[논문]창원근교에서의 ampicillin 내성세균의 분리 및 동정

배영민

doi:10.5352/jls.2018.28.12.1529

창원근교에서의 ampicillin 내성세균의 분리 및 동정
Isolation and Identification of Ampicillin-resistant Bacteria in Changwon 원문보기

생명과학회지 = Journal of life science, v.28 no.12 = no.224, 2018년, pp.1529 - 1535

초록
AI-Helper

우리 인간이 병원성 미생물에 감염되었을 경우에 주로 사용되는 항생제들은 현재 수백 가지가 넘지만 각각의 항생제에 대한 내성세균이 발견되는 빈도수가 가파르게 증가하고 있다. 또한 항생제에 대한 내성이 병원성 세균들 사이에서 빠르게 확산되고 있으나 새로운 항생제가 발견되는 속도는 눈에 띄게 감소하고 있다. 따라서 현 시점에서 우리 주변 환경에서 항생제 내성 세균이 얼마나 많이 존재하는 지에 대한 체계적인 연구가 필요하다고 할 수 있다. 본 연구에서는 현재 의료용으로 널리 사용되고 있는 항생제 중에서 ampicillin에 대한 내성 세균에 대한 조사를 진행하였다. 창원시를 가로지르는 창원천 및 창원대학교 기숙사 앞의 연못에서 미생물 시료를 채취하였다. 각 지점에서 채취된 시료를 분석한 결과 많은 내성 세균들이 나타났는데, 이러한 세균들을 집락의 형태에 따라 몇 그룹으로 나누고 각 그룹을 대표하는 22종 세균들의 genomic DNA를 추출하고, 이것을 template로 사용하는 16S rRNA 유전자 증폭반응을 수행 하였다. 얻어진 산물의 염기서열을 밝히고 genbank의 자료들과 비교해서 분리된 내성세균들을 동정하였다. 그 결과 10개 과, 12개 속, 17종의 세균들이 동정되었으며, 분리된 세균들의 ampicillin에 대한 내성을 조사해 본 결과, 17종 모두가 $50{\mu}g/ml$의 ampicillin 농도에서 증식을 하였고, 이 중에서도 7종의 세균들은 1.5 mg/ml의 농도에서도 증식 가능하다는 것을 알 수 있었다.

Abstract ▼ AI-Helper

The number of antibiotic-resistant bacteria is increasing rapidly while the discovery rate of new antibiotics is in decline. A systematic study is therefore necessary to investigate which bacteria are resistant to medically important antibiotics and how high that resistance is. To that end, this study aimed to analyze which bacteria demonstrated resistance to ampicillin, one of the currently most-widely used medical antibiotics. Water samples were collected from the Changwon-Cheon that runs through Changwon City and from the pond in front of the dormitory building at Changwon University. Hundreds of ampicillin-resistant colonies were obtained and 22 morphologically distinct examples were chosen for further study. These bacteria were identified by amplifying their 16S rRNA genes and comparing those sequences with data in GenBank. The bacteria was identified as belonging to 10 families, 12 genera, and 17 species, and all were able to grow in the presence of $50{\mu}g/ml$ ampicillin while seven showed growth at ampicillin concentrations as high as 1.5 mg/ml.

주제어

표/그림 (4)

표 Table 1. BLAST search result of ampicillin-resistant bacteria isolated in this study
그림 Fig. 1. Neighbor-joining phylogenetic tree determined from the 16S rDNA sequences isolated in this study. Bootstrap values are based on 1,000 replications.
표 Table 2. Bacterial growth at 4℃ and 37℃
표 Table 3. Bacterial growth at various ampicillin concentrations

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

본 연구에서는 창원시 여러 지점에서 ampicillin에 내성을 보이는 세균들을 분리하고 분리된 세균들의 16S rDNA의 염기서열을 genbank의 자료들과 비교하여 세균들의 동정을 시도하였다. 그 결과, 분리된 세균들 중에서 13종 세균들의 16S rDNA와 99.
본 연구에서는 현재에도 병원성 세균의 감염을 치료하기 위하여 널리 사용되고 있는 ampicillin에 대한 내성 세균들의 현황을 조사하기 위하여 ampicillin 내성 세균들을 자연에서 분리하고 그 세균들을 동정하였다.

제안 방법

0.5X nutrient agar에 도말된 세균들을 4℃ 또는 37℃에서 3일간 배양하고 증식 여부를 육안으로 확인하였다. 항생제 농도에 따른 반응을 관찰하기 위해서는 여러 가지 농도의 ampicillin을 함유한 0.
5X nutrient agar에 채취된 시료를 여러 가지 농도로 희석하여 도말하고 25℃에서 3일간 배양하였다. 3일 후에 나타난 집락들의 형태 및 색을 기준으로 세균들을 여러 그룹으로 나누고 각 그룹을 대표하는 세균들을 선정하였다.
PCR products는 0.7% agarose gel에서 분자량에 따라 separation 시켜서 산물을 확인한 후, Promega Corporation의 Geland PCR purification system을 사용하여 DNA를 정제 하였다. 정제된 PCR product는 제한효소 SmaⅠ으로 절단하고 bacterial alkaline phosphatase로 처리된 pBluscript Ⅱ SKplasmid와 섞어서 ligation 시키고, competent Escherichia coli DH5α에 transformation 하였다.
PCR 반응을 위해서는 DNA template 200 ng, forward primer 2.5 pmol, reverse primer 2.5 pmol, dNTPsmixture 2 μl (10 nM each) 그리고 Pfu DNA polymerase 2μl (6 U)를 포함하는 100 μl의 반응액에서 반응을 진행하였다.
coli 세포들을 100 μg/ ml의 ampicillin을 함유하는 MacConkey agar에 도말하고 37℃에서 배양하였다. 나타난 colony들 중에서 흰색 colony들을 selection 하여서 이들로부터 plasmid DNA를 추출한 후에, supercoiled plasmid DNA 및 제한효소 PvuⅡ로 절단된 plasmid DNA를 agarose gel electrophoresis로 분석하였다. 예상되는 크기의 PCR 산물이 확인되면 (주)솔젠트(Daejeon, Korea)에 의뢰 하여 insert DNA들의 염기서열을 분석하였다.
창원시 여러 지점에서 채취한 시료를 25 μg/ ml의 ampicillin을 포함하는 고체 배지에 도말하고 3일간 배양하였다. 나타난 집락들의 형태 및 색을 기준으로 22 가지의 세균들을 선정하고 genomic DNA를 추출하였다.
따라서 이러한 경우에는 bioMérieux, Durham,NC, USA)의 API system을 사용해서 생화학적 분류를 시도 하였다.
본 연구에서는 현재에도 광범위하게 사용되는 ampicillin에 대한 내성세균들을 주변 수계에서 분리하였다. 그 결과 10개과, 12개 속, 17종의 내성 세균들이 분리되었으며 이 중에서 7종의 세균들은 1.
분리된 세균들의 ampicillin에 대한 내성의 정도를 파악하기 위해서 각각 50, 100, 300, 500, 700, 900, 1,200, 1,500 μg/ml의 ampicillin을 포함하는 0.5X nutrient agar에 분리된 세균들을 도말하고 25℃에서 3일간 배양한 후에 증식여부를 판단하였다.
이렇게 얻어진 염기서열을 BLAST program으로 분석하였다[8]. 분석된 22 가지의 세균들 중에서 5 가지 세균들은 16SrDNA의 염기서열이 분리된 다른 세균들의 염기서열과 10 개 염기 이내의 차이 밖에 보이지 않았으므로, 이러한 세균들을 제외한 나머지 17 가지 세균들의 염기서열을 가지고 BLAST로 분석을 진행하였다. 이 중에서 13가지는 genbank에서 99.
선정된 22 가지의 ampicillin 내성세균의 16S rDNA를 PCR로 증폭 하였고, 증폭된 PCR 산물의 염기서열을 분석하였다. 이렇게 얻어진 염기서열을 BLAST program으로 분석하였다[8].
얻어진 염기서열은 Genbank의 BLAST program으로 similarity를 분석하였다[8]. 수집된 염기서열은 ClustalW 2.1을 사용하여 서로 align하고 MEGA6를 사용하여 neighbor-joiningtree를 작성하였다[16].
나타난 colony들 중에서 흰색 colony들을 selection 하여서 이들로부터 plasmid DNA를 추출한 후에, supercoiled plasmid DNA 및 제한효소 PvuⅡ로 절단된 plasmid DNA를 agarose gel electrophoresis로 분석하였다. 예상되는 크기의 PCR 산물이 확인되면 (주)솔젠트(Daejeon, Korea)에 의뢰 하여 insert DNA들의 염기서열을 분석하였다.
분리된 세균들은 Burkholderiaceae, Caulobacteraceae,Comamonadaceae, Enterobacteriaceae, Flavobacteriaceae,Neisseriaceae, Oxalobacteraceae, Pseudomonadaceae, Sphingobacteriaceae 및 Sphingomonadaceae의 10개 과(family)에 속하는 것으로 밝혀졌다(Table 1). 이러한 세균들의 16S rDNA염기서열로 neighbor-joining rooted tree를 작성해 보았다(Fig. 1). Enterobacteriaceae에 속하는 Raoultella ornithinolytica는 예상대로 Escherichia coli와 유연관계가 가장 높고, Oxalobacteraceae에 속하는 Janthinobacterium spp.
선정된 세균들을 25 μg/ ml의 ampicillin을 포함하는 nutrient broth에 접종하고 25℃에서 180 rpm으로 교반하며 충분한 농도에 도달할 때까지 배양하였다. 이렇게 배양된 세균 세포로부터 genomic DNA를 추출하였다. Genomic DNA의 추출에는 Macherey-Nagel, Inc.
정제된 PCR product는 제한효소 SmaⅠ으로 절단하고 bacterial alkaline phosphatase로 처리된 pBluscript Ⅱ SKplasmid와 섞어서 ligation 시키고, competent Escherichia coli DH5α에 transformation 하였다.
추출된 genomic DNA를 template로 사용하여 16S rDNA를 증폭하였다. PCR 반응을 위해서는 DNA template 200 ng, forward primer 2.
5X nutrient agar에 도말된 세균들을 4℃ 또는 37℃에서 3일간 배양하고 증식 여부를 육안으로 확인하였다. 항생제 농도에 따른 반응을 관찰하기 위해서는 여러 가지 농도의 ampicillin을 함유한 0.5X nutrient agar에 선정된 세균들을 도말하고 3일간 배양한 후에 증식 여부를 판단하였다.

대상 데이터

5 pmol, dNTPsmixture 2 μl (10 nM each) 그리고 Pfu DNA polymerase 2μl (6 U)를 포함하는 100 μl의 반응액에서 반응을 진행하였다. Pfu DNA polymerase 및 dNTP mixture는 Promega Corporation (Madison, WI, USA)의 제품을 사용하였다. PCR에 사용된 forward primer는 16S rDNA 5'-말단의 conserved region을 target으로 하여 제조된 fD1 (5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3')이고, reverse primer는 16S rDNA 3' 부위를 target으로 하여 제조된 rP2 (5'-ACGGCTACCTTGTTACGACTT-3')이었다[18].
본 연구에 사용된 ampicillin sodium salt는 Sigma-Aldrich의 제품을 사용하였다.
본 연구에서 사용된 미생물 시료는 창원시 소재 정병산에서 발원하여 마산만으로 흘러 들어가는 창원천 2개 지점 및 창원대학교 기숙사 앞의 연못에서 채취하였다. 채취된 시료는 즉시 스티로폼 상자에 담아서 온도변화를 최소화 하며 실험실로 운반하였다.
창원시 여러 지점에서 채취한 시료를 25 μg/ ml의 ampicillin을 포함하는 고체 배지에 도말하고 3일간 배양하였다.

데이터처리

얻어진 염기서열은 Genbank의 BLAST program으로 similarity를 분석하였다[8]. 수집된 염기서열은 ClustalW 2.
선정된 22 가지의 ampicillin 내성세균의 16S rDNA를 PCR로 증폭 하였고, 증폭된 PCR 산물의 염기서열을 분석하였다. 이렇게 얻어진 염기서열을 BLAST program으로 분석하였다[8]. 분석된 22 가지의 세균들 중에서 5 가지 세균들은 16SrDNA의 염기서열이 분리된 다른 세균들의 염기서열과 10 개 염기 이내의 차이 밖에 보이지 않았으므로, 이러한 세균들을 제외한 나머지 17 가지 세균들의 염기서열을 가지고 BLAST로 분석을 진행하였다.

이론/모형

이렇게 배양된 세균 세포로부터 genomic DNA를 추출하였다. Genomic DNA의 추출에는 Macherey-Nagel, Inc. (Bethlehem, PA, USA)의 NucleoSpin Microbial DNA kit를 사용하였고, 실험방법은 kit에 동봉된 protocol에 따랐다.

성능/효과

이 경우에 속(genus)이 서로 다른 두 가지 세균이 같은 16S rDNA 염기서열을 가지고 있는 사례가 된다. Acidovorax eubreus TPSY는 gen-bank에 등록된 날짜가 2013년 12월 24일이고, Diaphorobacter polyhydroxybutyrativorans SL-205는 genbank에 등록된 날짜가2017년 7월 5일 이기 때문에, 이 경우에는 어쩔 수 없이 A2는 더 먼저 genbank에 등록된 Acidovorax eubreus인 것으로 잠정적으로 결론을 내렸다.
이때에 반응조건은 95℃에서 2분간 한 cycle, 그리고 95℃에서 45초, 55℃에서 45초, 72℃에서 2분씩 30 cycle을 진행시킨 후, 최종적으로 72℃에서 5분간 유지시켰다. PCR에는 error가 적게 발생하는 Pfu DNA polymerase를 사용함으로써 반응 중에 DNA의 염기서열이 변경되는 것을 최소화하였다.
0% 이상의 유사성을 보이는 염기서열은 genbank에서 발견할 수가 없었고, 가장 높은 유사성을 보이는 염기서열이 Flavobacterium sp.WB3.2-27의 16S rDNA 염기서열(accession AM934658)로서98.6%의 유사성을 보였다. 이 세균을 API 20 NE로 분석한 결과, %ID가 81.
세균 25는 BLAST search 결과, Chryseobacterium sp. strain17S1E7의 16S rDNA 염기서열(accession MG385858)과 99.7%의 유사성을 보였고, Chryseobacterium culicis strain AL18의16S rDNA 염기서열(accession MG819177)과 98.6%의 유사성을 보였다. 따라서 세균 25가 Chryseobacterium spp.
본 연구에서는 현재에도 광범위하게 사용되는 ampicillin에 대한 내성세균들을 주변 수계에서 분리하였다. 그 결과 10개과, 12개 속, 17종의 내성 세균들이 분리되었으며 이 중에서 7종의 세균들은 1.5 mg/ml의 높은 ampicillin 농도에서도 증식이 억제되지 않았다. 세균에 감염된 환자의 혈중 항생제 농도를 이렇게 높게까지 올리는 것은 사실상 불가능하므로 이정도의 내성을 가지고 있는 병원성 세균에 감염이 되었을 경우에는 내성을 나타내는 항생제로는 치료가 전혀 불가능 하다는 것을 알 수 있다.
그 결과, 모든 세균들이 50 μg/ ml의 ampicillin 농도에서 증식하였고, 세균 A2(Acidovorax ebreus), A7(Escherichia coli),1(Burkholderia vietnamiense), 3(Pseudomonas aeruginosa), 6(Chromobacterium aquaticum), 11(Acidovorax temperans), 15(Janthinobacterium spp.), 16(Acidovorax delafieldii)은 1,500 μg/ ml의 높은 ampicillin 농도에서도 증식하는 것을 관찰 할 수 있었다(Table 3).
본 연구에서는 창원시 여러 지점에서 ampicillin에 내성을 보이는 세균들을 분리하고 분리된 세균들의 16S rDNA의 염기서열을 genbank의 자료들과 비교하여 세균들의 동정을 시도하였다. 그 결과, 분리된 세균들 중에서 13종 세균들의 16S rDNA와 99.0% 이상의 유사성을 보이는 염기서열이 genbank에서 발견이 되었다. 따라서 이 13종의 세균들은 종(species)단위까지 동정을 할 수가 있었다.
7로 Brevundimonas vesicularis로 동정이 되었다. 그러나 genbank에 등록되어 있는 B. vesicularis 16S rDNA 염기서열 중에서 accession FM955876, KF975414 및 MF541532와 비교해 본 결과 세균 22의 염기서열 역시 이들 중에서 어느 것과도 유사성이 90%를 넘지 않았다. 그러나 genbank에 등록되어 있는 이 세 가지 B.
3으로 Sphingomonas paucimobilis로 동정이 되었다. 그러나 genbank에 등록되어 있는 Sphingomonas paucimobilis 16S rDNA 염기서열 중에서 accession D16144, HF558376 및 KR080483과 비교해 본 결과 A9의 염기서열은 이들 중에서 어느 것과도 유사성이 90%를 넘지 않았다. 따라서 A9 세균은 Sphingomonas paucimobilis가 될 수가 없다고 판단되고, 또한 A9 세균의 집락이 Flavobacterium 균주들의 특징인 짙은 노랑색의 넓게 퍼지는 형태이므로 A9 세균은 Flavobacterium spp.
7로 Sphingomonas paucimobilis로 동정이 되었다. 그러나 genbank에 등록되어 있는 Sphingomonas paucimobilis 16S rDNA 염기서열 중에서 accession D16144, HF558376 및 KR080483과 비교해 본 결과 세균 15의 염기서열 역시 이들 중에서 어느 것과도 유사성이 90%를 넘지 않았다. 또한 세균 15와 세균 A9의 염기서열을 비교해 본 결과, 이 두 세균 간에도 유사성이 90%를 넘지 않았다.
vesicularis 16S rDNA 염기서열 중에서 accession FM955876, KF975414 및 MF541532와 비교해 본 결과 세균 22의 염기서열 역시 이들 중에서 어느 것과도 유사성이 90%를 넘지 않았다. 그러나 genbank에 등록되어 있는 이 세 가지 B. vesicularis 종들의 16S rDNA 염기서열끼리는 서로 99.0% 이상의 유사성을 나타내었다. 따라서 세균22도 Sphingomonas spp.
그 외에도 Burkholderia, Sphingomonas, Brevundimonas 속에 속하는 많은 종들이 인체의 기회성 병원체로 알려져 있다[14]. 따라서 여러 가지 항생제에 대해서 내성을 나타내는 병원성 세균들이 이미 우리 주변에서 쉽게 분리되고 있다는 것을 본 연구를 통해서 확인할 수 있었다.
로 동정할 수밖에 없었다. 또한 본 연구에서 분리되고 B. vesicularis로 동정된 세균 29는 4℃에서는 증식하였으나 37℃에서는 증식이 관찰되지 않았다(Table 2). 반면에 세균 22는 4℃에서는 증식하지 않았으며 37℃에서는 증식이 관찰되었다(Table 2).
그러나 genbank에 등록되어 있는 Sphingomonas paucimobilis 16S rDNA 염기서열 중에서 accession D16144, HF558376 및 KR080483과 비교해 본 결과 세균 15의 염기서열 역시 이들 중에서 어느 것과도 유사성이 90%를 넘지 않았다. 또한 세균 15와 세균 A9의 염기서열을 비교해 본 결과, 이 두 세균 간에도 유사성이 90%를 넘지 않았다. 따라서 세균 15도 Sphingomonas paucimobilis로 동정 될 수가 없다고 판단되므로 세균 15도 Janthinobacterium spp.
본 연구에서 얻어진 결과와 다른 연구자들의 결과들을 종합해 보면 우리나라의 항생제 내성 세균문제가 얼마나 심각한 상태인가 하는 것을 쉽게 짐작할 수 있게 해 준다. 더군다나 분리된 내성 세균들 중에서 상당수가 여러 가지 항생제에 대해서 동시에 내성을 보이는 다제내성 세균이라는 점이 문제를 더욱 더 심각하게 만들고 있다.
5% 이상이 일치하여야 같은 종으로 볼 수 있다고 하였다[3, 7]. 본 연구에서는 세균 A9, 15, 22 및 25가 genbank의 어떠한 염기서열들과도 99.0% 이상의 유사성을 보이지 않았다. 따라서 이 세균들은 유전적 방법으로는 종 단위까지는 동정할 수가 없으므로, 이 세균들은 Flavobacterium spp.
분리된 17종의 세균들을 4℃ 및 37℃에서 배양하며 관찰한 결과, 4℃에서는 세균 11(Acidovorax temperans)과 세균 29(Brevundimoas vesicularis) 만이 증식하였다. 37℃에서는 세균 5(Pseudomonas putida), 세균 9(Pedobacter terrae), 세균 16(Acidovorax delafieldii) 및 세균 29(Brevundimoas vesicularis)가 증식하지 못 하였다(Table 2).
분리된 세균 중에서 A2는 BLAST search 결과 Acidovoraxeubreus TPSY (accession CP001392) 및 Diaphorobacter polyhydroxybutyrativorans SL-205 (accession CP016278) 균주들과 16S rDNA의 염기서열이 100% 일치하였다. 이 경우에 속(genus)이 서로 다른 두 가지 세균이 같은 16S rDNA 염기서열을 가지고 있는 사례가 된다.
분리된 세균들은 Burkholderiaceae, Caulobacteraceae,Comamonadaceae, Enterobacteriaceae, Flavobacteriaceae,Neisseriaceae, Oxalobacteraceae, Pseudomonadaceae, Sphingobacteriaceae 및 Sphingomonadaceae의 10개 과(family)에 속하는 것으로 밝혀졌다(Table 1). 이러한 세균들의 16S rDNA염기서열로 neighbor-joining rooted tree를 작성해 보았다(Fig.
(2004)은 전북 군산시 인근에 위치한 금강호에서 항생제 내성균에 대해서 조사하였는데, ampicllin 내성균이 가장 빈번하게 분리되었다[1]. 분리된 세균들은 Pseudomonas속, Aeromonas 속, Bacillus 속, Stenotrophomonas 속, Enterobacter속, Sphingobium 속, Variovorax 속, Serratia 속, Acinetobacter속, Mycoplana 속, Psychrobacter 속, Xanthomonas 속 등으로 동정되었다[1]. 따라서 이미 우리나라도 전국의 여러 수계에 다양한 항생제 내성 세균들이 존재할 가능성이 높음을 암시하고 있다.
세균 22는 BLAST search 결과, Sphingomonas wittichii strain RW1의 16S rDNA 염기서열(accession NR074268)과 97.6%의 유사성을 나타냈다. 이 세균을 API 20 NE로 분석한 결과, 역시 %ID가 75.
6%의 유사성을 보였다. 이 세균을 API 20 NE로 분석한 결과, %ID가 81.3으로 Sphingomonas paucimobilis로 동정이 되었다. 그러나 genbank에 등록되어 있는 Sphingomonas paucimobilis 16S rDNA 염기서열 중에서 accession D16144, HF558376 및 KR080483과 비교해 본 결과 A9의 염기서열은 이들 중에서 어느 것과도 유사성이 90%를 넘지 않았다.
8%의 유사성을 나타냈다. 이 세균을 API 20 NE로 분석한 결과, 역시 %ID가 69.7로 Sphingomonas paucimobilis로 동정이 되었다. 그러나 genbank에 등록되어 있는 Sphingomonas paucimobilis 16S rDNA 염기서열 중에서 accession D16144, HF558376 및 KR080483과 비교해 본 결과 세균 15의 염기서열 역시 이들 중에서 어느 것과도 유사성이 90%를 넘지 않았다.
6%의 유사성을 나타냈다. 이 세균을 API 20 NE로 분석한 결과, 역시 %ID가 75.7로 Brevundimonas vesicularis로 동정이 되었다. 그러나 genbank에 등록되어 있는 B.

참고문헌 (18)

Bae, M. S., Choi, G. G., Park, S. H., Choi, M. S. and Lee, G. H. 2004. Annual population variation and identification of antibiotic-resistant bacteria in the lower lake Geumgang. Kor. J. Ecol. 27, 283-289.

원문보기 상세보기
Clarridge III, J. E. 2004. Impact of 16S rRNA gene sequence analysis for identification of bacteria on clinical microbiology and infectious diseases. Clin. Microbiol. Rev. 17, 840-862.

상세보기
Drancourt, M., Bollet, C., Carlioz, A., Martelin, R., Gayral, J. P. and Raoult, D. 2000. 16S ribosomal DNA sequence analysis of a large collection of environmental and clinical unidentifiable bacterial isolates. J. Clin. Microbiol. 38, 3623-3630.

상세보기
Garrod, L. P. 1974. Choice among penicillins and cephalosporins. Br. Med. J. 3, 96-100.

상세보기
Gomes, T. A., Elias, W. P., Scaletsky, I. C., Guth, B. E., Rodrigues, J. F., Piazza, R. M., Ferreira, L. C. and Martinez, M. B. 2016. Diarrheagenic Escherichia coli. Braz. J. Microbiol. 47 Suppl 1, 3-30.

상세보기
Huh, M. J., Oh, S. S. and Jang, J. S. 2013. Antimicrobial resistance and multi-drug resistance patterns of pathogenic bacteria isolated from food poisoning patients in Incheon. Kor. J. Food Nutr. 26, 132-113.

원문보기 상세보기
Janda, J. M. and Abbott, S. L. 2007. 16S rRNA gene sequencing for bacterial identification in the diagnostic laboratory: pluses, perils, and pitfalls. J. Clin. Microbiol. 45, 2761-2764.

상세보기
Johnson, M., Zaretskaya, I., Raytselis, Y., Merezhuk, Y., McGinnis, S. and Madden, T. L. 2008. NCBI BLAST: a better web interface. Nucleic Acids Res. 36, W5-9.

상세보기
Kaushik, D., Mohan, M., Borade, D. M. and Swami, O. C. 2014. Ampicillin: rise fall and resurgence. J. Clin. Diagn. Res. 8, ME01-3.
Kim, M. N. and Kwon, O. M. 2008. Antimicrobial susceptibility of Enterococcus spp. isolated from Han-river area in Korea. Kor. J. Environ. Biol. 26, 240-246.
Lee, D. K., Park, J. E., Kim, K. T., Jang, D. H., Song, Y. C. and Ha, N. J. 2014. Bacterial contamination and antimicrobial resistance of the surrounding environment influencing health. Kor. J. Microbiol. 50, 101-107.

원문보기 상세보기
Marti, E., Variatza, E. and Balcazar, J. L. 2014. The role of aquatic ecosystems as reservoirs of antibiotic resistance. Trends Microbiol. 22, 36-41.

상세보기
Oh, H. and Park, J. 2009. Characteristics of antibiotic resistant bacteria in urban sewage and river. J. Kor. Society Environ. Eng. 31, 232-239.
Ryan, M. P. and Pembroke, J. T. 2018. Brevundimonas spp: emerging global opportunistic pathogens. Virulence 9, 480-493.

상세보기
Tamma, P. D. and Rodriguez-Bano, J. 2017. The use of noncarbapenem ${\beta}$ -lactams for the treatment of extended-spectrum ${\beta}$ -lactamase infections. Clin. Infect. Dis. 64, 972-980.

상세보기
Tamura, K., Stecher, G., Peterson, D., Filipski, A. and Kumar, S. 2013. MEGA6: Molecular evolutionary genetics analysis version 6.0. Mol. Biol. Evol. 30, 2725-2729.

상세보기
Valentini, M., Gonzalez, D., Mavridou, D. A., Filloux, A. 2018. Lifestyle transitions and adaptive pathogenesis of Pseudomonas aeruginosa. Curr. Opin. Microbiol. 41, 15-20.

상세보기
Weisburg, W. G., Barns, S. M., Pelletier, D. A. and Lane, D. J. 1991. 16S ribosomal DNA amplification for phylogenetic study. J. Bacteriol. 173, 697-703.

상세보기

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증