[논문]가죽나무 에탄올 추출물에 의한 면역증강 효과

길나영; 김순희; 최보영; 문지영; 여수환; 김소영

doi:10.9799/ksfan.2018.31.6.940

가죽나무 에탄올 추출물에 의한 면역증강 효과
Immune Enhancing Effect by Ethanol Extract of Ailantias altissima 원문보기

한국식품영양학회지 = The Korean journal of food and nutrition, v.31 no.6, 2018년, pp.940 - 948

길나영 (농촌진흥청 국립농업과학원 발효가공식품과) , 김순희 (농촌진흥청 국립농업과학원 발효가공식품과) , 최보영 (농촌진흥청 국립농업과학원 발효가공식품과) , 문지영 (농촌진흥청 국립농업과학원 발효가공식품과) , 여수환 (농촌진흥청 국립농업과학원 발효가공식품과) , 김소영 (농촌진흥청 국립농업과학원 발효가공식품과)

Abstract ▼ AI-Helper

The aim of this study was to investigate the immune activity of Ailantias altissima as an active ingredient on the immune enhancement by mixing ethanol extract with lactic acid bacteria (LAB). The activity of $NF-{\kappa}B/AP1$ transcription factor increased by $NF-{\kappa}B$ activity when mixed with LAB samples rather than with the extract alone. Nitric oxide (NO) production was similar in ethanol extract alone group and LPS treatment group. Mixing Ailantias altissima extract and lactic acid bacteria led to low NO production. The cytokine productivity of $TNF-{\alpha}$ significantly increased in Ailantias altissima extract when treated with LPS, and increased even more when mixed with lactic acid bacteria. The $IL-1{\beta}$ cytokine production was high when the Ailantias altissima extract were treated alone, but no $IL-1{\beta}$ cytokine was produced in the mixtures with isolates. The combination of the ethanol extract of the Ailantias altissima and the lactic acid bacteria was found to be effective in the immune function. Consequently, the ingredient to combine Ailantias altissima extract and lactic acid bacteria can be effectively used for development of the health functional food on the prevention and treatment of hypoimmunities.

주제어

표/그림 (5)

그림 Fig. 1. Effect of Ailantias altissima ethanol extract on cell viability in RAW-BLUE cells.
그림 Fig. 2. Effects of Ailantias altissima extract & mixing the ethanol extract and lactic acid bacteria (live probiotics) on the production of NF-κB and NO in RAW-Blue^TM cell.
그림 Fig. 3. Effects of Ailantias altissima extract & mixing the ethanol extract and lactic acid bacteria (live probiotics) on the production of cytokines (TNF-α, IL-1β) in RAW-Blue^TM cell.
그림 Fig. 4. Effects of Ailantias altissima extract & mixing the ethanol extract and lactic acid bacteria (killed probiotics) on the production of NF-κB and NO in RAW-Blue^TM cell.
그림 Fig. 5. Effects of Ailantias altissima extract & mixing the ethanol extract and lactic acid bacteria (killed probiotics) on the production of cytokines (TNF-α, IL-1β) in RAW-Blue^TM cell.

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구는 가죽나무(Ailantias altissima) 추출물을 유효성분으로 함유하는 면역 증강용 소재를 개발하기 위하여 수행한 것으로, 가죽나무 에탄올 추출물 단독 또는 면역능을 보유한 유산균과의 혼합처리에 의한 면역 활성능을 비교 분석하였다.
유산균은 프로바이오틱스로서 장내 미생물의 균형 유지 및 숙주의 면역시스템 조절 등을 통해 유익한 작용을 하는 살아있는 미생물로 주목받고 있다, 특히 Lactobacillus rhamnosusGG의 경우, Zhang 등(2005)에 따르면 일정한 수준에서 NF-κB의 신호전달체계를 활성화시켜 면역기능을 촉진하는 것으로 잘 알려져 있다. 이에 Lee HC(2015)의 선행연구에서 면역 활성을 보고한 우리나라 김치에서 유래된 Weissella cibaria와Lactobacillus plantarum 등 2종과 함께 가죽나무 추출물 처리에 따른 면역 활성에 미치는 영향을 살펴보고자 하였다.
이에 본 연구에서는 선행연구(Hwang KA 2013)에서 면역기능 개선 효과를 나타내어 기능성 소재로 발굴된 가죽나무 에탄올 추출물의 면역활성을 확인하고, 이 추출물과 유산균과의 혼합에 따른 in vitro상에서 면역활성 증진 효과를 확인하고자 수행되었다.

제안 방법

상기 상층액 50 μL와 Griess reagent(Promega) Ⅰ(Sulfa- nilamide solution) 및 Ⅱ(NED solution)를 동량으로 섞어 제조한 시약 100 μL를 혼합하여 상온에서 10분 반응시킨 후 micro- plate reader(SpectraMax M2)를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. Nitric oxide의 농도는 아질산나트륨의 표준곡선을 이용하여 계산하였다.
RAW-BlueTM 세포는 1×105 cell/mL의 농도로 96 well plate에 분주하였고, 24시간 동안 배양한 후 10, 50, 100, 500 μg/mL 농도의 시료 추출물을 처리하였으며, 대조군에는 배지를 동량으로 처리하였다.
RAW-BlueTM 세포를 1×105 cell/mL의 농도로 96 well plate에 분주하여 24시간 배양시킨 후 100 μg/mL 농도의 시료 추출물을 단독으로 처리하거나 660 nm에서 OD값 0.5에 해당하는 유산균과 시료 추출물을 1:1, 1:0.5, 1:0.25의 비율에 맞춰 혼합하여 처리하여 24시간 동안 다시 배양하여 상층액을 얻었다.
가죽나무(Ailantias altissima) 추출물과 가죽나무 추출물을 유산균(killed probiotics)과 혼합하여 면역활성을 평가하기 위해, 대식세포에 LPS와 함께 처리하여 생성되는 세포활성물질 중 TNF-α와 IL-1β의 생성량을 측정하여 Fig. 4에 나타내었다.
가죽나무(Ailantias altissima) 추출물과 가죽나무 추출물을 유산균(live probiotics)과 혼합하여 면역활성을 평가하기 위해, nitric oxide(NO) 생성량을 확인하여 Fig. 1에 나타내었다.
가죽나무(Ailantias altissima) 추출물과 가죽나무 추출물을유산균(killed probiotics)과 혼합하여 면역활성을 평가하기 위해, Nitric oxide(NO) 생성량을 확인하여 Fig. 3에 나타내었다.
가죽나무(Ailantias altissima) 추출물과 가죽나무 추출물을유산균(live probiotics)과 혼합하여 면역활성을 평가하기 위해, 대식세포에 LPS와 함께 처리하면 생성되는 세포활성물질 중TNF-α와 IL-1β의 생성량을 측정하여 Fig. 2에 나타내었다.
cell/mL의 농도로 96 well plate에 분주하였고, 24시간 동안 배양한 후 10, 50, 100, 500 μg/mL 농도의 시료 추출물을 처리하였으며, 대조군에는 배지를 동량으로 처리하였다. 각 plate는 37℃, 5% CO₂ 조건에서 24시간 배양하여 MTT assay를 수행하였다. 배양 완료 후 PBS(Gibco, USA)를 이용하여 5 mg/mL 농도로 제조한 MTT 용액을 각 well에 200 μL씩 첨가하여 알루미늄 호일로 빛을 차단한 상태에서 4시간 동안 다시 배양하여 MTT가 환원되도록 하였다.
건조 시료로부터 추출물을 만드는 과정은 분말 형태가 된가죽나무 시료를 일정량 칭량한 후, 그 중량의 10배에 해당하는 양만큼 70% 에탄올을 첨가하여 상온에서 24시간 동안 170rpm으로 교반추출기(Jeiotech, Shaker, SK-71)를 이용하여 추출하였다. 상층액은 모으고 잔여물은 처음에 사용한 만큼의 70% 에탄올을 다시 첨가하여 처음 단계를 반복하는 과정을 거쳐 2회 추출한 것을 모아 여과지(Advantec No.
조건에서 배양하였다. 계대는 2일에 한번씩 시행하였으며, RAW-Blue^TM 세포를 활성화시키기 위해 주 1회는 ZeocinTM(InvivoGen, USA)이 첨가된 DMEM 배지를 사용하여 배양하였다.
25의 비율에 맞춰 복합으로 처리하여 24시간 다시 배양하였다. 그리고 상층액만을 취하여 효소결합면역흡착검사(EnzymelinkedImmumosorbent Assay: ELISA)를 이용한 ELISA kit(ebioscience,San Diego, California, USA)로 사이토카인 함량을 측정하였다. 사이토카인(TNF-α와 IL-1β)의 항체(Mouse TNF-a ELISAReady-Set Go 및 Mouse IL-1B ELISA Ready-Set Go, ebio- science)가 코팅되어 있는 각각의 well plate에 상층액 시료 100 μL를 넣어 상온에서 2시간 반응시킨 후, 상층액을 제거하고, PBS와 Tween 20(Sigma)을 섞어 만든 washing buffer로 5회 이상 세척하였다.
이들 균주들은 MRS 액체배지로 37℃에서 24시간 배양한 후 각 균주들은 생균과 사균으로 구분하여 시료를 준비하였다. 배양액은 12,000 rpm에서 5분 동안 원심분리(Gyrogen,Labogene, 1580 R)한 후 상층액을 제거하고, PBS로 희석하여 흡광도(O.D.660 nm)를 측정하여 0.5 농도로 맞추어 생균 시료로 사용하였으며, 사균의 경우는 원심분리한 생균을 100℃에서 15분간 열처리하여 상층액 제거 후 PBS로 희석하여 흡광도 0.5 농도로 맞추어 실험에 사용하였다.
본 실험에 앞서 가죽나무 에탄올 추출물 시료가 RAW-BlueTM 세포주 증식에 미치는 영향을 알아보기 위하여 가죽나무 원재료를 70% 에탄올로 추출하여 제조한 추출물의 수율은 7.08%이었고, 이를 DMEM 배지를 사용하여 10, 50, 100,그리고 500 μg/mL 농도로 제조하여 세포에 처리하였다(Fig. 1).
본 실험에서는 가죽나무 70% 에탄올 추출물의 농도가 세포독성이 나타나지 않는 가장 높은 세포증식 효과를 나타낸 100 μg/mL 농도를 선택하여 면역활성 실험을 진행하였다.
본 실험에서는 가죽나무(Ailantias altissima) 추출물 단독처리군과 가죽나무 추출물을 유산균(live probiotics)과 함께 혼합한 복합군을 RAW-BlueTM 세포에 처리하여 발현되는 NF-κB/AP1 전사인자의 활성을 측정하여 그 결과를 Fig. 1에나타내었다.
건조 시료로부터 추출물을 만드는 과정은 분말 형태가 된가죽나무 시료를 일정량 칭량한 후, 그 중량의 10배에 해당하는 양만큼 70% 에탄올을 첨가하여 상온에서 24시간 동안 170rpm으로 교반추출기(Jeiotech, Shaker, SK-71)를 이용하여 추출하였다. 상층액은 모으고 잔여물은 처음에 사용한 만큼의 70% 에탄올을 다시 첨가하여 처음 단계를 반복하는 과정을 거쳐 2회 추출한 것을 모아 여과지(Advantec No. 6)로 여과한 다음, 회전진공농축기(EYELA, CCA-110, Tokyo, Japan)를 이용하여 용매를 제거하며 농축하고, 동결건조하였다(5 내지 7일, 20 torr, rack temp. －45℃, trap temp. －70℃). 이렇게 얻어진 가죽나무 에탄올 추출물의 건조분말은 실험을 시작하기 전까지 －70℃ deep freezer에 보관하였다.
시료에 사이토카인이 생성되어 존재하면 색상의 변화가 나타나므로, 이 변화를 통해 사이토카인(TNF-α와 IL-1β) 생성량을 측정하였다.
상층액 20 μL와 Quanti blue(InvivoGen, USA) 시약 200 μL를 혼합하여 암실에서 10분 반응시킨 후 microplate reader(SpectraMax M2)를 이용하여 650 nm에서 흡광도를 측정하였다. 양성대조군은 LPS(lipopolysaccharide, Escherichia coli O11:B4, Sigma) 100 ng/mL의 농도를 처리한 것으로 사용하였으며, LPS를 처리하지 않은 것을 음성 대조군으로 사용하였다.
Detection antibody 용액을 넣어 항체와 반응시킨 후, Avidin과 결합된 Horseradish Peroxidase(HRP) 효소를 넣어 상온에서 15분 반응시켰다. 이 후, HRP 효소에 대한 기질로 TMB 용액을 넣어 반응시켜 색상의 변화를 확인하였다. 시료에 사이토카인이 생성되어 존재하면 색상의 변화가 나타나므로, 이 변화를 통해 사이토카인(TNF-α와 IL-1β) 생성량을 측정하였다.
사람에게 유익한 기능을 하는 프로바이오틱스는 생균에서뿐만 아니라, 열로 사멸된 유산균(사균)을 경구 투여하여도 면역증강 활성에 기능을 하는 것으로 알려져 있다(Yoshitaka 등 2006). 이에 본 실험에서는 사균 형태의 유산균(killed pro- biotics)과 함께 가죽나무(Ailantias altissima) 추출물을 혼합 처리하여 면역활성을 비교하였다. Fig.
이후 실험을 위하여 추출물 분말은 DMEM 배지로 10, 50, 100, 500 μg/mL 농도로 맞추어 시료 추출물을 조제하여 사용하였다.
본 실험에서 면역활성을 평가하기 위해 사용된 가죽나무(Ailantias altissima)는 국내산으로 수원지역 로컬마켓에서 구입하여 사용하였다. 추출물 제조에 앞서 동결 건조기(IlshinLab Co., Ltd, Korea)를 이용하여 동결 건조 과정(5~7 days, 20torr, rack temp. －45℃, trap temp. －70℃)을 거친 후 분쇄하여 분말 형태로 제조하였다.

대상 데이터

가죽나무 에탄올 추출물과 유산균과 혼합하여 면역 활성을 평가하기 위해 사용된 Weissella cibaria JW15(KACC 91811P)와 Lactobacillus plantarum 4-25(KACC 91936P) 분리균주는 충북대학교 수의과대학에서 분양받아 실험에 사용하였으며, 선행연구(Noh GM 2015)에서 프로바이오틱 기능과 면역활성을 가진 유산균으로 선발되었는데, 이번 실험의 비교균주로 사용하였다. Lactobacillus rhamnosus GG는 상업용 균주로서 면역 기능성을 보유한 균주로 잘 알려져 있어 이번 실험에 대조군 균주로 사용하였다. 상기 균주들은 4℃에서 냉장 보관하면서 유산균 증식용 배지인 lactobacilli MRS broth(Difco,USA)에서 2주마다 계대 배양하였으며, 실험에 사용 전까지 멸균된 50% glycerol를 넣은 배지에 균체를 현탁하여 －70 ℃의 deep freezer에 보관하였다.
가죽나무 에탄올 추출물과 유산균과 혼합하여 면역 활성을 평가하기 위해 사용된 Weissella cibaria JW15(KACC 91811P)와 Lactobacillus plantarum 4-25(KACC 91936P) 분리균주는 충북대학교 수의과대학에서 분양받아 실험에 사용하였으며, 선행연구(Noh GM 2015)에서 프로바이오틱 기능과 면역활성을 가진 유산균으로 선발되었는데, 이번 실험의 비교균주로 사용하였다. Lactobacillus rhamnosus GG는 상업용 균주로서 면역 기능성을 보유한 균주로 잘 알려져 있어 이번 실험에 대조군 균주로 사용하였다.
본 실험에서 면역활성을 평가하기 위해 사용된 가죽나무(Ailantias altissima)는 국내산으로 수원지역 로컬마켓에서 구입하여 사용하였다. 추출물 제조에 앞서 동결 건조기(IlshinLab Co.
이번 실험에 사용된 RAWBlueTM 세포는 NF-κB/AP-1 reporter cell line(RAW-BlueTM cells,InvivoGen, USA)으로 mouse RAW 264.7 macrophages에서 유래된 세포로 NF-κB/AP-1-inducible SEAP reporter 유전자를 가지고 있어 면역반응에 의해 자극되면 활성화되어 지시약 (Quanti blue)에 의해 색변화가 일어나 활성화 여부를 판단할 수 있다(Xie 등 2011).

데이터처리

각 실험구 간의 유의성(p<0.05) 검증을 위해 통계적 분석은 SAS(Statistical Analysis System program, SAS Institute.,Cary, NC, USA) 프로그램을 이용하여 대조군과 LPS 처리군대비 시료 처리 효과는 student t-test 결과에 따라 유의성을 제시하였다.
본 연구의 실험결과들은 각 처리구 시료에 대하여 3회 반복 측정하여 이루어졌으며, 모두 평균값±표준편차로 나타내었다.

이론/모형

RAW-BLUE cells(1×10⁵) in 96-well plates were incubated with and without indicated various concentrations (10, 50, 100, 500 μg/mL) of Ailantias altissima ethanol extract for 24 hr. Cell viability was estimated by the MTT assay.
RAW Blue^TM 세포의 생존율은 3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide(MTT, Sigma-Aldrich Co.,St. Louis, MO, USA) 환원 방법을 이용하여 측정하였다(Je 등 2009). MTT에 의한 세포 성장률의 측정은 살아있는 세포의 미토콘드리아에 있는 탈수소 효소작용에 의하여 노란색의 수용성 기질인 MTT tetrazolium이 청자색을 띄는 비수용성의 MTT formazan [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide]으로 환원되는 정도를 측정하는 검사법으로 이 파장에서 측정된 흡광도는 살아있고 대사가 왕성한 세포의 농도를 반영하는 것으로 알려져 있다(Mosmann T 1983).

성능/효과

3가지 균주를 가죽나무 추출물과 혼합한 결과에서도 마찬가지로 추출물 첨가 농도가 낮을수록 농도 의존적으로 NO 생성량이 증가하는 것을 확인하였는데, Lactobacillus plantarum 4-25 균주는 나머지 두 균주와 달리 LPS 무처리군보다 더 낮은 생성량을 보였다. 반면, Weissella cibaria JW15와 Lacto- bacillus rhamnosus GG는 추출물의 첨가 비율이 가장 낮은 1:0.
IL-1β 생성량은 Lacto- bacillus rhamnosus GG 사균과의 혼합에서는 1:0.25 비율로 처리하였을 때 높은 값을 나타내었고, 가죽나무 추출물 단독 처리와 유사한 수준을 나타내었지만, 나머지 혼합군에서는 IL-1β가 검출되지 않았다.
LPS를 처리한 경우에 비처리군과 가죽나무 추출물 시료보다 높은 활성을 나타냄을 확인하였으며, 가죽나무 추출물 단독 처리보다 유산균(live probiotics)과 혼합해서 처리하였을 때 NF-κB 활성능이 높게 나타났다.
Lactobacillus plantarum 4-25 균주와 가죽나무 추출물을 혼합한 경우에는 TNF-α 생성량 증가 효과는 나타나지 않았으며, Lactobacillus rhamnosus GG 균주와 가죽나무 추출물을 혼합한 경우, 1:0.5 혼합비율일 때 TNF-α 생성량이 유의적으로 높았으나 효과는 크지 않았다.
Lactobacillus rhamnosus GG 균주와 가죽나무 추출물을 혼합한 경우, TNF-α 생성량은 LPS 처리군과 비슷한 수준을 나타내었지만, IL-1β 생성량은 Lactobacillus rhamnosus GG 사균과의 혼합에서는 유일하게 생성량을 나타내었다.
NF-κB 활성 평가에서는 유산균과 가죽나무 추출물을 1:0.25 비율로 혼합해서 처리하였을 때 추출물을 단독 처리하였을 때보다 NF-κB 활성능이 증가하였는데, 생균보다 사균과 함께 처리하였을 때 그 값이 더 높았다.
Nitric oxide(NO) 생성량은 가죽나무 에탄올 추출물의 단독처리에 의해 5.46±0.06 μM/mL로 LPS 처리 대조군(5.73±0.06μM/mL)과 유사하게 가장 높은 값을 보였지만, 혼합 처리군에서도 Weissella cibaria JW15와 Lactobacillus rhamnosus GG등 사균과 가죽나무 추출물을 1:0.25 비율로 처리하였을 때만 대조군보다 높은 생성량을 보였다.
TNF-α와 IL-1β 등 사이토카인 생성량에서는 가죽나무 추출물 단독처리군보다 유산균들과의 혼합처리군에서 모두 높은 값을 나타내었는데, 특히 Weissella cibaria JW15 균주를 추출물과 혼합한 경우에만 LPS 처리군보다 높은 TNF-α 활성을 보였고, 생균과 사균 간의 큰 차이 없이 1:0.25 비율로 혼합 시 가장 높은 생성량을 보였다.
Weissella cibaria JW15 생균을 가죽나무 추출물과 혼합한 경우, LPS 처리군보다 높은 TNF-α 활성을 보였으며, 특히 생균과 추출물의 혼합비율이 낮을수록 농도 의존적으로 높은 값을 나타내었다.
plantarum 균주를 열처리를 통해 사멸시켜 TNF-α 생성량을 측정한 연구 결과에서 104 CFU/mL 수준으로 처리하였을 때 유의적으로 증가하여 본 실험과 유사한 결과를 나타내었다.
가죽나무 에탄올 추출물에 의한 대식세포 증식에 미치는 영향을 살펴본 결과, 10~500 μg/mL 농도 범위로 처리하였을 때 100 μg/mL 농도에서만 대식세포가 활성화되어 높은 세포증식률을 나타내었다.
가죽나무 추출물을 유산균(live probiotics)과 혼합하여 처리한 결과는 LPS 처리, LPS 무처리, 가죽나무 추출물 단독처리했을 때보다 모두 낮은 NO 함량을 나타내었다. 가죽나무 추출물만 처리하면 대조군에 비해 NO 생성량이 높아져 활성을 나타내지만, 추출물과 유산균의 혼합처리 시 NO의 생성량을 크게 줄여 유산균이 NO 생성량을 낮추는데 관여한 것으로 사료된다.
그 결과, 가죽나무 에탄올 추출물은 10, 50, 100 μg/mL에서는 세포에 대한 독성은 보이지 않았으며, 100 μg/mL 농도에서 처리하였을 때 대식세포가 활성화되어 세포 증식률이 증가하는 결과를 나타내었으며, 500 μg/mL 농도로 처리한 경우에 세포증식률이 43%로 낮아 세포 독성을 나타내었다.
3가지 균주를 가죽나무 추출물과 혼합한 결과에서도 마찬가지로 추출물 첨가 농도가 낮을수록 농도 의존적으로 NO 생성량이 증가하는 것을 확인하였는데, Lactobacillus plantarum 4-25 균주는 나머지 두 균주와 달리 LPS 무처리군보다 더 낮은 생성량을 보였다. 반면, Weissella cibaria JW15와 Lacto- bacillus rhamnosus GG는 추출물의 첨가 비율이 가장 낮은 1:0.25(killed probiotics: AA extracts)에서는 LPS 무처리군보다는 높고, LPS 처리군과 추출물 단독 처리군보다는 낮은 NO 생성능을 보였다. Kim 등(2018)의 밀누룩에서 분리한 유산균을 열처리하면 사멸시킨 사균을 이용하여 NO를 측정해 본 결과, 유산균의 농도가 높을수록 NO가 증가하는 경향을 보여 본 실험에서 추출물양이 적을수록 높은 값을 나타낸 것은 대식세포에 대한 유산균의 자극이 많아져 NO 생성량이 증가한 것으로 사료된다.
가죽나무 추출물만 처리하면 대조군에 비해 NO 생성량이 높아져 활성을 나타내지만, 추출물과 유산균의 혼합처리 시 NO의 생성량을 크게 줄여 유산균이 NO 생성량을 낮추는데 관여한 것으로 사료된다. 이번 실험에서도 생균과 가죽나무 추출물의 농도가 낮을수록 농도 의존적으로 점차 생성량이 높아졌으나, 균주별로 차이가 크게 나타나지 않았다.
추출물과 사균의 혼합으로 LPS 처리군보다는 낮으나, 생균의 혼합보다 높은 활성능을 나타내었으며, Weissella cibariaJW15와 Lactobacillus plantarum 4-25 균주는 추출물의 혼합비율이 낮을수록 농도 의존적으로 활성능이 높게 나타났다. Weissella cibaria JW15의 경우는 Lee HC(2015)의 연구를 통해 사람의 말초혈액 단핵세포(PBMC)에 생균 형태로 처리하였을 때도 NF-κB, ERK, p38 및 JNK 등 여러 신호전달 경로를 활성화 시킨다고 보고하여 면역기능을 보유한 것을 확인할 수 있었다.
25 비율로 혼합해서 처리하였을 때 추출물을 단독 처리하였을 때보다 NF-κB 활성능이 증가하였는데, 생균보다 사균과 함께 처리하였을 때 그 값이 더 높았다. 특히 Lactobacillus plantarum 4-25 사균과 추출물을 1:0.25 비율로 혼합 시 가장 높은 활성능을 나타내었다.

후속연구

종합적으로 살펴보면 가죽나무 에탄올 추출물과 유산균주와의 혼합에 의한 면역 활성능을 확인한 결과, 가죽나무 추출물 단독처리보다 유산균과 가죽나무 추출물을 1:0.25 비율로 처리한 혼합물에 의해 높은 면역활성능을 보여, 가죽나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 소재를 활용하여 면역 저하증 예방 및 치료용 등 건강기능식품 개발을 위하여 유용하게 이용될 수 있을 것으로 기대된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	가죽나무(Ailantias altissima)는 무엇인가?	가죽나무(Ailantias altissima)는 소태나무과(Simaroubaceae)의 낙엽성 교목으로서 가중나무라고 불리기도 하며(Lee YS2007a), 가죽나무의 뿌리인 저근백피는 항균, 항바이러스, 소염, 살충 효과가 있는 것으로 알려져 있다(Jeong 등 2003). 한방학적 효능으로는 맛은 쓰고 성질은 서늘하며 열을 내리고습을 없애며, 산후출혈, 장출혈, 위궤양 등의 치료에도 사용하고, 설사와 출혈을 멈추게 하여 지사 및 지혈제로 사용된다(Lee 등 2007).
	가죽나무에 함유된 기능성 성분은 무엇인가?	한방학적 효능으로는 맛은 쓰고 성질은 서늘하며 열을 내리고습을 없애며, 산후출혈, 장출혈, 위궤양 등의 치료에도 사용하고, 설사와 출혈을 멈추게 하여 지사 및 지혈제로 사용된다(Lee 등 2007). 가죽나무에 함유되어 있는 성분은 페놀성 물질인 3,4,5-trimethoxyphenol, p-coumaric acid, vanillin, vanillic acid 등과 5,7-dihydroxychromone-7-neohesperidoside, naringin 등의 flavonoid 화합물(Lee 등 2002), merosin, tannin phlobaphen,ailanthone, amarolide, acetylamarolide 등이 분리 동정되었다(Kim 등 2005). 이들 성분들은 항균성(Hwang 등 2001), 급성 림프성 백혈병에 대한 항암 효과(Lee YS 2007b) 등의 생리학적 활성을 나타내는 연구가 진행되었다.
	가죽나무의 한방적 특징과 효능은 무엇인가?	가죽나무(Ailantias altissima)는 소태나무과(Simaroubaceae)의 낙엽성 교목으로서 가중나무라고 불리기도 하며(Lee YS2007a), 가죽나무의 뿌리인 저근백피는 항균, 항바이러스, 소염, 살충 효과가 있는 것으로 알려져 있다(Jeong 등 2003). 한방학적 효능으로는 맛은 쓰고 성질은 서늘하며 열을 내리고습을 없애며, 산후출혈, 장출혈, 위궤양 등의 치료에도 사용하고, 설사와 출혈을 멈추게 하여 지사 및 지혈제로 사용된다(Lee 등 2007). 가죽나무에 함유되어 있는 성분은 페놀성 물질인 3,4,5-trimethoxyphenol, p-coumaric acid, vanillin, vanillic acid 등과 5,7-dihydroxychromone-7-neohesperidoside, naringin 등의 flavonoid 화합물(Lee 등 2002), merosin, tannin phlobaphen,ailanthone, amarolide, acetylamarolide 등이 분리 동정되었다(Kim 등 2005).

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

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용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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