테스토스테론을 생산하는 조직의 제거로 인한 호르몬 결핍상태는 회복되지 않는 것으로 나타났다. 염증 반응과 밀접한 관계를 가지는 사이토카인의 감소를 확인하였는데, 혈액학적 검사의 면역세포수와 사이토카인의 생산량을 비교해볼 때 테스토스테론의 결핍 상태가 면역세포수에는 밀접한 영향을 주지 않는 것으로 생각되지만 TNF-α와 IL-6 및 IL-10 생산에는 매우 밀접한 영향을 주는 것으로 생각된다.
본 연구의 시험동물은 국립축산과학원에 보유중인 한우 중 거세 대상축인 8두(평균체중 230 kg, 9개월령)를 공시하였으며, 5가지 주요 전염병(우 결핵, 요네병, 구제역, 브루셀라증, 소 백혈병)에 감염되지 않았다는 것을 확인하였다. 시료채취는 거세수술 전부터 거세수술 후 1일, 7일, 28일까지 경정맥에서 채혈하여 검사 목적에 따라 EDTA처리 및 비처리 채혈 병에 보존하였다.
염증 반응과 밀접한 관계를 가지는 사이토카인의 감소를 확인하였는데, 혈액학적 검사의 면역세포수와 사이토카인의 생산량을 비교해볼 때 테스토스테론의 결핍 상태가 면역세포수에는 밀접한 영향을 주지 않는 것으로 생각되지만 TNF-α와 IL-6 및 IL-10 생산에는 매우 밀접한 영향을 주는 것으로 생각된다.
염증성 질환과 질병 진단에 중요한 지표인 TNF-α (Arend와 Dayer, 1995)와 또 다른 염증성 사이토카인 IL-6, 항염증성 사이토카인 IL-10의 경우 거세 전보다 거세 후 1일과 7일, 28일에서 혈청 내 농도가 유의적인 감소를 보였다(P＜0.05).
05), 28일에는 거세 전으로 회복되는 양상을 보였다. 혈청 내 테스토스테론은 거세 후 유의적으로 감소한 것을 확인하였다(P＜0.05). 또한 거세 후 1일, 7일, 28일에 동일하게 사이토카인의 생산량을 측정하였으며, 그 중 TNF-α, IL-6, IL-10이 유의적으로 감소하는(P＜0.
05). 호중구수는 거세 전보다 거세 후 1일에서 유의적으로 증가하였고(P＜0.05), 7일에는 거세 전보다 유의적으로 감소하였으며(P＜0.05), 28일 역시 감소하지만 7일 보다 증가하는 양상을 보였다. 림프구수는 거세 전보다 거세 후 1일과 7일에 유의적으로 감소하였고(P＜0.

후속연구

IL-2와 IFN-γ 및 IL-4의 경우 거세 전ㆍ후 비교하여 생산량에 있어 유의적인 차이는 보이지 않았다. 이상의 결과로 면역세포수는 거세 후 28일에 회복되는 경향을 보였으므로 테스토스테론의 결핍에 의한 변화로 판단하기 어렵지만, 사이토카인의 생산량은 거세 후 28일에도 회복되지 않아 테스토스테론의 결핍이 사이토카인의 생산량에 매우 밀접한 영향을 주는 것으로 생각되며, 테스토스테론과 사이토카인의 연관성에 대해 추가적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.
염증 반응과 밀접한 관계를 가지는 사이토카인의 감소를 확인하였는데, 혈액학적 검사의 면역세포수와 사이토카인의 생산량을 비교해볼 때 테스토스테론의 결핍 상태가 면역세포수에는 밀접한 영향을 주지 않는 것으로 생각되지만 TNF-α와 IL-6 및 IL-10 생산에는 매우 밀접한 영향을 주는 것으로 생각된다. 하지만 서로 억제작용을 하는 Th1/Th2에 의해 생산되는 사이토카인들이 왜 감소했는지는 앞으로 추가적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	T helper1은 어떤 효소 생산에 관여하는가?	성 호르몬인자가 면역에 미치는 영향으로는 직접적으로 일차 림프 기관(primary lymphoid organs)과 간접적으로 사이토카인(cytokine)을 통해 말초 면역 세포(peripheral immune cells)와 상호 작용하여 면역 시스템의 발달과 조절에 관여하는 것으로써(Cutolo 등, 2004), 서로 다른 사이토카인을 생산하는 T helper1(Th1)과 T helper2 (Th2) 림프구 반응의 균형을 유지한다. 세포(매개)성 면역(Cell-mediated immunity)인 Th1은 interleukin-2 (IL-2), interferon-gamma (IFN-γ) 및 tumor necrosis factor-alpha (TNF-α)의 생산에 주로 관여하며, 체액성 면역(humoral immunity)인 Th2는 interleukin-4 (IL-4), interleukin-6 (IL-6), interleukin-10 (IL-10), 생성에 관여한다(Raphael 등, 2015). In vitro 실험결과에서 테스토스테론은 T 림프구의 Th1과 Th2에 대한 분화에 영향을 미치는 것으로 나타났으며(Piccinni 등, 1995; Gilmore 등, 1997), 마우스를 이용한 in vivo 실험에서는 암컷보다 수컷에서 Th2 관련 사이토카인이 Th1 사이토카인보다 더 많이 생산되는 것으로 나타났다(Cua 등, 1995; Bebo 등, 1997).
	성 호르몬인자가 면역에 미치는 직간접적인 영향은?	성 호르몬인자가 면역에 미치는 영향으로는 직접적으로 일차 림프 기관(primary lymphoid organs)과 간접적으로 사이토카인(cytokine)을 통해 말초 면역 세포(peripheral immune cells)와 상호 작용하여 면역 시스템의 발달과 조절에 관여하는 것으로써(Cutolo 등, 2004), 서로 다른 사이토카인을 생산하는 T helper1(Th1)과 T helper2 (Th2) 림프구 반응의 균형을 유지한다. 세포(매개)성 면역(Cell-mediated immunity)인 Th1은 interleukin-2 (IL-2), interferon-gamma (IFN-γ) 및 tumor necrosis factor-alpha (TNF-α)의 생산에 주로 관여하며, 체액성 면역(humoral immunity)인 Th2는 interleukin-4 (IL-4), interleukin-6 (IL-6), interleukin-10 (IL-10), 생성에 관여한다(Raphael 등, 2015).
	한우 중 거세우의 거세 방법은?	3%)로(APGS, 2017) 쇠고기 생산에 한우 거세우가 상당부분 차지하고 있다. 비육우에서 주로 거세를 실시하며, 방법으로는 고환을 제거하는 외과적 수술 법, 화학적(약물주입) 방법 등이 있고, 외과적 수술(surgical Castration) 또는 화학적 거세(chemical castration)를 통해 테스토스테론(testosterone) 호르몬의 생성을 현저하게 감소시킨다(Cohen 등, 1990). 외과적 수술로 제거하게 되는 고환은 곱슬정세관(seminiferous tubule)과 간질조직(interstitium)으로 나뉘며, 곱슬정세관에서 정자를 생산하고(Ariyaratne 등, 2000; Tae 등, 2016).

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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