자소엽(perilla frutescens)은 꿀풀과(Labiatae)에 속하며 널리 알려져 있는 약용 식물이다. 본 연구에서는 자소엽을 물, 열수, 초음파 추출 방법으로 추출하여 항산화 효과를 비교하고 가장 효과적인 추출방법을 제시하고자 한다. 물, 열수, 초음파 처리를 통해 각각의 자소엽 추출물을 제조 하였고, DPPH 라디칼 소거능 및 총 페놀 함량을 통해 항산화 효과를 검증하고, 인간 간세포인 HepG2에 대한 세포 독성효과와 hydrogen peroxide ($H_2O_2$)로 유도된 산화적 스트레스로부터 간세포 보호효과를 3-[4,5-dimethylthiazole-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay로 확인하였다. 자소엽 초음파 추출물은 $5000{\mu}g/mL$농도에서 69.07%의 DPPH 라디칼 소거능을 나타내며 물, 열수 추출물과 비교하여 우수한 항산화 효과를 나타내었다. 또한 총 페놀 함량 측정 결과 $51.60{\pm}1.06mg\;GAE/g$ extract 로서 물, 열수 추출물 보다 높은 총 페놀 함량을 확인하였다. 그러나 산화적 스트레스에 의한 세포 보호효과는 미비하였다. 본 연구를 통해 추출 방법에 따른 항산화 효과의 차이를 확인하였으며, 우수한 항산화 효과를 나타낸 자소엽 초음파 추출물을 이용하여 추가적인 연구가 필요 할 것으로 사료된다.
자소엽(perilla frutescens)은 꿀풀과(Labiatae)에 속하며 널리 알려져 있는 약용 식물이다. 본 연구에서는 자소엽을 물, 열수, 초음파 추출 방법으로 추출하여 항산화 효과를 비교하고 가장 효과적인 추출방법을 제시하고자 한다. 물, 열수, 초음파 처리를 통해 각각의 자소엽 추출물을 제조 하였고, DPPH 라디칼 소거능 및 총 페놀 함량을 통해 항산화 효과를 검증하고, 인간 간세포인 HepG2에 대한 세포 독성효과와 hydrogen peroxide ($H_2O_2$)로 유도된 산화적 스트레스로부터 간세포 보호효과를 3-[4,5-dimethylthiazole-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay로 확인하였다. 자소엽 초음파 추출물은 $5000{\mu}g/mL$농도에서 69.07%의 DPPH 라디칼 소거능을 나타내며 물, 열수 추출물과 비교하여 우수한 항산화 효과를 나타내었다. 또한 총 페놀 함량 측정 결과 $51.60{\pm}1.06mg\;GAE/g$ extract 로서 물, 열수 추출물 보다 높은 총 페놀 함량을 확인하였다. 그러나 산화적 스트레스에 의한 세포 보호효과는 미비하였다. 본 연구를 통해 추출 방법에 따른 항산화 효과의 차이를 확인하였으며, 우수한 항산화 효과를 나타낸 자소엽 초음파 추출물을 이용하여 추가적인 연구가 필요 할 것으로 사료된다.
Perilla frutescens (P. frutescens) is one of evergreen shrubs belonging to the Labiatae and is grown wildly in Korea. This study was carried out to evaluate the anti-oxidative effects of Perilla frutescens Extracts by Extraction Methods (water, heating and sonication). Anti-oxidative effects were me...
Perilla frutescens (P. frutescens) is one of evergreen shrubs belonging to the Labiatae and is grown wildly in Korea. This study was carried out to evaluate the anti-oxidative effects of Perilla frutescens Extracts by Extraction Methods (water, heating and sonication). Anti-oxidative effects were measured using 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity and total phenol content. Cell viability and hepatoprotective effects were identified by 3-[4, 5-dimethylthiazol-2-yl]-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. Among various extracts, P. rutescens extracts by sonication showed the highest DPPH radical scavenging activity at $5000{\mu}g/mL$. Total phenolic content in P. frutescens extracts by sonication was $51.60{\pm}1.06mg\;GAE/g$ extract. However, P. frutescens extracts did not show hepatoprotective effects. This study identified anti-oxidative effects of P. frutescens extracts by sonication, and it would be necessary to perform further studies of P. frutescens extracts by sonication.
Perilla frutescens (P. frutescens) is one of evergreen shrubs belonging to the Labiatae and is grown wildly in Korea. This study was carried out to evaluate the anti-oxidative effects of Perilla frutescens Extracts by Extraction Methods (water, heating and sonication). Anti-oxidative effects were measured using 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity and total phenol content. Cell viability and hepatoprotective effects were identified by 3-[4, 5-dimethylthiazol-2-yl]-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. Among various extracts, P. rutescens extracts by sonication showed the highest DPPH radical scavenging activity at $5000{\mu}g/mL$. Total phenolic content in P. frutescens extracts by sonication was $51.60{\pm}1.06mg\;GAE/g$ extract. However, P. frutescens extracts did not show hepatoprotective effects. This study identified anti-oxidative effects of P. frutescens extracts by sonication, and it would be necessary to perform further studies of P. frutescens extracts by sonication.
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문제 정의
따라서 본 연구에서는 자소엽 추출물을 물, 열수, 초음파 추출 방법에 의해 추출하여 DPPH 라디칼 소거능 시험을 통한 물질 자체의 항산화 효능 및 총 페놀 함량을 측정하고, 인간 간세포 HepG2에 추출물을 처리한 후 세포 독성효과 및산화적 스트레스로부터 세포 보호효과를 농도별로 관찰하여 자소엽 추출물의 가장 효과적인 추출 방법을 제시하고 천연 항산화제 개발을 위한 자료로 활용하고자 한다.
본 연구에서는 자소엽 추출물의 항산화 효과를 바탕으로 하여 간세포에 산화적 스트레스를 유발 하여 세포 보호효과를 확인하였다. 인간 간암세포 주인 HepG2는 항산화 효소를 생산하여 항산화 효과 및 세포 보호효과를 관찰하는데 유용하게 사용되는 세포주이다.
본 연구에서는 한국에 널리 분포하고 있는 자소엽을 물, 열수, 초음파 추출 방법을 통해 추출 하여 추출 방법에 따른 항산화 효과를 비교하고 간세포에 대한 세포 보호효과에 대해 알아보았다. 다른 추출 방법에 따라 자소엽의 추출 수율의 차이를 확인하였고 열수>초음파>물 순서로 높은 추출 수율을 확인하였다.
가설 설정
1) PEⅠis Perilla frutescens extracts by water., PEⅡ is Perilla frutescens extracts by hot water.
제안 방법
간세포에서의 자소엽 추출물의 산화적 스트레 스에 따른 세포 보호효과를 확인하기 위해 HepG2 세포에 H2O2 를 처리하여 산화적 스트레 스를 유발한 후, 자소엽 추출물의 세포 보호효과를 측정하였다. 자소엽 물, 열수, 초음파 추출물의 모든 농도에서 세포 보호효과는 확인 할 수없었다.
배지를 제거하고 DMSO를 200 µL 분주하고 560 nm에서 흡광도를 측정하였다(Biotrak Ⅱ Plate reader, Amersham Life Science, UK).
세포를 1 X 10 5 개 /mL 농도로 96 well에 100 µL 분주하고 37℃, 5% CO2 에서 24시간 배양하고 각각의 물질을 해당 세포에 농도별로(25, 50, 100, 200, 400 ㎍ /mL) 100 µL 분주하고 37℃, 5% CO2 에서 48 시간 배양하였다.
세포를 1 X 10 5 개/mL 농도로 96 well에 100 µL 분주하고 37℃, 5% CO2 에서 24시간 배양하고 각각의 물질을 해당 세포에 농도별로(25, 50, 100, 200, 400 ㎍/mL) 100 µL 분주하고 37℃, 5% CO 2 에서 72시간 배양하였다.
자소엽 물 추출물(PEⅠ), 열수 추출물(PEⅡ), 초음파 추출물(PEⅢ)을 이용하여 총 페놀 함량을 확인하였다. 세 번의 반복 실험을 통해 함량을 분석해 본 결과 물 추출물(PEⅠ)은 42.
자소엽 물 추출물을 얻기 위하여 자소엽 분말을 정제수로 가해 24시간 이후 추출하였고, 자소엽 열수 추출물을 얻기 위하여 자소엽 분말을 정제수로 가해 100℃에서 끓인 후 24시간 이후 추출하였으며, 자소엽 초음파 추출물을 얻기 위하여 자소엽 분말을 정제수를 가한 후 1시간 음파 처리(Hwashin, Korea)를 하고 24시간 이후 추출하였다. 세 가지 방법을 이용한 추출액을 모아 여과지(Chemlab, Spain)로 여과시켜 얻은 여액을 감압 농축(Heidolph, Germany)하여 각각의 용매를 제거 시킨 후 동결건조(Christ, Germany) 한후 분석용 시료로 사용하였다.
자소엽 추출물의 간세포에 대한 세포 독성효과를 측정하기 위해 인간 간세포 HepG2를 이용하여 자소엽 추출물을 농도 별로 처리한 후 72시간 동안 세포 독성을 측정하였다. 추출물을 처리하지 않은 군의 생존율은 100%로 보았을 때, 간세포 에서 자소엽 물 추출물은 200 ㎍/mL 이하의 농도에서 세포 독성을 나타내지 않았으며, 자소엽 열수 추출물은 100 ㎍/mL 이하의 농도에서 세포 독성을 나타내지 않았으며, 자소엽 초음파 추출물은 100 ㎍/mL 이하의 농도에서 세포 독성을 나타내지 않았다.
자소엽 추출물의 간세포에 대한 세포 독성효과를 확인하기 위해 3-[4, 5-dimethylthiazol-2-yl]-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay를 통해 확인하였다. 세포를 1 X 10 5 개/mL 농도로 96 well에 100 µL 분주하고 37℃, 5% CO2 에서 24시간 배양하고 각각의 물질을 해당 세포에 농도별로(25, 50, 100, 200, 400 ㎍/mL) 100 µL 분주하고 37℃, 5% CO 2 에서 72시간 배양하였다.
자소엽 추출물의 산화적 스트레스에 따른 간세 포에 대한 세포 보효효과를 확인하기 위해 MTT assay를 변형하여 확인하였다. 세포를 1 X 10 5 개 /mL 농도로 96 well에 100 µL 분주하고 37℃, 5% CO2 에서 24시간 배양하고 각각의 물질을 해당 세포에 농도별로(25, 50, 100, 200, 400 ㎍ /mL) 100 µL 분주하고 37℃, 5% CO2 에서 48 시간 배양하였다.
추출 방법에 따른 자소엽 추출물의 항산화 효과를 DPPH 라디칼 소거능 시험을 통해 확인하 였다. 자소엽 추출물에서 항산화 효과를 농도별로 확인해 본 결과 농도 의존적으로 항산화 효과를 확인하였다.
대상 데이터
5 mg/mL 농도인 MTT 시약 (Ambresco, USA)을 20 µL 분주하여, 37℃, 5% CO2 에서 2시간 배양하였다.
5 mg/mL 농도인 MTT 시약(Ambresco, USA)을 20 µL 분주하 고, 37℃, 5% CO2 에서 2시간 배양하였다.
본 실험에 사용한 세포주는 인간 간세포인 HepG2로 한국세포주은행(KCLB, Korea)에서 분양 받아 사용하였다. 세포 배지로는 Dulbecco's Modified Eagle's Medium (Hyclone, USA)를 사용하였고, 10% fetal bovine serum (Hyclone, USA), 0.
자소엽 물 추출물을 얻기 위하여 자소엽 분말을 정제수로 가해 24시간 이후 추출하였고, 자소엽 열수 추출물을 얻기 위하여 자소엽 분말을 정제수로 가해 100℃에서 끓인 후 24시간 이후 추출하였으며, 자소엽 초음파 추출물을 얻기 위하여 자소엽 분말을 정제수를 가한 후 1시간 음파 처리(Hwashin, Korea)를 하고 24시간 이후 추출하였다. 세 가지 방법을 이용한 추출액을 모아 여과지(Chemlab, Spain)로 여과시켜 얻은 여액을 감압 농축(Heidolph, Germany)하여 각각의 용매를 제거 시킨 후 동결건조(Christ, Germany) 한후 분석용 시료로 사용하였다.
세포 배지로는 Dulbecco's Modified Eagle's Medium (Hyclone, USA)를 사용하였고, 10% fetal bovine serum (Hyclone, USA), 0.1mM non-essential amino acids (GIBCO, USA), penicillin-streptomycin(GIBCO, USA)을 사용하여 37℃, 5% CO 2 에서 배양하였다.
이후에 750 nm에서 흡광도를 확인하였다(Spectronic Genesys 5, Milton Roy Company, USA). 총 페놀 함량 측정을 위해 표준 물질로 gallic acid (Sigma-Aldrich, USA)를 사용하였다. 측정값은 3 번의 반복 실험을 통해 평균값과 표준편차로 나타내었다.
데이터처리
본 연구의 실험 결과는 평균±표준편차로 나타내었으며, 유의성 검사는 SPSS (Statistical Package for the Social Science, Chicago, USA) 통계 프로그램으로 one-way ANOVA test를 실시하여 각 군의 유의성을 p<0.05 수준에서 검정하였다.
이후에 550 nm 에서 흡광도 측정을 하였다(Biotrak Ⅱ Plate reader, Amersham Life Science, UK). 측정값은 3번의 반복 실험을 통해 평균값과 표준편차로 나타내었다.
이후에 550 nm 에서 흡광도 측정을 하였다(Biotrak Ⅱ Plate reader, Amersham Life Science, UK). 측정값은 3번의 반복 실험을 통해 평균값과 표준편차로 나타내었다.
이론/모형
자소엽 추출물의 DPPH 라디칼 소거능은 Lee 등의 방법에 따라 실행하였다[18]. 용매에 200, 1000, 5000 μg/mL 농도로 희석한 자소엽 추출 물을 준비하여 96 well plate에 10 μL씩 분주하고 용매에 200 μM 농도로 제조한 DPPH (Sigma-Aldrich, USA)를 190 μL를 혼합하여, 37℃에서 30분 동안 반응시킨다.
자소엽 추출물의 추출 수율은 물, 열수, 초음파 방법에 따라 차이를 나타내었다. 물 추출물은 0.
총 페놀 함량 측정 방법은 Folin-Denis 방법으로 확인하였다. 1000 μg/mL 농도의 자소엽 추출물과 증류수(1650 μL)와 100 μL Folin-Denis 시약을 혼합하여 5 분 뒤 1 N Sodium Carbonate 200 mL를 추가하여 2시간 동안 실온에서 반응시킨다.
성능/효과
DPPH는 안정한 자유 라디칼로서 항산화 물질 확인을 위해 많이 이용되는 물질 로서 자소엽 물, 열수, 초음파 추출물의 DPPH 라디칼 소거능을 비교 한 결과, 세 가지 추출물 모두 농도 의존적으로 DPPH 라디칼 소거능을 확인하며 효과적인 항산화능을 가지는 성분이 존재하는 것을 확인하였고, 항산화 효과는 초음파> 온수>냉수 추출물 순서로 높은 항산화 효과를 확인하였다.
다른 추출 방법에 따라 자소엽의 추출 수율의 차이를 확인하였고 열수>초음파>물 순서로 높은 추출 수율을 확인하였다.
자소엽 추출물의 추출 방법에 따른 차이는 열수 및 초음파 추출물과 비교하여 물추출물에서 낮은 독성을 확인하였다. 대조군으로 사용한 quercetin은 200 ㎍/mL 이하의 농도에서 세포 독성을 나타내지 않음을 확인하였다(Table 4).
07%의 항산화 효과를 확인하였다. 대조군으로 사용한 quercetin은 200, 1000, 5000 ㎍/mL농도에서 모두 60% 이상의 DPPH 라디칼 소거능을 나타내며 높은 항산화 효과를 확인하였다. 추출 방법에 따른 항산화 효과의 차이는 초음파>열수>냉수 추출물 순서로 높은 항산화 효과를 관찰 할 수 있었다(Table 2).
이러한 결과는 항산화 효과를 나타내는 물질과 세포 보호효과를 나타내는 물질이 일치하지 않음을 확인 하였다. 대조군으로 사용한 quercetin은 농도 의존적으로 세포 보호효과를 확인하였고, 50 ㎍/mL 농도에서는 약 30%, 100 ㎍/mL 농도에서는 약 58%의 세포 생존능을 확인하였다(Table 5).
물 추출물은 0.29%, 열수 추출물은 0.78%, 초음파 추출물은 0.69%의 추출 수율을 확인하였고, 열수>초음파> 물 순서로 높은 추출 수율을 나타내었다(Table 1).
본 연구를 통해 동일한 시료라도 추출 방법에 따라 추출 수율 및 항산화 효과가 차이가 있음을 확인하였다. 따라서 이를 기초로 하여 높은 활성을 나타낸 초음파 추출 방법을 이용하여 추출 공정에 대한 추가적인 연구가 필요할 것으로 사료 되며 자소엽 추출물의 항산화 효과뿐만 아니라 항바이러스 및 항알러지 등의 방면에서도 효과를 확인하여 또 다른 효과를 기대할 수 있을 것이다.
세 번의 반복 실험을 통해 함량을 분석해 본 결과 물 추출물(PEⅠ)은 42.80±1.06 mg GAE/g extract, 열수 추출물(PEⅡ)은 46.53±0.23 mg GAE/g extract, 초음파 추출물 (PEⅢ)은 51.60±1.06 mg GAE/g extract를 확인 할 수 있었다.
다른 추출 방법에 따라 자소엽의 추출 수율의 차이를 확인하였고 열수>초음파>물 순서로 높은 추출 수율을 확인하였다. 열수 및 초음파 추출물은물 추출물과 비교하여 2배 이상의 높은 추출 수율을 나타내었다. DPPH는 안정한 자유 라디칼로서 항산화 물질 확인을 위해 많이 이용되는 물질 로서 자소엽 물, 열수, 초음파 추출물의 DPPH 라디칼 소거능을 비교 한 결과, 세 가지 추출물 모두 농도 의존적으로 DPPH 라디칼 소거능을 확인하며 효과적인 항산화능을 가지는 성분이 존재하는 것을 확인하였고, 항산화 효과는 초음파> 온수>냉수 추출물 순서로 높은 항산화 효과를 확인하였다.
자소엽 물, 열수, 초음파 추출물의 모든 농도에서 세포 보호효과는 확인 할 수없었다. 이러한 결과는 항산화 효과를 나타내는 물질과 세포 보호효과를 나타내는 물질이 일치하지 않음을 확인 하였다. 대조군으로 사용한 quercetin은 농도 의존적으로 세포 보호효과를 확인하였고, 50 ㎍/mL 농도에서는 약 30%, 100 ㎍/mL 농도에서는 약 58%의 세포 생존능을 확인하였다(Table 5).
자소엽 추출물에서 항산화 효과를 농도별로 확인해 본 결과 농도 의존적으로 항산화 효과를 확인하였다. 자소엽 물 추출물은 200, 1000, 5000 ㎍/mL농도에서 각각 13.43, 33.18, 46.23%의 항산화 효과를 나타내었고, 자소엽 열수 추출물은 200, 1000, 5000 ㎍/mL농도에서 9.07, 21.95, 58.26%의 항산화 효과를 나타내었 고, 자소엽 초음파 추출물은 200, 1000, 5000 ㎍ /mL농도에서 19.92, 34.66, 69.07%의 항산화 효과를 확인하였다. 대조군으로 사용한 quercetin은 200, 1000, 5000 ㎍/mL농도에서 모두 60% 이상의 DPPH 라디칼 소거능을 나타내며 높은 항산화 효과를 확인하였다.
추출 방법에 따른 자소엽 추출물의 항산화 효과를 DPPH 라디칼 소거능 시험을 통해 확인하 였다. 자소엽 추출물에서 항산화 효과를 농도별로 확인해 본 결과 농도 의존적으로 항산화 효과를 확인하였다. 자소엽 물 추출물은 200, 1000, 5000 ㎍/mL농도에서 각각 13.
추출물을 처리하지 않은 군의 생존율은 100%로 보았을 때, 간세포 에서 자소엽 물 추출물은 200 ㎍/mL 이하의 농도에서 세포 독성을 나타내지 않았으며, 자소엽 열수 추출물은 100 ㎍/mL 이하의 농도에서 세포 독성을 나타내지 않았으며, 자소엽 초음파 추출물은 100 ㎍/mL 이하의 농도에서 세포 독성을 나타내지 않았다. 자소엽 추출물의 추출 방법에 따른 차이는 열수 및 초음파 추출물과 비교하여 물추출물에서 낮은 독성을 확인하였다. 대조군으로 사용한 quercetin은 200 ㎍/mL 이하의 농도에서 세포 독성을 나타내지 않음을 확인하였다(Table 4).
자소엽의 물, 열수, 초음파 추출물에서 각각 42.8 46.5 51.6 mg GAE/g extract의 총 페놀 함량을 확인하였으며, 본 결과는 DPPH 라디칼 소거능과 연관성 있는 결과를 나타내며 초음파>온수> 냉수 추출물 순서로 높은 총 페놀 함량을 확인하였다.
추출 방법에 따른 총 페놀 함량의 차이는 초음파>열수>냉수 추출물 순서로 높은 총 페놀 함량을 확인 할 수 있었다(Table 3).
추출 방법에 따른 항산화 효과의 차이는 초음파>열수>냉수 추출물 순서로 높은 항산화 효과를 관찰 할 수 있었다(Table 2).
자소엽 추출물의 간세포에 대한 세포 독성효과를 측정하기 위해 인간 간세포 HepG2를 이용하여 자소엽 추출물을 농도 별로 처리한 후 72시간 동안 세포 독성을 측정하였다. 추출물을 처리하지 않은 군의 생존율은 100%로 보았을 때, 간세포 에서 자소엽 물 추출물은 200 ㎍/mL 이하의 농도에서 세포 독성을 나타내지 않았으며, 자소엽 열수 추출물은 100 ㎍/mL 이하의 농도에서 세포 독성을 나타내지 않았으며, 자소엽 초음파 추출물은 100 ㎍/mL 이하의 농도에서 세포 독성을 나타내지 않았다. 자소엽 추출물의 추출 방법에 따른 차이는 열수 및 초음파 추출물과 비교하여 물추출물에서 낮은 독성을 확인하였다.
후속연구
본 연구를 통해 동일한 시료라도 추출 방법에 따라 추출 수율 및 항산화 효과가 차이가 있음을 확인하였다. 따라서 이를 기초로 하여 높은 활성을 나타낸 초음파 추출 방법을 이용하여 추출 공정에 대한 추가적인 연구가 필요할 것으로 사료 되며 자소엽 추출물의 항산화 효과뿐만 아니라 항바이러스 및 항알러지 등의 방면에서도 효과를 확인하여 또 다른 효과를 기대할 수 있을 것이다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
자소엽 오일의 유익한 점은?
자소엽의 항균 효과[14], 항산화 효과[15], 항염증효과[16] 등 생리 활성에 대한 연구가 보고 되어있다. 또한 자소엽 오일은 건강한 노화와 학습 성과에 유익한 것으로 알려져 있다[17]. 그러나 생리 활성이 있는 것으로 보고되어진 자소엽 추출물은 추출 방법에 따른 항산화 효과에 관한 연구는 현재까지 미흡한 실정이다.
활성 산소종이 인체에 미치는 해로운 영향은?
예를 들어 superoxide anion, hydroxy radical, hydrogen peroxide와 같은 활성 산소종이 존재하는데, 최근 환경오염 물질, 유기 용매 및 담배 연기 등과 같은 외부 요인 또는 다양한 내부 요인으로 인해 활성 산소종이 과도하게 생성된다[2]. 이들은 지질 과산화물 생산을 유도하여 세포막을 손상시키며 세포의 항산화 레벨을 감소시켜 세포에서 항산화 작용과 산화적 생산의 불균형을 초래하여 인체에 해로운 영향을 미친다[3.4].
자소엽이란?
자소엽(Perilla frutescens)은 꿀풀과(Labiatae)에 속하는 음식 염료의 하나로 중국, 일본, 한국에서 가장 인기 있는 약용 식물로 자소엽의 잎은 해독 제, 진해제, 항생제, 해열제로 사용되며 특히 중국의 전통 장 질환 및 알레르기 치료의 민간요법 으로 사용된다[13]. 자소엽의 항균 효과[14], 항산화 효과[15], 항염증효과[16] 등 생리 활성에 대한 연구가 보고 되어있다.
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