[논문]아이스플랜트(Mesembryanthemum crystallinum L.) 발효추출물의 항산화, 항당뇨 및 간 보호효과

남상해; 강승미; 김선정; 고건희

doi:10.5352/jls.2017.27.8.909

아이스플랜트(Mesembryanthemum crystallinum L.) 발효추출물의 항산화, 항당뇨 및 간 보호효과
Effect of Fermented Ice Plant (Mesembryanthemum crystallinum L.) Extracts against Antioxidant, Antidiabetic and Liver Protection 원문보기

생명과학회지 = Journal of life science, v.27 no.8 = no.208, 2017년, pp.909 - 918

남상해 (경남과학기술대학교 식품과학부) , 강승미 ((주)약목푸드) , 김선정 (경남한방약초연구소) , 고건희 (경남한방약초연구소)

초록
AI-Helper

본 연구는 아이스플랜트의 생리활성을 향상시키고, 식생활에서의 활용가능성을 높이기 위하여 물김치 형태로 발효시켰으며, 아이스플랜트의 성분 및 몇 가지 생리활성을 발효 전과 비교하였다. 물김치 침지액의 pH는 발효 6일째까지 계속해서 낮아졌으며, lactic acid의 생성량은 발효 4일째에 가장 많았다. 아이스플랜트 물김치 건더기 중의 D-pinitol은 발효 전 $4.196{\pm}0.096mg/g$에서 6일째에는 $3.843{\pm}0.116mg/g$으로 감소하였다. 그러나 myo-inositol과 D-chiro-inositol은 각각 발효 전 $0.453{\pm}0.022$와 $2.815{\pm}0.008mg/g$에서 6일째에 $0.630{\pm}0.029$와 $4.117{\pm}0.096mg/g$으로 증가하였다. 아이스플랜트 추출물의 DPPH, ABTS radical 소거활성 및 FRAP 활성은 대체로 발효 후에 높게 나타나 유사한 경향이었으며, 1 mg/ml의 농도로 처리하였을 때 각각 발효 5일째($79.09{\pm}0.69%$), 4일째($87.55{\pm}1.21%$) 및 6일째($78.72{\pm}0.99%$)에 가장 높았다. Lipid/MA assay에 의한 항산화 활성도 대체로 발효 후에 높게 나타나 유사한 경향이었으며, 추출물을 $500{\mu}g/ml$ 처리하였을 때, 발효 4일째에 가장 높은 활성($64.65{\pm}1.63%$)을 나타났으며, 발효 5, 6일째에는 낮아지는 경향이었다. 아이스플랜트 추출물의 t-BHP, $H_2O_2$ 및 ethanol에 의하여 손상된 BNL CL.2 세포의 생존율은 각각 $14.19{\pm}0.98$, $13.80{\pm}2.25$ 및 $25.89{\pm}2.90%$이었으나, 추출물을 $200{\mu}g/ml$의 농도로 처리하였을 경우, 각각 발효 6일째에 $50.07{\pm}4.85%$, 2일째에 57.06% 및 4일째에 $66.06{\pm}1.36%$의 세포생존율을 나타내어 간세포가 회복되고 있음을 알 수 있었다. 그러나 발효 후에 간세포 보호효과가 뚜렷이 증가하지는 않았다. ${\alpha}-Glucosidase$ 저해활성은 모든 실험군에서 $83.52{\pm}2.69{\sim}92.79{\pm}2.16%$로 상당히 높게 나타났으며, 발효기간이 경과함에 따라 조금씩 증가하였다. 한편 ${\alpha}-Amylase$ 저해활성은 전체적으로 $52.64{\pm}3.26{\sim}57.56{\pm}1.21%$로 나타났으며 발효 전후에 뚜렷한 차이가 없었다. 이와 같은 결과로 볼 때, 아이스플랜트의 물김치 발효기간은 4~5일이 적정할 것으로 생각되었다. 한편 발효에 의한 기능성은 항산화효과를 제외한 간세포보호 및 ${\alpha}-Glucosidase$, ${\alpha}-Amylase$ 저해활성은 전체적으로 소폭 향상에 그쳤다. 따라서 이러한 결과를 바탕으로 발효 등 다양한 가공방법이 개발되어, 향후 아이스플랜트의 소비촉진의 계기가 되기를 기대한다.

Abstract ▼ AI-Helper

Ice plant (Mesembryanthemum crystallinum L.) was fermented in brine in the form of mulkimchi (IPMB), and its contents of organic acid and cyclitols and biological activities were compared with those before fermentation. The pH of the IPMB continuously decreased until the sixth day of fermentation. The lactic acid yield was greatest on the fourth day. D-pinitol in ice plant mulkimchi solids (IPMS) decreased during fermentation. However, myo-inositol and D-chiro-inositol increased. The radical scavenging activities of ABTS and DPPH, in addition to the activity of FRAP, of the IPMS extract were generally higher after fermentation, with the activities highest on the fifth ($79.09{\pm}0.69%$), fourth ($87.55{\pm}1.21%$), and sixth ($78.72{\pm}0.99%$) days of fermentation, respectively, when treated with 1 mg/ml of the extract. As shown by a lipid/MA assay, antioxidant activity was generally higher after fermentation. The viability of BNL CL.2 cells damaged by t-BHP, $H_2O_2$, and ethanol was $14.19{\pm}0.98$, $13.80{\pm}2.25$, and $25.89{\pm}2.90%$, respectively. When treated with $200{\mu}g/ml$ of IPMS extract, the cell viability was $57.06{\pm}4.52%$ on the first day, and $66.06{\pm}1.36%$ on the fourth day, and $50.07{\pm}04.85%$ on the sixth day of fermentation. Hepatocyte protective effects did not increase significantly after fermentation. ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activity was quite high, with a range of $83.52{\pm}2.69$ to $92.79{\pm}2.16%$, and the activity increased gradually in all the groups over the fermentation period. There was no clear correlation between ${\alpha}-amylase$ inhibitory activity and fermentation.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

그러나 최근 성공적인 재배기술이 개발되어 이를 재배하는 곳이 점차 늘어나고 있는 추세이며, 재배를 희망하는 농가가 많아서 머지않아 생산량도 급격히 증가할 것으로 전망되고 있다. 본 연구는 전보에 이어서 생리 활성을 향상시키고, 식생활에서도 활용가능성을 높이기 위하여 물김치 형태로 발효시켰으며 발효후의 아이스플랜트의 성분 및 몇 가지 생리활성을 발효전과 비교하였다.

가설 설정

1)The values represent the mean ± SD (n=3).

제안 방법

α-Amylase 저해 활성은 Xu 등[30]의 방법을 응용하여 효소 활성을 측정하였다.
α-Glucosidase 저해 활성은 Tibbot과 Skadsen의 방법을 변형하여 수행하였다[28].
2 mg/ml)가 되도록 첨가하여 24시간 동안 배양하였다. 0.4 mM H₂O₂를 처리한 후, 2시간 동안 배양한 다음 이후 MTT assay로 세포생존율을 측정하였다[12]. 세포 생존율은 540 nm 파장에서 흡광도를 측정하고 대조군과 비교하여 백분율(%)로 표시하였다.
1-MP의 분석은 DB-wax capillary column (0.32 mm i.d.×30 m, 0.25 μm film thickness)과 NPD가 장착된 GC (Model 6890, Agilent Technologies)를 사용하였고, 분석조건으로 injector 및 detector의 온도는 모두 250°C, column oven 온도는 60°C에서 4°C/min 으로 하여 160°C까지 상승시킨 후 2분간 더 유지하도록 하였다.
2 mg/ml)가 되도록 처리하고 1시간 후, 300 mM alcohol 100 μl 처리하여 24시간 배양하였다. 5일간 같은 방법으로 간세포에 시료와 alcohol을 처리한 다음 이후 MTT assay로 세포의 생존율을 측정하였다. 세포생존율은 540 nm에서 흡광도를 측정하고 대조군과 비교하여 백분율(%)로 표시하였다.
ABTS (7 mM)와 potassium persulfate (2.45 mM)를 1:1로 혼합한 다음 어두운 실온에서 24시간 넣어두어 ABTS radical (ABTS+ ·)을 만들었다.
ABTS [2,2-azino-bis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid diammonium salt)] cation radical 소거활성은 Re 등의 방법 [27]을 변형하여 측정하였다. ABTS (7 mM)와 potassium persulfate (2.
BNL CL.2 세포에 아이스플랜트 추출물을 농도별로 처리한 후, 24시간 배양한 다음 MTT assay로 세포생존율을 측정한 결과는 Fig. 1과 같았다. 즉 추출물을 처리하지 않은 대조군의 생존율을 100%로 하였을 때, 추출물을 500 μg/ml의 농도로 처리한 군을 제외한 모든 군에서 90% 이상의 생존율을 나타내었다.
Cyclitol 화합물을 추출하기 위하여 아이스플랜트 물김치 건더기 건조분말 1 g에 40 ml의 물과 ethanol의 등량혼합액을 가하고 100℃의 water bath에서 1시간 추출하였다. 이후 4,000 rpm으로 20분간 원심분리하여 cyclitol 화합물이 용출된 상등액을 취하고, 이를 vacuum concentrator (MAXI dry lyo, Heto-Holten, Gydevang, Denmark)로 추출용액을 완전히 제거하였다.
DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) 자유 라디칼 소거 활성은 Heo 등[9]의 방법을 변형하여 실험하였다. 아이스플랜 트 물김치 건더기 건조분말 추출물(이하 추출물)을 농도별 (0.
Ethanol 처리에 따른 산화적 손상에 대한 간세포보호효과를 관찰하기 위하여, BNL CL.2 세포를 5×104 cells/ml가 되도록 24-well plate에 분주하여 20시간 동안 배양하고, 3% FBS를 함유한 DMEM 배지로 교환하여 아이스플랜트 추출물을 최종 농도(0.01, 0.05, 0.1, 0.2 mg/ml)가 되도록 처리하고 1시간 후, 300 mM alcohol 100 μl 처리하여 24시간 배양하였다.
또한 Hanen 등[8]은 Mesembryanthenum속 식물들이 양성대조군 (trolox, ascorbic acid)보다 높은 항산화활성을 나타내었다고 보고하였다. Lipid/MA assay는 불포화지방산이 산화될 때 malonaldehyde가 생성되는 원리를 이용한 측정방법으로서 아이스플랜트 추출물을 농도별로 처리하여 지질을 인위적으로 산화시킨 후 발생하는 malonaldehyde 형성을 억제하는 정도를 BHA와 비교하였다(Table 4). Lipid/MA assay에 의한 항산화 활성은 모든 발효시점의 시료에서 농도가 증가함에 따라 활성도 증가하였고, 대체로 발효 후에 발효 전보다 대체로 높게 나타났다.
t-BHP (tert-butyl hydroperoxide)에 의한 산화적 손상에 대한 간세포보호효과를 관찰하기 위하여, BNL CL.2 세포를 7×104 cells/ml가 되도록 24-well plate에 분주한 뒤 24시간 동안 CO2 incubator (37℃, 5% CO2)에서 배양하고 아이스플랜트 추출물을 최종농도(0.01, 0.05, 0.1, 0.2 mg/ml)가 되도록 세포에 한 시간 전에 처리한 후 t-BHP (최종농도 80 μM)를 첨가하고 24시간 더 배양하였다.
그 후 각각의 screw cap tube에 NMH 30 μl를 가하고 상온에서 1시간 동안 반응시켜 1-MP로 유도체화 하였다.
2 세포를 5×10⁴ cells/ml가 되도록 24-well plate에 분주하여 24시간 동안 CO₂ incubator (37℃, 5% CO₂)에서 예비 배양한 후 배지를 제거하고 PBS (phosphate buffered saline)로 2회 세척한 다음 배지를 교환하였다. 그 후 아이스플랜트 추출물을 최종농도(0.01, 0.05, 0.1, 0.2 mg/ml)가 되도록 첨가하여 24시간 동안 배양하였다. 0.
따라서 아이스플랜트 추출물 200 μg/ml 이하에서는 세포독성이 거의 없음을 인정하여 200 μg/ml이하로 처리농도를 설정하여 실험을 진행하였다.
이후 시료를 건져내어 표면에 묻은 소금기를 증류수로 가볍게 헹구었으며, 각각의 처리구에 끓여서 식힌 10%의 sucrose 용액을 가하여 15±1℃에서 발효함으로서 물김치를 제조하였다. 발효 시작일부터 6일째까지 매일 같은 시각에 침지액의 수소이온농도(pH)를 측정하였으며, 그 즉시 시료를 채취하였다. 즉 물김치 침지액(mulkimchi brine; liquid produced from fermentation)은 따로 채취하였고, 물김치 건더기(mulkimchi solids; solid ingredients produced from fermentation)는 발효 중인 아이스플랜트를 증류수로 가볍게 헹군 후 식품건조기(LD-918TH, LʼEQUIP, Seoul, Korea)로 건조하여 시료로 사용하였다.
본 연구를 위하여 제조한 아이스플랜트 물김치의 발효일수에 맞춰 침지액(mulkimchi brine)과 건더기(mulkimchi solids) 건조분말을 준비하였다. 발효의 진행 정도를 확인하기 위하여 침지액의 수소이온농도(pH)를 측정하였으며, 최적 발효시기를 결정하기 위하여 침지액에 생성된 유기산의 함량을 분석하였다. Table 1에 나타낸 침지액 중의 수소이온 농도는 발효시작일(IPF-0)부터 최종발효일인 6일째(IPF-6)까지 계속 증가하여 발효가 진행되고 있음을 확인할 수 있었다.
세포의 생존율은 Mosmann의 MTT [3-(4,5-dimethylthiazole2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide] 환원 방법을 약간 변형하여 측정하였다[21]. BNL CL.
즉 물김치 침지액(mulkimchi brine; liquid produced from fermentation)은 따로 채취하였고, 물김치 건더기(mulkimchi solids; solid ingredients produced from fermentation)는 발효 중인 아이스플랜트를 증류수로 가볍게 헹군 후 식품건조기(LD-918TH, LʼEQUIP, Seoul, Korea)로 건조하여 시료로 사용하였다. 시료는 소금물에 침지 하지 않은 아이스플랜트를 그대로 건조한 것을 IP, 그리고 발효 일수에 따라 각각 IPF-0, 1, 2, 3, 4, 5, 6이라고 하였으며, 이들의 methanol 추출물을 생리활성효과의 시험에 사용하였다.
DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) 자유 라디칼 소거 활성은 Heo 등[9]의 방법을 변형하여 실험하였다. 아이스플랜 트 물김치 건더기 건조분말 추출물(이하 추출물)을 농도별 (0.03125, 0.0625, 0.125, 0.25, 0.5, 1 mg/ml)로 희석한 다음, 아이스플랜트 추출물 0.2 ml와 사용 직전 만든 0.2 mM DPPH 용액 0.1 ml를 96-well plate에 넣고 혼합한 후, 실온에서 30분 간 반응시켰다. 흡광도는 microplate reader (EL800, BioTek, Winooski, PA, USA)를 사용하여 520 nm에서 측정하였다.
아이스플랜트의 물김치 건더기 추출물의 항산화활성을 알아보기 위하여 DPPH, ABTS 및 FRAP 활성을 측정하였다 (Table 3). 우선 DPPH는 분자 내에 안정한 radical을 가지고 있지만 항산화성 물질과 반응하면 radical이 소거되는 원리를 이용하여 전자공여능을 측정하는 방법으로 주로 phenolic 화합물과 aromatic amine 화합물에 많이 사용된다[20].
1 ml를 96-well plate에 넣고 1분간 정치시킨 후 732 nm에서 흡광도를 측정하였다. 양성대조군으로 BHA를 사용하였으며, 아이스플랜트 추출물에 대한 ABTS radical 소거활성은 아래의 식으로 계산하였으며, 각 실험은 3회 반복하여 평균값으로 나타내었다.
유기산 분석을 위한 시료는 발효기간별로 각각의 물김치 침지액을 0.2 μm membrane filter (SmartPor-Ⅱ Syringe filter, Woongki science, Seoul, Korea)로서 여과하여 사용하였다.
2 μm membrane filter (SmartPor-Ⅱ Syringe filter, Woongki science, Seoul, Korea)로서 여과하여 사용하였다. 유기산 함량은 HPLC (Agilent 1260 series, Agilent Co., Santa Clara, CA, USA)로 분석하였다. Analytical column은 Supelcogel C-610H column (7.
1 N NaOH 50 μl를 가하여 반응을 정지시키고 415 nm에서 흡광도를 측정하였다. 음성대조구는 동량의 증류수로 실험하였으며 양성대조군으로 acarbose를 사용하였다. 효소 활성의 저해 정도는 아래의 식에 의하여 산출하였으며, 각 실험은 3회 반복하여 평균값으로 나타내었다.
이어서 시료에 trimethyl silylimidazole (TMSI) : pyridine mixture (1:1, v/v) 200 μl를 가하고 heating block (70℃, 30 min)에서 유도체화 반응을 한 후, gas chromatograph로서 분석하였다[2].
2 mg/ml)가 되도록 세포에 한 시간 전에 처리한 후 t-BHP (최종농도 80 μM)를 첨가하고 24시간 더 배양하였다. 이후 MTT assay로서 세포의 생존율을 측정하였다[12]. 세포 생존율은 540 nm에서 흡광도를 측정하고 대조군과 비교하여 백분율(%)로 표시하였다.
이후 시료를 건져내어 표면에 묻은 소금기를 증류수로 가볍게 헹구었으며, 각각의 처리구에 끓여서 식힌 10%의 sucrose 용액을 가하여 15±1℃에서 발효함으로서 물김치를 제조하였다.
즉 0.5 M trizma buffer (pH 7.4), 1 M potassium chloride, 1% SDS, 0.01 M ferrous chloride, 0.3% hydrogen peroxide, 30 μl cod liver oil과 농도별(10, 50, 100 및 500 μg/ml)로 희석된 아이스플랜트 추출물을 screw cap tube에 넣고 증류수를 가하여 부피를 5 ml로 정용하였다.
즉 HP-5 capillary column (0.32 mm i.d.×30 m, 0.25 μm film thickness, J&W Scientific, Folsom, CA, USA)과 불꽃이온화검출기(FID)가 장착된 gas chromatograph (Model 6890, Agilent Technologies, Palo Alto, CA, USA)를 사용하였고, injector 및 detector의 온도는 각각 280과 300℃로 설정하였으며, column oven의 온도는 150℃에서 7.5 ℃/min으로 하여 300℃까지 상승시켰다.
이 1-MP는 SPE (solid phase extraction)법으로 분리 정제하였다. 즉 SPE cartridge (MEGA BE-C18, Varian, Harbor, CA, USA)에 ethyl acetate, methanol, 증류수의 순으로 각각 10 ml씩을 서서히 통과시키고 유도체화 된 시료를 가한 후, 증류수 5 ml와 ethyl acetate 10 ml를 통과시켜 반응생성물인 1-MP를 용출하였다. 여기에 내부 표준물질로 20 μl의 2-methyl pyrazine (2-MP)을 가하고 부피를 ethyl acetate로서 10 ml로 정용하였다.
발효 시작일부터 6일째까지 매일 같은 시각에 침지액의 수소이온농도(pH)를 측정하였으며, 그 즉시 시료를 채취하였다. 즉 물김치 침지액(mulkimchi brine; liquid produced from fermentation)은 따로 채취하였고, 물김치 건더기(mulkimchi solids; solid ingredients produced from fermentation)는 발효 중인 아이스플랜트를 증류수로 가볍게 헹군 후 식품건조기(LD-918TH, LʼEQUIP, Seoul, Korea)로 건조하여 시료로 사용하였다. 시료는 소금물에 침지 하지 않은 아이스플랜트를 그대로 건조한 것을 IP, 그리고 발효 일수에 따라 각각 IPF-0, 1, 2, 3, 4, 5, 6이라고 하였으며, 이들의 methanol 추출물을 생리활성효과의 시험에 사용하였다.
분리된 유기산은 UV 210 nm에서 검출하였다. 한편 유기산 표준물질은 농도별로 분석하였으며, 농도 에 따른 peak의 면적으로 표준곡선을 작성하여 각각의 유기산을 정량하는데 적용하였다.

대상 데이터

본 실험에 사용된 흰쥐 정상 간세포(mouse liver normal cell, BNL CL.2)는 한국세포주은행으로부터 구입하였으며, 10 % FBS (fetal bovine serum)와 1% P/S (penicillin-streptomycin)가 첨가된 DMEM (Dulbecco’s modified eagle medium)배 지에 배양하였다.
본 연구를 위하여 제조한 아이스플랜트 물김치의 발효일수에 맞춰 침지액(mulkimchi brine)과 건더기(mulkimchi solids) 건조분말을 준비하였다. 발효의 진행 정도를 확인하기 위하여 침지액의 수소이온농도(pH)를 측정하였으며, 최적 발효시기를 결정하기 위하여 침지액에 생성된 유기산의 함량을 분석하였다.
신선한 아이스플랜트를 송이애농장(Sacheon, Korea)으로 부터 구입하였으며, 각각 500 g에 대하여 10% 소금물 500 ml 을 가하여 10시간 침지하였다. 이후 시료를 건져내어 표면에 묻은 소금기를 증류수로 가볍게 헹구었으며, 각각의 처리구에 끓여서 식힌 10%의 sucrose 용액을 가하여 15±1℃에서 발효함으로서 물김치를 제조하였다.
흡광도는 microplate reader (EL800, BioTek, Winooski, PA, USA)를 사용하여 520 nm에서 측정하였다. 양성대조군으로는 BHA를 사용하였다. 전자공여능은 아래의 식으로 계산하였으며, 각 실험은 3회 반복하여 평균값으로 나타내었다.

데이터처리

5, 1 mg/ml)로 희석된 아이스플랜트 추출물 50 μl를 96-well plate에 혼합한 다음 37℃에서 15분간 반응시키고 590 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조군으로 trolox의 환원력과 비교하였으며, 각 실험은 3회 반복하여 평균값으로 나타내었다.
실험결과는 SPSS (Statistical Package for Social Sciences, SPSS inc, Chicago IL, USA) program Ver. 21.0을 이용하여 일원배치분산분석(one-way ANOVA)을 실시하여 유의성이 있는 경우에 Duncan의 다중범위검정(Duncan's multiple range test)으로 시료 간의 유의차를 검정하였다(p<0.05).

이론/모형

아이스플랜트 추출물의 환원력은 Benzie와 Strain의 방법 [3]에 따라 측정하였다. FRAP 용액은 300 mM acetate buffer (pH 3.
그 후 각각의 screw cap tube에 NMH 30 μl를 가하고 상온에서 1시간 동안 반응시켜 1-MP로 유도체화 하였다. 이 1-MP는 SPE (solid phase extraction)법으로 분리 정제하였다. 즉 SPE cartridge (MEGA BE-C18, Varian, Harbor, CA, USA)에 ethyl acetate, methanol, 증류수의 순으로 각각 10 ml씩을 서서히 통과시키고 유도체화 된 시료를 가한 후, 증류수 5 ml와 ethyl acetate 10 ml를 통과시켜 반응생성물인 1-MP를 용출하였다.

성능/효과

Ethanol을 처리한 세포의 생존율은 25.89±2.90%로서 처리하지 않은 정상세포에 비해 현저히 낮았으나, 아이스플랜트 추출물을 처리한 모든 실험군에서 농도에 비례하여 세포생존율이 다소 증가하였다.
FRAP assay는 대부분의 항산화제가 환원력을 가지고 있다는 점에 착안하여 고안된 방법이다[14]. FRAP assay에 의한 항산화활성도 DPPH, ABTS radical 소거활성과 유사한 경향을 나타내었으나, 발효 6일째에 최대 활성을 나타내었다. 또한 Hanen 등[8]은 Mesembryanthenum속 식물들이 양성대조군 (trolox, ascorbic acid)보다 높은 항산화활성을 나타내었다고 보고하였다.
Lipid/MA assay는 불포화지방산이 산화될 때 malonaldehyde가 생성되는 원리를 이용한 측정방법으로서 아이스플랜트 추출물을 농도별로 처리하여 지질을 인위적으로 산화시킨 후 발생하는 malonaldehyde 형성을 억제하는 정도를 BHA와 비교하였다(Table 4). Lipid/MA assay에 의한 항산화 활성은 모든 발효시점의 시료에서 농도가 증가함에 따라 활성도 증가하였고, 대체로 발효 후에 발효 전보다 대체로 높게 나타났다. 그러나 각각의 추출물을 500 μg/ml 처리하였을 때, 발효 4일째에 가장 높은 활성(64.
발효의 진행 정도를 확인하기 위하여 침지액의 수소이온농도(pH)를 측정하였으며, 최적 발효시기를 결정하기 위하여 침지액에 생성된 유기산의 함량을 분석하였다. Table 1에 나타낸 침지액 중의 수소이온 농도는 발효시작일(IPF-0)부터 최종발효일인 6일째(IPF-6)까지 계속 증가하여 발효가 진행되고 있음을 확인할 수 있었다. 또한 발효기간 중 생성된 유기산은 oxalic acid, malic acid 및 ascorbic acid는 3일째에 가장 생성량이 많았으나, lactic acid는 4일째 에, citric acid는 2일째에 가장 많이 생성되었다.
t-BHP를 처리한 세포의 생존율은 14.19±0.98%로서 처리하지 않은 정상세포의 99.87±0.47%에 비해 현저히 낮았으나, 아이스플랜트 추출물을 처리한 모든 실험군에서 농도에 비례하여 세포생존율이 증가하였다.
그러나 각각의 추출물을 500 μg/ml 처리하였을 때, 발효 4일째에 가장 높은 활성(64.65±1.63%)을 나타내었으며, 발효 5, 6일째에는 각각 59.79±2.05와 60.60±3.92%로 서 조금 낮아지는 경향을 나타내었다.
우선 DPPH는 분자 내에 안정한 radical을 가지고 있지만 항산화성 물질과 반응하면 radical이 소거되는 원리를 이용하여 전자공여능을 측정하는 방법으로 주로 phenolic 화합물과 aromatic amine 화합물에 많이 사용된다[20]. 아이스 플랜트 추출물의 농도에 따른 DPPH radical 소거능은 모든 시료에서 농도가 증가함에 따라 상승하였다. 그리고 1 mg/ml의 농도로 처리하였을 때, 발효하지 않은 아이스플랜트의 활성(58.
ABTS radical 소거 활성은 ABTS radical (ABTS+ )이 항산화 물질에 의해 소거되는 정도를 측정하는 방법이다[27]. 아이스플랜트 추출물의 농도에 따른 ABTS radical 소거능도 모든 발효시점에서 농도가 증가함에 따라 상승하였다. 그리고 1 mg/ml의 농도로 처리하였을 때, 발효 전의 활성(64.
이는 D-pinitol에 결합되어 있는 methyl기가 발효가 진행됨에 따라 가수분해되어 주로 D-chiro-inositol로, 일부는 myo-inositol로 전환된 것으로 이해하였다. 이와 같은 결과들을 미루어 볼 때, 아이스플랜트 물김치의 발효는 최소한 3일 이상은 진행되어야 할 것으로 생각되었다. 그러나 발효 4일 이후에는 자극적인 신맛이 생겨나기 때문에 기호에 따라서 적절히 발효일수를 조절하여야 할 것으로 생각되었다.
Lee 등[17]도 오이 발효 음료가 간 조직의 ALDH 활성과 항산화 방어계를 향상시킴으로서 알코올로 인한 간 독성을 보호할 수 있을 것이라고 보고 한 바가 있다. 이와 같이 많은 연구들에서 발효 후에 간 보호효과가 증가된다고 보고하고 있으나, 본 실험에서는 발효 후에 간세포의 보호효과가 크게 증가하지는 않는 것으로 나타났다
즉 추출물을 처리하지 않은 대조군의 생존율을 100%로 하였을 때, 추출물을 500 μg/ml의 농도로 처리한 군을 제외한 모든 군에서 90% 이상의 생존율을 나타내었다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	본 연구에서 아이스플랜트 물김치의 제조방법은 무엇인가?	신선한 아이스플랜트를 송이애농장(Sacheon, Korea)으로 부터 구입하였으며, 각각 500 g에 대하여 10% 소금물 500 ml 을 가하여 10시간 침지하였다. 이후 시료를 건져내어 표면에 묻은 소금기를 증류수로 가볍게 헹구었으며, 각각의 처리구에 끓여서 식힌 10%의 sucrose 용액을 가하여 15±1℃에서 발효함으로서 물김치를 제조하였다. 발효 시작일부터 6일째까지 매일 같은 시각에 침지액의 수소이온농도(pH)를 측정하였으며, 그 즉시 시료를 채취하였다.
	아이스플랜트란?	아이스플랜트(Mesembryanthemum crystallinum L.)는 번행 초과(Aizoaceae)의 1년생 초목이다. 초장이 10~50 cm 정도로 자라는 포복성 식물로서 간과 신장의 질병치료에 이용되고 항산화 능력을 가지고 있으며, 성인병 예방에 탁월한 기능성 식물로 알려져 있다[1].
	블러더 세포가 당뇨병 환자에게 적합한 이유는 무엇인가?	발아율이 낮고 성장속도가 느린 다육 식물로 남아프리카 나미브 사막이 원산지이며, 아프리카와 오스트레일리아 남서부, 아메리카의 서쪽 건조지역에 주로 분포하고 있으며, 줄기와 잎에 블러더 세포(bladder cell)이라고 하는 얼음결정과 같은 모양이 있어 아이스플랜트(ice plant)라고 알려져 있다. 블러더 세포에는 cyclitol류의 화합물과 β-carotene과 각종 미네랄을 함유하고 있으며, 특히 혈당치를 낮추는 pinitol과 중성지방을 억제하는 myo-inositol을 함유하고 있으므로 당뇨병 환자에 적합한 힐링푸드로 알려져 있다[19]. 국내에서의 아이스플랜트에 대한 연구는 대부분이 재배기술에 대한 연구가 대부분이며, Kang 등[11]의 일반성분 및 이노시톨류 화합물의 분석과 항산화 및 항당뇨 효과를 보고한 것을 제외하고는 거의 없다.

참고문헌 (30)

Agarie, S., Kawaguchi, A., Kodera, A., Sunagawa, H., Kojima, H., Nose A. and Nakahara, T. 2009. Potential of the common ice plant, Mesembryanthemum crystallinum as a new high-functional food as evaluated by polyol accumulation. Plant Prod. Sci. 12, 37-46.

상세보기
Ahn, C. H. and Park, P. B. 2009. Increase of the D-chiro-inositol and D-pinitol contents by abiotic stress in the buckwheat seedlings. J. Life Sci. 19, 1456-1462.

원문보기 상세보기
Benzie, I. F. F. and Strain, J. J. 1996. The ferric reducing ability of plasma (FRAP) as a measure of "antioxidant power": the FRAP assay. Anal. Biochem. 239, 70-76.

상세보기
Cho, E. K., Cho, H. E. and Choi, Y. J. 2010. Inhibitory effects of angiotensin converting enzyme and ${\alpha}$ -glucosidase, and alcohol metabolizing activity of fermented omija (Schizandra chinensis B.) beverage. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 39, 655-661.

원문보기 상세보기
Cho, E. K. and Choi, Y. J. 2013. Antioxidant, antidiabetic, and anti-inflammatory effects of extracts and fractions from Parthenocissus tricuspidata stems. J. Life Sci. 23, 399-405.

원문보기 상세보기
Choi, J. H., Kim, M. S., Yu, H. J., Kim, K. H., Lee, H. S., Cho, H. Y. and Lee, S. H. 2014. Hepatoprotective effects of lactic acid-fermented garlic extracts on fatty liver-induced mouse by alcohol. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 43, 1642-1647.

원문보기 상세보기
Doh, E. S., Chang, J. P., Kil, K. J., Choi, M. S., Yang, J. K., Yun, C. W., Jeong, S. M., Jung, Y. H. and Lee, G. H. 2011. Antioxidative activity and cytotoxicity of fermented Allium victorialis L. extract. Kor. J. Plant Res. 24, 30-39.

원문보기 상세보기
Hanen, F., Riadh, K., Samia, O., Sylvain, G., Christian, M. and Chedly, A. 2009. Interspecific variability of antioxidant activities and phenolic composition in Mesembryanthemum genus. Food Chem. Toxicol. 47, 2308-2313.

상세보기
Heo, J. C., Lee, D. Y., Son, M. S., Yun, C. Y., Hwang, J. S., Kang, S. W., Kim, T. H. and Lee, S. H. 2008. Effects of mole crickets (Gryllotalpa orientalis) extracts on anti-oxidant and anti-inflammatory activities. J. Life Sci. 18, 509-514.

원문보기 상세보기
Jung, L. S., Yoon, W. B., Park, S. J., Park, D. S. and An, J. H. 2012. Evaluation of physicochemical properties and biological activities of steamed and fermented Deodeok (Codonopsis lanceolata). Kor. J. Food Sci. Technol. 44, 135-139.

원문보기 상세보기
Kang, S. M., Kim, S. J., Ha, S. H., Lee, C. R. and Nam, S, H. 2016. Biochemical components and physiological activities of Ice Plant (Mesembryanthemum crystallinum). J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 45, 1732-1739.

원문보기 상세보기
Kim ,S. J., Kang, S. M., Ko, K. H. and Nam, S. H. 2017. Antioxidant activity and protective effects of Cirsium japonicum against damaged mouse liver cell (BNL CL.2). J. Life Sci. 27, 442-449.

원문보기 상세보기
Ko, K. H. and Nam, S. H. 2012. Antioxidant activities of volatile aroma components from Cudrania tricuspidata (Carr.) Bureau extracts. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 41, 1493-1501.

원문보기 상세보기
Kwak, J. H., Choi, G. N., Park, J. H., Kim, J. H., Jeong, H. R., Jeong, C. H. and Heo, H. J. 2010. Antioxidant and neuronal cell protective effect of purple sweet potato extract. J. Agric. Life Sci. 44, 57-66.
Larner, J. 1994. Multiple pathways in insulin signalling-fitting the covalent and allosteric puzzle pieces together. Endocrine J. 2, 167-171.
Larner, J. 2001. D-chiro-Inositol in insulin action and insulin resistance-Old-fashioned biochemistry still at work. IUBMB Life 51, 139-148.

상세보기
Lee, H. I., Seo, K. I., Lee, J., Lee, J. S., Hong, S. M., Lee, J. H., Kim, M. J. and Lee, M. K. 2011. Effect of fermented cucumber beverage on ethanol metabolism and antioxidant activity in ethanol-treated rats. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 40, 1099-1106.

원문보기 상세보기
Lee, K. G. and Shibamoto, T. 2001. Antioxidant property of aroma extract isolated from clove buds [Syzygium aromaticum (L.) Merr. et Perry]. Food Chem. 74, 443-448.

상세보기
Lee, S. Y., Choi, H. D., Yu, S. N., Kim, S. H., Park, S. K. and Ahn, S, C. 2015. Biological activities of Mesembryanthemum crystallinum (ice plant) extract. J. Life Sci. 25, 638-645.

원문보기 상세보기
Molyneux, P. 2004. The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity. Songklanakarin J. Sci. Technol. 26, 211-219.
Mosmann, T. 1983. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxic assay. J. Immunol. Methods 65, 55-63.

상세보기
Nam, S. H., Jang, H. W. and Shibamoto, T. 2012. Antioxidant activities of extracts from teas prepared from medicinal plants, Morus alba L., Camellia sinensis L., and Cudrania tricuspidata, and their volatile components. J. Agric. Food Chem. 60, 9097-9105.

상세보기
Oh, S., Hong, S. S., Kim, Y. H. and Koh, S. C. 2008. Screening of biological activities in fern plants native to Jeju Island. Kor. J. Plant Res. 21, 12-18.
Park, S. J., Song, S. W., D. H. Seong, Park, D. S., Kim, S. S., Gou, J. Y., Ahn, J. H., Yoon, W. B. and Lee, H. Y. 2009. Biological activities in the extract of fermented Codonopsis lanceolata. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 38, 983-988.

원문보기 상세보기
Park, W. S. 2010. Effect of Artemisiae Argi folium fermented with Lactobacillus Pentosus on viability of human hepatocyte treated with toxicants. Kor. J. Orient. Physiol. Pathol. 24, 457-462.
Shon, M. Y. 2007. Antioxidant and anticancer activities of Poria cocos and Machilus thunbergii fermented with mycelial mushrooms. Food Industry Nutr. 12, 51-57.
Re, R., Pellegrini, N., Proteggente, A., Pannala, A., Yang, M. and Rice-Evans, C. 1999. Antioxidant activity applying an improved ABTS cation radical decolorization assay. Free Radic. Biol. Med. 26, 1231-1237.

상세보기
Tibbot, B. K. and Skadsen, R. W. 1996. Molecular cloning and characterization of a gibberellin-inducible, putative ${\alpha}$ -glucosidase gene from barley. Plant Mol. Biol. 30, 229-241.

상세보기
Yu, K. H., Lee, S. Y., Yang, H. M., Ham, Y. A., Lee, S. U., Chae, S. W. and Lee, Y. J. 2015. Effect of fermented water extracts from Ligularia fischeri on hepatotoxicity induced by D-galactosamine in rats. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 44, 1422-1430.

원문보기 상세보기
Xu, M. L., Wang, L., Xu, G. F. and Wang, M. H. 2011. Anti-diabetes and angiotensin converting enzyme inhibitory activity of Sonchus asper (L) hill extract. Kor. J. Pharmacogn. 42, 61-67.

LOADING...

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증