본 연구에서는 쇠비름의 활용가치를 높이고 기능성 소재로서의 이용 가능성을 타진하기 위해 쇠비름 물 및 에탄올 추출물의 항산화와 항염증 활성을 탐색하였다. DPPH 라디칼 소거능과 FRAP을 이용한 총 항산화 효능 평가 결과 에탄올 추출물이 물 추출물보다 항산화 활성이 우수한 것을 확인하였고, ABTS 라디칼 소거능은 $1,000{\mu}g/mL$의 농도에서만 쇠비름 물 추출물의 활성이 더 높았다. 한편, 세포독성을 살펴보기 위하여 쇠비름 물 및 에탄올 추출물을 이용해 대식세포에 MTT assay를 수행한 결과, $4,000{\mu}g/mL$의 이하 농도까지는 세포의 생존율에 영향을 미치지 않는 것을 확인하였다. $1.0{\mu}g/mL$ LPS로 염증반응을 유도시킨 세포에 대해 쇠비름 물 추출물에 비해 에탄올 추출물이 더 효과적으로 농도의존적인 NO와 ROS 생성 억제 효과가 있었다. 추가적으로 세포의 항염증 효능의 지표 단백질로 알려진 TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6의 발현을 확인하였을 때 LPS 단독 처리군 대비 쇠비름 에탄올 추출물에서 3가지 단백질 모두의 발현양이 감소하는 것을 확인하였다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 쇠비름 에탄올 추출물은 물 추출물에 비해 높은 항산화와 항염증 활성을 가지는 것으로 확인되었으며, 추후 쇠비름의 유효성분 추출을 통한 항염증 물질의 연구와 염증 억제 성분의 분리 및 그 작용기전 연구에 기초 자료가 될 것으로 사료된다.
본 연구에서는 쇠비름의 활용가치를 높이고 기능성 소재로서의 이용 가능성을 타진하기 위해 쇠비름 물 및 에탄올 추출물의 항산화와 항염증 활성을 탐색하였다. DPPH 라디칼 소거능과 FRAP을 이용한 총 항산화 효능 평가 결과 에탄올 추출물이 물 추출물보다 항산화 활성이 우수한 것을 확인하였고, ABTS 라디칼 소거능은 $1,000{\mu}g/mL$의 농도에서만 쇠비름 물 추출물의 활성이 더 높았다. 한편, 세포독성을 살펴보기 위하여 쇠비름 물 및 에탄올 추출물을 이용해 대식세포에 MTT assay를 수행한 결과, $4,000{\mu}g/mL$의 이하 농도까지는 세포의 생존율에 영향을 미치지 않는 것을 확인하였다. $1.0{\mu}g/mL$ LPS로 염증반응을 유도시킨 세포에 대해 쇠비름 물 추출물에 비해 에탄올 추출물이 더 효과적으로 농도의존적인 NO와 ROS 생성 억제 효과가 있었다. 추가적으로 세포의 항염증 효능의 지표 단백질로 알려진 TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6의 발현을 확인하였을 때 LPS 단독 처리군 대비 쇠비름 에탄올 추출물에서 3가지 단백질 모두의 발현양이 감소하는 것을 확인하였다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 쇠비름 에탄올 추출물은 물 추출물에 비해 높은 항산화와 항염증 활성을 가지는 것으로 확인되었으며, 추후 쇠비름의 유효성분 추출을 통한 항염증 물질의 연구와 염증 억제 성분의 분리 및 그 작용기전 연구에 기초 자료가 될 것으로 사료된다.
Portulaca oleracea L., a species of Portulacaceae, is ubiquitous. It is a well-known traditional Chinese medicine for removing heat, counteracting toxicity, cooling blood, and maintaining hemostasia; it is also used as antidysentery agent. This study investigated the anti-oxidative and anti-inflamma...
Portulaca oleracea L., a species of Portulacaceae, is ubiquitous. It is a well-known traditional Chinese medicine for removing heat, counteracting toxicity, cooling blood, and maintaining hemostasia; it is also used as antidysentery agent. This study investigated the anti-oxidative and anti-inflammatory activities of water and ethanol extracts from P. oleracea. The total polyphenol content ($21.08{\pm}0.03mg\;GAE/g$) and total flavonoid content ($5.45{\pm}0.76mg\;QE/g$) of the ethanolic extracts were higher than those of the water extracts. The antioxidative activities were determined by evaluating the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and the 2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) (ABTS) radical scavenging activity and by the ferric reducing antioxidant potential (FRAP) assay. The ABTS radical scavenging activity of the water extract (75.53%) was higher in those of the water extract (67.03%) at concentration of $1,000{\mu}g/mL$. The DPPH radical scavenging activity and FRAP of the ethanol extract were higher than those of the water extract. We also investigated the anti-inflammatory activity of the P. oleracea extracts in LPS-stimulated Raw 264.7 cells. The production levels of nitric oxide (NO) and reactive oxygen species (ROS) significantly decreased with an increasing concentration of the extract. The expression levels of pro-inflammatory cytokines (tumor necrosis faction (TNF)-${\alpha}$, interleukin (IL)-$1{\beta}$, and IL-6) were significantly lower in the ethanol extract than in the LPS alone treatment group. Based on these results, ethanolic extract from P. oleracea could be an effective antioxidant and anti-inflammatory agent.
Portulaca oleracea L., a species of Portulacaceae, is ubiquitous. It is a well-known traditional Chinese medicine for removing heat, counteracting toxicity, cooling blood, and maintaining hemostasia; it is also used as antidysentery agent. This study investigated the anti-oxidative and anti-inflammatory activities of water and ethanol extracts from P. oleracea. The total polyphenol content ($21.08{\pm}0.03mg\;GAE/g$) and total flavonoid content ($5.45{\pm}0.76mg\;QE/g$) of the ethanolic extracts were higher than those of the water extracts. The antioxidative activities were determined by evaluating the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and the 2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) (ABTS) radical scavenging activity and by the ferric reducing antioxidant potential (FRAP) assay. The ABTS radical scavenging activity of the water extract (75.53%) was higher in those of the water extract (67.03%) at concentration of $1,000{\mu}g/mL$. The DPPH radical scavenging activity and FRAP of the ethanol extract were higher than those of the water extract. We also investigated the anti-inflammatory activity of the P. oleracea extracts in LPS-stimulated Raw 264.7 cells. The production levels of nitric oxide (NO) and reactive oxygen species (ROS) significantly decreased with an increasing concentration of the extract. The expression levels of pro-inflammatory cytokines (tumor necrosis faction (TNF)-${\alpha}$, interleukin (IL)-$1{\beta}$, and IL-6) were significantly lower in the ethanol extract than in the LPS alone treatment group. Based on these results, ethanolic extract from P. oleracea could be an effective antioxidant and anti-inflammatory agent.
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문제 정의
본 연구에서는 쇠비름의 활용가치를 높이고 기능성 소재로서의 이용 가능성을 타진하기 위해 쇠비름 물 및 에탄올 추출물의 항산화와 항염증 활성을 탐색하였다. DPPH 라디칼 소거능과 FRAP을 이용한 총 항산화 효능 평가 결과에탄올 추출물이 물 추출물보다 항산화 활성이 우수한 것을 확인하였고, ABTS 라디칼 소거능은 1,000 μg/mL의 농도에서만 쇠비름 물 추출물의 활성이 더 높았다.
본 연구에서는 천연물 유래 항산화 및 항염증 소재 탐색을 위한 기초 연구의 일환으로 국내산 쇠비름 물 추출물과 에탄올 추출물을 제조하여 그 활성을 비교 분석 하였다.
가설 설정
1)Total polyphenol and flavonoid contents are expressed as gallic acid equivalents (GAE) and quercetin equivalent (QE), respectively.
제안 방법
1,000 μg/mL농도의 쇠비름 물과 에탄올 추출액 1 mL에 Foline-Ciocalteau 시약(Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, USA) 및 10% NaCO3 용액(Daejung, Siheung, Korea)을 각 1 mL씩 차례로 가한 다음 실온에서 1시간 정치한 후 분광광도계(Libra S 35, Biochrom, Cambridge, England)로 760 nm에서 흡광도를 측정하였다.
Ferric reducing antioxidant power(FRAP) 측정은 Kim 등(28)의 방법을 사용하였다. 300 mM acetate buffer(pH 3.6),40 mM HCl에 용해한 10 mM 2,4,6-tripyridyl-s-triazine 및 20 mM FeCl3․6H2O를 각각 10:1:1(v/v/v)의 비율로 혼합하여 FRAP 시약을 제조하였다. 이어서 농도별 시료액 0.
3회 세척한 후 Streptavidin-HRPsolution(Invitrogen Corp., Carlsbad, CA, USA)을 well당 100μL씩 분주하여 30분간 반응시키고, 3회 세척 후 마지막으로TMB substrate solution을 각 well당 100 μL씩 분주하여 실온암소에서 반응시켰다.
Lysis buffer 100 μL를 첨가하여 혼합한 후 fluorescence microplate reader를 이용하여 excitation 485nm, emission 535 nm에서 형광을 측정하여 LPS 단독 처리 군에 대한 상대적인 ROS 생성 억제율을 비교하여 나타내었다.
RAW 264.7 세포에 LPS를 처리하여 산화적 스트레스를 유발시킨 후 쇠비름 추출물들에 의한 ROS 생성 억제를 확인하였다. 쇠비름 추출물들에 의한 ROS 억제 활성은 세포 내에서 증가된 ROS가 DCF-DA와 반응하면 녹색형광으로 관찰되는 원리를 이용하였다(26).
RAW 264.7 세포에 LPS를 처리한 후, 쇠비름의 물과 에탄올 추출물을 500, 1,000, 2,000과 4,000 μg/mL 농도로 처리하고 mouse ELISA kit를 이용하여 염증성 cytokines의 생성량을 정량하였다.
마우스 대식세포주인 RAW 264.7세포를 5×105 cell/well의 농도로 24-well plate에 분주하여 24시간 배양한 후 각각의 추출물을 농도별로 처리하였다.
쇠비름 추출물 제조를 위하여 건조 시료 200 g에 물 및 발효주정을 각각 4 L씩 가한 후 충분히 교반하였다. 물 추출물은 70℃에서 5시간 추출 후 여과한 여액을 모아 동결건조하였고, 에탄올 추출물은 상온에서 24시간 정치, 추출한 다음 여과한 여액을 모아 회전식진공농축기(N-1200AVW, EYELA, Tokyo, Japan)로 완전 건조한 것을 일정농도로 만들어 실험에 사용하였다.
7 세포는 한국세포주은행(KCLB, Korea)에서 분양받았으며, 세포 배양을 위해 10% fetal bovine serum(FBS, Hyclone, Loran, UT, USA)과 1%penicillin-streptomycin을 포함하는 Dulbecco's Modified Eagle's Medium(DMEM) 배지를 사용하였다. 세포는 CO2 incubator(37℃, 5% CO2)에서 배양하였으며 추출물의 세포에 대한 독성 측정은 3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT, Gibco, Waltham, MA,USA) 환원방법을 이용하여 측정하였다. 세포를 96-well plate에 well당 5×104개가 되도록 분주하고 24시간 부착시킨 후, 추출물들을 각기 일정한 농도로 희석하여 세포에 처리한 다음 30분 후 1 μg/mL 농도의 lipopolysaccharide(LPS, Sigma-Aldrich Co.
쇠비름 물과 에탄올 추출물의 염증성 cytokines 억제 효과 또한 에탄올 추출물이 더 높은지 실험을 통해 확인하였다(Fig. 4). RAW 264.
)은 경남 산청군 인근 농가에서 재배, 세척 후 자연 건조된 것을 산청기능성콩영농조합법인으로 부터 제공받아 사용하였다. 쇠비름 추출물 제조를 위하여 건조 시료 200 g에 물 및 발효주정을 각각 4 L씩 가한 후 충분히 교반하였다. 물 추출물은 70℃에서 5시간 추출 후 여과한 여액을 모아 동결건조하였고, 에탄올 추출물은 상온에서 24시간 정치, 추출한 다음 여과한 여액을 모아 회전식진공농축기(N-1200AVW, EYELA, Tokyo, Japan)로 완전 건조한 것을 일정농도로 만들어 실험에 사용하였다.
이 후 세포 상등액을 회수하여 TNF-α,IL-1β 및 IL-6의 사이토카인 측정에 사용하였으며 측정방법은 다음과 같다.
)를 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 이후 시료를 포함하는 배지를 제거한 후 serum-free 배지와 5 mg/mL 농도의 MTT 용액을 첨가하여 37℃에서 2시간 더 배양한 다음 DMSO를 분주하여 sonication하고 10분간 교반한 뒤 570 nm에서 흡광도를 측정해 세포생존율을 구하였다. 세포생존율은 무처리군에 대한 백분율로 나타내었다.
추출물의 intracellular ROS 측정은 intracellular ROS assay kit(Cell Biolabs, INC, San Diego, CA, USA)를 이용하여 측정하였다. 96-well black plate에 5×104 cell/well의 RAW 264.
Louis, MO, USA) 및 10% NaCO3 용액(Daejung, Siheung, Korea)을 각 1 mL씩 차례로 가한 다음 실온에서 1시간 정치한 후 분광광도계(Libra S 35, Biochrom, Cambridge, England)로 760 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질로 gallic acid(Sigma-Aldrich Co.)를 사용하여 시료와 동일한 방법으로 분석하여 얻은 검량선으로 부터 총 페놀 화합물의 함량을 계산한 후 gallic acid equivalent (mg/g)로 표현하였다.
회수한 세포 배양 상등액을 원심분리(1,000 rpm, 10 min, 4℃) 한 다음, 50 μL를 취해 sulfanilamide solution 50 μL와 혼합하여 5분간 빛을 차단하고 반응시킨 후 NED solution 50 μL와 혼합하여 상온에서 10분간 반응시켜, ELISA reader(Epoch, Bioteck, Winooski,VT, Germany)를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였고, LPS 단독처리세포군에 대한 상대적인 생성율로 나타내었다.
대상 데이터
2,2-Azinobis-3-ethylbenzo-thiazoline-6-sulphonate(ABTS) 라디칼 소거활성은 7 mM의 ABTS 용액에 potassiumpersulfate(Sigma-Aldrich Co.)를 2.4 mM이 되도록 용해시킨 다음 암실에서 12-16시간 동안 반응시킨 후 415 nm에서 흡광도가 1.5가 되도록 증류수로 조정한 ABTS 용액을 사용하였다. ABTS 용액 150 μL에 시료액 50 μL를 혼합하고 실온에서 반응시킨 다음 분광광도계를 이용하여 415 nm에서 흡광도를 측정하였다(27).
실험 재료 및 추출 본 실험에 사용된 쇠비름(Portulaca oleracea L.)은 경남 산청군 인근 농가에서 재배, 세척 후 자연 건조된 것을 산청기능성콩영농조합법인으로 부터 제공받아 사용하였다. 쇠비름 추출물 제조를 위하여 건조 시료 200 g에 물 및 발효주정을 각각 4 L씩 가한 후 충분히 교반하였다.
실험에 사용된 RAW 264.7 세포는 한국세포주은행(KCLB, Korea)에서 분양받았으며, 세포 배양을 위해 10% fetal bovine serum(FBS, Hyclone, Loran, UT, USA)과 1%penicillin-streptomycin을 포함하는 Dulbecco's Modified Eagle's Medium(DMEM) 배지를 사용하였다.
데이터처리
2)a-cMeans with different superscripts within the same row are significantly different by Duncan's multiple range test (p<0.05).
Statistically significant value was calculated by compared with control group (LPS alone) by Student's t-test (*, p<0.05; **, p<0.01; ***, p<0.001).
Statistically significant value was calculated by compared with control group by Student's t-test (**,p<0.01; ***, p<0.001 ).
Statistically significant value was calculated by compared with control group by Student's t-test (*, p<0.05; **, p<0.01).
결과는 실험군당 평균±표준편차로 표시하였고, 통계적 유의성 검정은 일원배치 분산분석(one-way analysis of variance)을 한 후 p<0.05 수준에서 Student's t-test 및 Duncan's multiple range test를 시행하였다.
모든 실험은 3회 이상 반복 실시하였으며 실험으로부터 얻은 결과는 IBM SPSS Statistics 18(IBM, Armonk, NY,USA)을 사용하여 분석하였다. 결과는 실험군당 평균±표준편차로 표시하였고, 통계적 유의성 검정은 일원배치 분산분석(one-way analysis of variance)을 한 후 p<0.
이론/모형
7 cells were pre-treated with LPS for 30 min, it were treated with the indicated concentrations (0, 500, 1,000, 2,000, and 4,000 μg/mL) of extracts for 24 h. Cell viability was evaluated using a colorimetric assay based on MTT assay. Data represent the mean±SD of three independent experiments.
Ferric reducing antioxidant power(FRAP) 측정은 Kim 등(28)의 방법을 사용하였다. 300 mM acetate buffer(pH 3.
산화반응 촉매제로 작용하는 금속이온을 환원시키는 효력을 측정하는 방법 중 하나인 FRAP 법을 이용하여 쇠비름 추출물들의 환원력을 측정하였다. 쇠비름 물 추출물의 경우, 26.
총 페놀 화합물 함량 측정 총 페놀 화합물의 함량은 Foiln-Denis 방법(24)을 이용하여 정량하였다. 1,000 μg/mL농도의 쇠비름 물과 에탄올 추출액 1 mL에 Foline-Ciocalteau 시약(Sigma-Aldrich Co.
총 플라보노이드 함량은 Moreno 등(25)의 방법을 이용하여 측정하였다. 각각의 농도의 물과 에탄올 추출물에 10% aluminium nitrate 0.
성능/효과
1.0 μg/mL LPS로 염증반응을 유도시킨 세포에 대해 쇠비름 물 추출물에 비해 에탄올 추출물이 더 효과적으로 농도의존적인 NO와 ROS 생성 억제 효과가 있었다.
ABTS 라디칼 소거활성 측정 결과,250-1,000 μg/mL의 농도 범위에서 물 추출물은 21.07-75.53%, 에탄올 추출물은 23.11-67.03%의 범위였는데, 250 μg/mL 농도에서는 에탄올 추출물이 물 추출물에 비해 유의적으로 활성이 높았으나 1,000 μg/mL 농도에서는 물 추출물의 활성이 유의적으로 더 높았다.
DPPH 라디칼 소거능과 FRAP을 이용한 총 항산화 효능 평가 결과에탄올 추출물이 물 추출물보다 항산화 활성이 우수한 것을 확인하였고, ABTS 라디칼 소거능은 1,000 μg/mL의 농도에서만 쇠비름 물 추출물의 활성이 더 높았다.
DPPH 라디칼 소거활성을 250-1,000 μg/mL의 농도 범위에서 측정한 결과, 에탄올 추출물은 18.83-27.85%, 물 추출물은 6.86-24.63%의 범위였는데, 250과 500 μg/mL 농도에서는 에탄올 추출물의 활성이 물 추출물에 비해 유의적으로 더 높았으나 1,000 μg/mL 농도에서는 추출용매에 따른 활성의 유의차는 없었다.
Fluorescence microplatereader를 이용하여 DCF-DA로 염색한 세포를 분석한 결과(Fig. 3), 쇠비름 물과 에탄올 추출물 모두가 500-4,000 μ g/mL 농도에서 ROS의 생성을 유의적으로 감소시켰다(p<0.05).
IL-1β는, 물과 에탄올 추출물 모두에서 농도 의존적으로 유의적인 감소가 확인되었다.
LPS를 처리한 RAW 264.7 세포는 대조군보다 NO의 생성이 증가하였으나, 쇠비름 물 및 에탄올 추출물을 동시에 처리하였을 때 1,000-4,000 μg/mL 농도에서 NO 생성량이 유의적으로 감소하였다(p<0.05).
RAW 264.7 세포에 쇠비름의 물 및 에탄올 추출물을 농도별(0, 500, 1,000, 2,000, 및 4,000 μg/mL)로 24시간 동안 처리한 결과(Fig. 1), 4,000 μg/mL 농도 범위까지 모든 시료가 대조군 대비 세포 독성이 없는 것으로 확인되었다.
그 결과 TNF-α의 경우, 에탄올 추출물이 2,000과 4,000 μg/mL 농도에서 유의성 있는 감소를 보였고 반면 물 추출물은 유의성 있는 변화가 없었다.
마지막으로 IL-6의 경우에도TNF-α결과와 동일하게 에탄올 추출물의 2,000과 4,000 μ g/mL 농도에서만 유의성 있는 감소가 확인되었다.
기존의 보고에 따르면 DPPH와 ABTS 라디칼 소거활성은 총 폴리페놀 화합물의 함량과 양의 상관관계를 나타낸다고 하며(38), Kang 등(39)의 쑥 추출물 항산화 활성 연구에서도 총 페놀과 총 플라보노이드 함량이 가장 높게 측정된 추출물에서 DPPH와 ABTS 라디칼 소거 활성 역시 가장 높은 것으로 보고되어 있다. 본 연구 결과도 상대적으로 총 페놀 화합물과 플라보노이드 함량이 높았던 쇠비름 에탄올 추출물에서 DPPH와 ABTS 라디칼 소거 활성이 높았다. 예외적으로 1,000 μg/mL 농도의 물 추출물에서만 ABTS라디칼 소거능이 에탄올 추출물보다 더 높았다.
추출 방법에 따른 비파엽 추출물의 항염 활성 연구에서 에탄올 추출물이 물 추출물에 비해 NO 생성 억제 활성이 높게 나타났다는 보고가 있으며(41), 사백산 물 추출물과 에탄올 추출물의 항염증 효과 비교 연구에서도 물 추출물은 농도의 증가에 따른 NO 생성 억제 활성이 미미한 반면 에탄올 추출물은 농도 증가에 따른 NO 생성 억제 활성이 현저히 높게 나타났다고 한다(42). 본 연구 결과에서 물 추출물보다 에탄올 추출물이 높은 NO 생성억제 활성을 보였는데 이는 기존 연구들과 일치하는 결과로써 천연물들은 추출 용매에 따라 NO 생성 억제 활성이 영향을 받을 것으로 사료된다.
산화반응 촉매제로 작용하는 금속이온을 환원시키는 효력을 측정하는 방법 중 하나인 FRAP 법을 이용하여 쇠비름 추출물들의 환원력을 측정하였다. 쇠비름 물 추출물의 경우, 26.67-85.64 mM이었고, 에탄올 추출물은 28.29-115.67mM로 에탄올 추출물의 환원력이 더 높았으며, 또한 농도가 증가할수록 환원 활성이 증가하였다.
쇠비름 추출물 중 에탄올 추출물만이 TNF-α, IL-1β,그리고 IL-6의 발현을 모두 유의적으로 억제하였으므로 이는 쇠비름 에탄올 추출물이 RAW 264.7 세포에서 염증성 cytokine을 효과적으로 억제하여 항염증 효과에 기여하는 것으로 판단된다.
앞선 세포독성 실험결과물과 에탄올 추출물 모두 500-4,000 μg/mL 농도에서 독성이 관찰되지 않았는데 이는 쇠비름 물과 에탄올 추출물의 NO생성억제 효과가 독성으로 인한 cell population의 저하에서 기인하지 않는다는 것을 확인하는 결과라고 사료된다.
특히 4,000 μg/mL의 에탄올 추출물의 ROS 생성량은 LPS만 처리한 세포보다 유의적으로 낮았고, 염증을 유발하지 않은 세포의 ROS 생성 수준과 비슷한 정도였다. 이러한 결과는 쇠비름 추출물의 항산화 활성이 염증을 유발한 세포 내에서도 유효하며, 염증반응으로 발생하는 ROS 생성을 감소시켜 과도한 염증반응을 감소시킬 수 있음을 나타낸다. 플라보노이드와 폴리페놀을 함유하고 있는 천연 추출물이 LPS로 자극한 RAW 264.
쇠비름 물과 에탄올 추출물 중의 총 페놀 화합물 함량과총 플라보노이드 함량을 측정하여 Table 1에 나타내었다. 총 페놀 함량은 에탄올 추출물에서 21.08 mg GAE/g으로 물 추출물의 15.03 mg GAE/g보다 유의적으로 높았다. 쇠비름을 각종 유기용매로 추출하여 총 페놀 화합물 함량을 측정한 Park 등(35)은 ethyl acetate 추출물 52.
총 플라보노이드 함량의 경우도 에탄올 추출물이 5.45mg QE/g으로 물 추출물의 2.18 mg QE/g 보다 유의적으로 높았다. 항산화 활성이 뛰어난 것으로 알려진 한방 식물류인 Salvia officinalis, Matricaria recutita 및 Potentillafruticosa의 폴리페놀 함량은 각각 22.
추가적으로 세포의 항염증 효능의 지표 단백질로 알려진 TNF-α, IL-1β, IL-6의 발현을 확인하였을 때 LPS 단독 처리군 대비 쇠비름 에탄올 추출물에서 3가지 단백질 모두의 발현양이 감소하는 것을 확인하였다.
추출물별에 따른 NO 생성 억제효과를 비교해 보면, 500-4,000μg/mL 농도에서 에탄올 추출물이 물 추출물에 비하여 NO 생성 억제 효과가 높게 나타났다.
한편, 세포독성을 살펴보기 위하여 쇠비름 물 및 에탄올 추출물을 이용해 대식세포에 MTT assay를 수행한 결과, 4,000 μg/mL 의 이하 농도까지는 세포의 생존율에 영향을 미치지 않는 것을 확인하였다.
후속연구
이상의 결과를 종합하여 볼 때 쇠비름 에탄올 추출물은물 추출물에 비해 높은 항산화와 항염증 활성을 가지는 것으로 확인되었으며, 추후 쇠비름의 유효성분 추출을 통한 항염증 물질의 연구와 염증 억제 성분의 분리 및 그 작용기전 연구에 기초 자료가 될 것으로 사료된다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
쇠비름은 무엇인가?
쇠비름은 쇠비름과의 한해살이 식물로서 오행초(五行草), 장명채(長命采), 마치채(馬齒采)등으로 불리기도 하며,전 세계적으로 분포하며 주로 길가, 텃밭 등에서 자생한다(1). 또한 고대의학 서적에 의하면 해독, 지혈, 부기완화, 지사 등의 다양한 효능이 있고 임상적으로는 장염, 혈변, 설사, 피부궤양, 벌레물린 상처, 피부염 등의 상처나 질병치료에 사용하였다(2).
고대의학과 임상에서 사용되는 쇠비름의 효능은 무엇인가?
쇠비름은 쇠비름과의 한해살이 식물로서 오행초(五行草), 장명채(長命采), 마치채(馬齒采)등으로 불리기도 하며,전 세계적으로 분포하며 주로 길가, 텃밭 등에서 자생한다(1). 또한 고대의학 서적에 의하면 해독, 지혈, 부기완화, 지사 등의 다양한 효능이 있고 임상적으로는 장염, 혈변, 설사, 피부궤양, 벌레물린 상처, 피부염 등의 상처나 질병치료에 사용하였다(2).
쇠비름의 성분은 무엇인가?
쇠비름의 알려진 성분으로는 L-noradrenaline, dopamine,dihydroxyphenylalanin 등이 있으며, 그 외 다량의 organic acid, glutamic acid, aspartic acid, alanine 등이 있다(3). 또한 약리학적 효과를 가지는 물질인 terpene, phenolic acid(4), coumarin(5), flavonoid(6) 및 oleracein A-G(7) 등을 포함하고 있어 항균, 항바이러스 활성(8), 신경보호 효과(9) 및 항암제(10)로서의 효능이 있다고 보고되어 있다.
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