[논문]니파야자(Nypa fruticans Wurmb) 싹 추출물 및 분획물의 항산화, 세포 보호 및 항균 효과에 관한 평가

신혁수; 이윤주; 김지웅; 송바름; 이상래; 박수남

니파야자(Nypa fruticans Wurmb) 싹 추출물 및 분획물의 항산화, 세포 보호 및 항균 효과에 관한 평가
Evaluation of Antioxidant, Cytoprotective and Antimicrobial Activities of the Extract and Fractions Obtained from Young Shoots of Nypa Fruticans Wurmb 원문보기

생약학회지, v.49 no.2, 2018년, pp.155 - 164

신혁수 (서울과학기술대학교 정밀화학과, 화장품종합기술연구소) , 이윤주 (서울과학기술대학교 정밀화학과, 화장품종합기술연구소) , 김지웅 (서울과학기술대학교 정밀화학과, 화장품종합기술연구소) , 송바름 (서울과학기술대학교 정밀화학과, 화장품종합기술연구소) , 이상래 (서울과학기술대학교 정밀화학과, 화장품종합기술연구소) , 박수남 (서울과학기술대학교 정밀화학과, 화장품종합기술연구소)

Abstract ▼ AI-Helper

Nypa fruticans Wurmb is a species of palm, which is widely distributed in the mangrove forest of Southeast Asia. Various parts of N. fruticans has been used as a traditional medicinal plant. However, the physiological activities of N. fruticans has not yet been clarified well. Therefore, in this stu...

주제어

표/그림 (9)

$Fig. 1. Free radical scavenging activities of the extract and fractions obtained from young shoots of N. fruticans Wurmb and that of L-ascorbic acid and (+)-α-tocopherol.$ 그림 Fig. 1. Free radical scavenging activities of the extract and fractions obtained from young shoots of N. fruticans Wurmb and that of L-ascorbic acid and (+)-α-tocopherol.
$Table I. Weight yields and total phenolic contents of the extract and fractions obtained from young shoots of N. fruticans Wurmb. Values for total phenolic contents are presented as mean ± SD (n = 3).$ 표 Table I. Weight yields and total phenolic contents of the extract and fractions obtained from young shoots of N. fruticans Wurmb. Values for total phenolic contents are presented as mean ± SD (n = 3).
$Fig. 2. Reactive oxygen species (ROS) scavenging activities of the extract and fractions obtained from young shoots of N. fruticans Wurmb compared to that of L-ascorbic acid, as determined by luminol-dependent chemiluminescence assay in a Fe3+-EDTA/H2O2 system.$ 그림 Fig. 2. Reactive oxygen species (ROS) scavenging activities of the extract and fractions obtained from young shoots of N. fruticans Wurmb compared to that of L-ascorbic acid, as determined by luminol-dependent chemiluminescence assay in a Fe³⁺-EDTA/H₂O₂ system.
그림 Fig. 3. Linearized pseudo first-order kinetic profiles corresponding to relative photo-oxidation of DPBF induced by single oxygen in the presence of different samples at a concentration of 300 μg/mL.
표 Table II. Kinetic parameters of pseudo-first order kinetic model for relative photo-oxidation of DPBF in the presence of different samples at a concentration of 300 μg/mL. Values are presented as mean ± SD (n = 5)
$Fig. 4. Effect of the extract and fractions obtained from young shoots of N. fruticans Wurmb and (+)-α-tocopherol on erythrocytes viability.$ 그림 Fig. 4. Effect of the extract and fractions obtained from young shoots of N. fruticans Wurmb and (+)-α-tocopherol on erythrocytes viability.
$Table III. Cytoprotective effects of extract and fractions obtained from young shoots of N. fruticans Wurmb, and that of (+)-α-tocopherol against 1O2-induced photohemolysis in erythrocytes. Values are presented as mean ± SD (n = 3).$ 표 Table III. Cytoprotective effects of extract and fractions obtained from young shoots of N. fruticans Wurmb, and that of (+)-α-tocopherol against ¹O₂-induced photohemolysis in erythrocytes. Values are presented as mean ± SD (n = 3).
$Fig. 5. Time-dependent photohemolysis of erythrocytes induced by singlet oxygen in the extract and fractions obtained from young shoots of N. fruticans Wurmb at a concentration of 5.00 μg/mL.$ 그림 Fig. 5. Time-dependent photohemolysis of erythrocytes induced by singlet oxygen in the extract and fractions obtained from young shoots of N. fruticans Wurmb at a concentration of 5.00 μg/mL.
$Table IV. Antimicrobial activity of extract and fractions obtained from young shoots of N. fruticans Wurmb, and that of methyl paraben against S. aureus, B. subtilis, E. coli, P. aeruginosa, C. albicans, and A. brasiliensis$ 표 Table IV. Antimicrobial activity of extract and fractions obtained from young shoots of N. fruticans Wurmb, and that of methyl paraben against S. aureus, B. subtilis, E. coli, P. aeruginosa, C. albicans, and A. brasiliensis

AI 본문요약
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문제 정의

^31,32)기존의 연구결과와 더불어 식물체의 싹에는 페놀성 화합물 생합성에 관여하는 phenylpropanoid가 다량 존재하기 때문에 니파야자 싹이 우수한 생리 활성을 나타낼 것으로 기대되는바, ^33,34)니파야자 싹의 항산화와 항균 소재로서의 가능성을 확인하였다. 따라서 본연구에서는 니파야자 싹이 다양한 산화적 손상에서 보호 효능을 나타내는지 확인하기 위해 자유 라디칼과 다양한 ROS에 대한 소거 활성을 확인하였고, 이러한 결과를 바탕으로 광노화 메커니즘을 바탕으로 설계된 ¹O₂ 으로 유도된 적혈구 손상에서의 세포에 대한 보호 효능을 확인하였다. 이와 더불어 화장품, 식품 및 의약품에서의 검출이 제한되고 있는 균주를 대상으로 니파야자 싹 추출물과 분획물의 항균 효능을 methyl paraben과 비교하여 평가하였다.

제안 방법

직접 제조한 광 조사 장치는 검은색으로 도색한 50 cm×20 cm ×25 cm 크기의 상자 내부에 시료와 20 W의 형광등이 장착된 형태로, 형광등과 시험관의 거리는 5 cm이다. 15 min 동안 광조사를 한 후, 15 min 간격으로 Vis-spectrometer를 이용하여 700 nm에서의 시료들의 투광도를 측정하여 적혈구의 용혈 정도를 측정하였다. 모든 실험 과정은 20^oC의 암소에서 진행되었다.
지속적으로 빛 조사가 이루어지는 상황에서 rose bengal에 의해 생성되는 ¹O₂의 농도는 일정하기 때문에 DPBF와 ¹O₂ 의 반응에 의해 진행되는 DPBF의 산화 속도는 유사 1차 속도식으로 나타낼수 있다. ^37,41) 이를 이용하여 각 시료 별 속도 상수와 반감 기를 구하여 소거 활성을 비교하였다.
57) 우선 시료에 의한 적혈구에 용혈이 발생하지 않은 농도를 확인하기 위해 30 min 동안 여러 농도(1.25, 2.50, 5.00, 10.00 μg/mL)의 시료를 적혈구 현탁액에 처리하였다.
DPPH Assay를 이용한 자유 라디칼 소거 활성 − 본 실험에서의 양성 대조군으로 대표적인 수용성 항산화제인 L-ascorbic acid와 지용성 항산화제인 (+)-α-tocopherol을 이용 하여 자유 라디칼 소거 활성을 평가하였다(Fig. 1).
이렇게 제조한 균액은 저온배양기에서 48 hr 동안 배양하였고, 배양 후 균이 증식되지 않는 농도를 육안으로 평가하여 MIC로 결정하였다. MBC 및 MFC는 성장이 억제된 wells의 균액을 평판 배지에 도말하여 24 hr 동안 배양 후 colony를 형성하지 않는 최소 농도로 결정하였다.
Singlet Oxygen 소거 활성 평가 − 1O2 소거 활성은 기존의 방법은 변형, 응용하여 측정하였다.
4 mL를 암소에서 10 min 동안 반응시킨 후, UV-Vis spectrometer(Cary 50, Agilent, USA)를 이용하여 517 nm에서의 흡광도를 측정하 였다. 각 농도에서의 자유 라디칼 소거율은 아래의 식을 이용하여 얻었고, 자유 라디칼이 50% 소거되는데 필요한 농도를 구하여 자유 라디칼 소거 활성(free radical scavenging activity, FSC₅₀ )을 비교하였다.
각 시료를 luminometer(6-channel LB9505 LT, Berthold, Germany)에 넣어준 뒤 35oC에서 5 min 동안 인큐베이션 하였고, 150 mM의 H2O2 40 μL를 첨가하였다.
96-well plate에 900 μg/mL의 농도로 제조된 각 시료와 메탄올에 용해시킨 200 μM의 DPBF와 24 μM의 rose bengal 을 각각 100 μL씩 순차적으로 넣어주었다. 그 후 20 W의 형광등이 장착된 광 조사 장치에서 광원에서부터 10 cm의거리에서 빛을 가하여 주었고, 10 s 마다 microplate reader 를 이용하여 420 nm에서의 흡광도를 측정하여 시간에 따른 DPBF의 농도 변화를 확인하였다. 지속적으로 빛 조사가 이루어지는 상황에서 rose bengal에 의해 생성되는 ¹O₂의 농도는 일정하기 때문에 DPBF와 ¹O₂ 의 반응에 의해 진행되는 DPBF의 산화 속도는 유사 1차 속도식으로 나타낼수 있다.
각 시료를 luminometer(6-channel LB9505 LT, Berthold, Germany)에 넣어준 뒤 35^oC에서 5 min 동안 인큐베이션 하였고, 150 mM의 H₂O₂40 μL를 첨가하였다. 그리고 25 min 동안 luminol과 활성산 소의 화학반응에 의해 발생한 발광을 측정하였다. 측정한 발광의 세기로부터 ROS 소거율은 아래의 식을 이용하여 얻었고, ROS가 50% 소거되는데 필요한 농도를 구하여 ROS 소거 활성(reactive oxygen scavenging activity, OSC₅ )을 비교하였다.
그리고 각 well에 3~5×106CFU/ mL로 희석한 균액 20 μL와 배지 160 μL를 주입하여 72.125–10,000 μg/mL 농도 범위에서 시료의 항균 활성을 평가 하였다.
본 연구에서는 50% 에탄올을 이용하여 니파야자 싹에서 에탄올 추출물을 얻었고, 이 추출물에서 물 및 에틸 아세테이트 분획물을 제조하였다. 그리고 제조한 추출물과 분획물 들의 항산화 활성, 세포 보호 효능 및 항균 활성에 관한 평가를 수행하였다. 니파야자 싹 에탄올 추출물 및 물, 에틸아세테이트 분획물은 자유 라디칼과 다양한 형태의 ROS이 대한 높은 소거 활성을 나타냈다 이러한 결과를 바탕으로 피부의 손상 메커니즘을 바탕으로 설계된 적혈구 광용혈 실험을 수행하였고, 추출물과 분획물들은 산화적 손상으로 유도된 적혈구에 대해 뛰어난 세포 보호 효능을 나타냈다.
^13,36,51) 따라서 이러한 발광의 상대적인 세기를 측정하여 항산화제의 ROS 소거 활성을 측정할 수 있다. 본 실험에서는 양성대조군으로 L-ascorbic acid를 이용하여 각 시료의 화학 발광을 50% 저해하는 농도(OSC₅₀)를 통해 ROS 소거 활성을 평가하였다(Fig. 2). 지용성 항산화제인 (+)-α-tocopherol은 이러한 수용성 시스템에서 항산화 효능을 나타내지 않았다 (data not shown).
본 연구에서는 50% 에탄올을 이용하여 니파야자 싹에서 에탄올 추출물을 얻었고, 이 추출물에서 물 및 에틸 아세테이트 분획물을 제조하였다. 그리고 제조한 추출물과 분획물 들의 항산화 활성, 세포 보호 효능 및 항균 활성에 관한 평가를 수행하였다.
brasiliensis는 potato dextrose agar에서 30^oC, 48 hr 조건으로 배양하였다. 시료의 항균 활성은 broth microdilution 방법을 통해 minimum inhibitory concentration(MIC)와 minimum bactericidal concentration(MBC) 및 minimum fungicidal concentration(MFC)를 구하여 평가하였다. 시료는 DMSO에 용해하여 사용하였고, 96-well plate에 연속적으로 2배씩 희석한 시료가 20 μL가 되도록 분주하였다.
이러한 결과를 바탕으로 각 시료의 1O2 으로 유도된 산화적 손상에서 적혈구 세포 보호 효과를 확인하였고, 적혈구가 50% 용혈되는 시간(τ 50 )을 통해 활성을 비교 평가하였다(Table III).
125–10,000 μg/mL 농도 범위에서 시료의 항균 활성을 평가 하였다. 이렇게 제조한 균액은 저온배양기에서 48 hr 동안 배양하였고, 배양 후 균이 증식되지 않는 농도를 육안으로 평가하여 MIC로 결정하였다. MBC 및 MFC는 성장이 억제된 wells의 균액을 평판 배지에 도말하여 24 hr 동안 배양 후 colony를 형성하지 않는 최소 농도로 결정하였다.
이러한 니파야자 싹의 항산화 및 세포 보호 효능은 본 연구진에 의해 보고된 기존에 많은 식물 추출물 및 분획물의 효능과 비교하여도 매우 우수하였다. 이와 더불어 니파야자 추출물 및 분획물들의 항균 활성도 확인하였다. 특히 에틸 아세테이트 분획물은 그람 양성균, 그람 음성균 및 진균 모두에 관해 우수한 항균 활성을 나타내는 것을 확인하였다.
따라서 본연구에서는 니파야자 싹이 다양한 산화적 손상에서 보호 효능을 나타내는지 확인하기 위해 자유 라디칼과 다양한 ROS에 대한 소거 활성을 확인하였고, 이러한 결과를 바탕으로 광노화 메커니즘을 바탕으로 설계된 ¹O₂ 으로 유도된 적혈구 손상에서의 세포에 대한 보호 효능을 확인하였다. 이와 더불어 화장품, 식품 및 의약품에서의 검출이 제한되고 있는 균주를 대상으로 니파야자 싹 추출물과 분획물의 항균 효능을 methyl paraben과 비교하여 평가하였다.
측정한 발광의 세기로부터 ROS 소거율은 아래의 식을 이용하여 얻었고, ROS가 50% 소거되는데 필요한 농도를 구하여 ROS 소거 활성(reactive oxygen scavenging activity, OSC5 )을 비교하였다.
항균 활성 평가 − 시료들의 항균 활성은 화장품 및 의약품에서의 검출이 제한되고 있는 균주를 대상으로 MIC 및 MBC/MFC(μg/mL)값을 비교하여 평가하였다.

대상 데이터

Louis, MO, USA)에서 구매하였고, FeCl₃ ·6H₂O는 Junsei Chemical Co.(Tokyo, Japan)에서 구매하였다. Tryptic soy broth 및 potato dextrose agar는 Merck(Darmstadt, Germany)에서 구매하였다.
(Tokyo, Japan)에서 구매하였다. Tryptic soy broth 및 potato dextrose agar는 Merck(Darmstadt, Germany)에서 구매하였다. 완충용액 제조에 사용된 Na₂ HPO₄ ·12H₂O, NaH₂PO₄ ·2H₂O, NaCl, HCl 및 메탄올(MeOH), 에탄올(EtOH), 에틸 아세테이드(EtOAc)와 같은 용매는 시판 특급 시약을 사용하였다.
. 따라서 본 실험에서는 ROS 중 ¹O₂에 대한 소거 활성을 평가하였고, 양성 대조군으로는¹O₂ 의 강력한 quencher로 알려진 sodium azide(NaN₃)를 사용하였다. ⁵⁵⁾ Fig.
15 min 동안 광조사를 한 후, 15 min 간격으로 Vis-spectrometer를 이용하여 700 nm에서의 시료들의 투광도를 측정하여 적혈구의 용혈 정도를 측정하였다. 모든 실험 과정은 20^oC의 암소에서 진행되었다.
본 실험에서는 양성 대조군으로는 세포 지질층에서 막 유동성과 투과성에 관한 안정성에 관여하며, 지질 과산화를 저해하는 것으로 알려진 (+)-α-tocopherol을 이용하였다.
실험 재료 − 본 실험에 사용된 니파야자 싹은 2017년 5월 이전 미얀마에서 채취하여 현지에서 껍질을 벗기고 건조한 뒤 ㈜토디팜코리아에 의해 국내로 수입되어 유통되는시판 제품을 2017년 9월에 우주물산을 통해 구매하였다.
항균 활성 평가 − 시료들의 항균 활성은 화장품 및 의약품에서의 검출이 제한되고 있는 균주를 대상으로 MIC 및 MBC/MFC(μg/mL)값을 비교하여 평가하였다. 양성 대조군으로는 보편적으로 사용되고 있는 방부제인 methyl paraben 을 사용하였고, 결과는 Table IV에 나타냈다. 니파야자 싹추출물 및 분획물들의 항균 활성은 에틸 아세테이트 분획이 가장 우수했고, 이는 에틸 아세테이트 분획물이 가장 많은 양의 페놀성 화합물을 포함하기 때문인 것으로 판단된다.
완충용액 제조에 사용된 Na2 HPO4 ·12H2O, NaH2PO4 ·2H2O, NaCl, HCl 및 메탄올(MeOH), 에탄올(EtOH), 에틸 아세테이드(EtOAc)와 같은 용매는 시판 특급 시약을 사용하였다.
항균 활성 평가 42) − 항균 활성 평가에 사용된 균주는 그람 양성균인 Staphylococcus aureus(ATCC6538) 및 Bacillus subtilis(ATCC19659), 그람 음성균인 Escherichia coli(ATCC23736) 및 Pseudomonas aeruginosa(ATCC29336), 진균인 Candida albicans(ATCC10231) 및 Aspergillus brasiliensis(ATCC16404)로 한국 미생물 보존센터(KCCM, Seoul, Korea)에서 분양 받았다.

데이터처리

각 데이터 간의 유의성 분석은 unpaired t test 또는 one-way analysis of variance(ANOVA) 분석 후 Tukey’s honestly significant difference(HSD) test를 이용한 사후 검정을 통해 p<0.05 수준에서 수행하였다.
통계처리 − 모든 실험 데이터는 3회 이상 반복하여 측정하였으며, 평균과 표준편차로 표시하였다.

이론/모형

Luminol 화학 발광법을 이용한 Fe3+ -EDTA/H2O2 시스템에서 생성된 활성산소 소거 활성 − 활성산소 소거 활성 평가는 기존에 알려진 luminol을 이용한 화학 발광법을 이용하여 측정하였다.
총 페놀 함량 측정 − 총 페놀 함량은 Folin-Ciocalteu 방법을 이용하여 측정하였다.

성능/효과

1.25, 2.50, 5.00 및 10.00 μg/mL의 농도에서 50% 에탄올 추출물의 τ 50 값은 각각 60.5, 104.5, 316.3 및 994.2 min, 물 분획물의 τ 50 값은 50.3, 72.0, 178.1 및 645.3 min으로, 50% 에탄올 추출물이 더 우수한 세포 보호 활성을 나타냈다.
1O2 소거 활성은 sodium azide, (+)-α-tocopherol, L-ascorbic acid 및 에틸 아세테이트 분획물, 50% 에탄올 추출물, 물 분획물 순서로 나타났으며, 에틸 아세테이트 분획물, 50% 에탄올 추출물 및 물 분획물의 1O2 소거 활성은 통계학적으로 유의하지 않은 차이를 보였다.
이러한 보호 효능을 나타내는 물질은 주로 페놀성 화합물로 기존의 다양한 연구에서 식물 추출물에 존재하는 페놀성 화합물이 적혈구의 산화적 손상에서 세포 보호 효능을 갖는다고 보고하였다. ^36,38,59,60)앞선실험에서 니파야자 추출물 및 분획물에 많은 양의 페놀성 화합물이 존재하는 것을 확인하였다. 따라서 추출물 및 분획물의 우수한 세포 보호 효과는 이러한 페놀성 화합물에서 기인한 것으로 판단되며, 추후 이러한 우수한 효능을 나타내는 유효 물질에 대한 성분 분석에 관한 연구가 진행되어야 할 것으로 사료된다.
37) DPBF는 ¹O₂ 과 화학 반응을 통해 o-dibenzoyl benzene으로 산화되면 420 nm에서의 흡광도가 감소한다. DPBF는 ¹O₂에 대해 물리적 quenching 작용은 나타내지 않기 때문에 DPBF가 산화되는 속도를 측정하여 ¹O₂ 소거 활성을 평가할 수 있다.
50% 에탄올 추출물 및 물 분획물은 실험에 사용한 농도 범위에서 농도 의존적으로 세포 보호 활성을 증가시켰고, (+)-α-tocopherol(37.6, 40.4, 44.6 및 52.7 min)보다 월등히 우수한 세포 보호 효능을 나타냈다.
50% 에탄올 추출물, 물 분획물, 에틸 아세테이트 분획물의 FSC 50은 각각 12.43, 19.84, 7.81 μg/mL로, 에틸 아세테이트 분획이 가장 높은 자유 라디칼 소거 활성을 나타냈다.
50% 에탄올 추출물, 물 분획물, 에틸 아세테이트 분획물의 OSC50은 각각 3.31, 7.02, 1.10 μg/mL로 나타났다.
⁴³⁾따라서 이러한 물질들의 함량은 추출물의 효능을 평가하는데 있어서 중요한 요소이다. 50% 에탄올 추출물, 물 분획물, 에틸 아세테이트 분획물의 총 페놀 함량을 시료 g당 gallic acid equivalent로 환산하여 나타내었고, 각각 299.9, 216.9, 511.7 mg/g으로 나타났다(Table I).
50% 에탄올 추출물과 물 분획물의 활성은 L-ascorbic acid(1.39μg/mL) 보다 낮았지만, 에틸 아세테이트 분획물은 L-ascorbic acid보다 뛰어난 소거 활성을 나타냈다.
albicans에 대해 양성 대조군으로 사용한 methyl paraben 보다 뛰어났다. 50% 에탄올 추출물은 4종의 균주(S. aureus, B. subtilis, P. aeruginosa, C. albicans)에 대해 항균 활성을 나타냈다. MIC 값은 625 – 10,000 μg/mL의 범위로 나타났다.
이러한 결과는 페놀류 함량과 항균 활성이 양의 상관관 계를 갖는다는 기존의 보고에 부합하는 결과이다. ⁶¹⁾ 에틸 아세테이트 분획은 평가에 사용된 6종의 균주 중 총 5종의 균주(S. aureus, B. subtilis, E. coli, P. aeruginosa, C. albicans)에서 항균 활성을 나타냈다. 활성을 나타낸 서로 다른 균주에 대한 에틸 아세테이트 분획의 MIC 값은 156.
그리고 제조한 추출물과 분획물 들의 항산화 활성, 세포 보호 효능 및 항균 활성에 관한 평가를 수행하였다. 니파야자 싹 에탄올 추출물 및 물, 에틸아세테이트 분획물은 자유 라디칼과 다양한 형태의 ROS이 대한 높은 소거 활성을 나타냈다 이러한 결과를 바탕으로 피부의 손상 메커니즘을 바탕으로 설계된 적혈구 광용혈 실험을 수행하였고, 추출물과 분획물들은 산화적 손상으로 유도된 적혈구에 대해 뛰어난 세포 보호 효능을 나타냈다. 이러한 니파야자 싹의 항산화 및 세포 보호 효능은 본 연구진에 의해 보고된 기존에 많은 식물 추출물 및 분획물의 효능과 비교하여도 매우 우수하였다.
니파야자 싹 추출물과 분획물들은 (+)-α-tocopherol 및 L-ascorbic acid보다는 낮은 1O2 소거 활성을 나타냈지만, 시료를 처리하지 않은 대조군과 비교하였을 때, 유의한 1O2소거 활성을 나타냈다.
subtilis(MIC, 10,000 μg/mL)에 대해서 항균 활성을 보였다. 니파야자 싹 추출물과 분획물은 공통적으로 그람 양성균에서 항균 활성을 나타냈으며, 그 중 S. aureus 에 대해 가장 우수한 항균력을 보였다. 위와 같은 실험 결과, 니파야자 싹 추출물과 분획물은 실험 균주에 대해 methyl paraben과 동등 혹은 이상의 항균 활성을 나타냈기에 파라 벤류를 대체할 천연 방부제로서의 응용 가능성이 존재한다고 판단된다.
물 분획물은 S. aureus(MIC/MBC, 2,500 μg/mL)와 B. subtilis(MIC, 10,000 μg/mL)에 대해서 항균 활성을 보였다.
수율 및 총 페놀 함량 측정 − 니파야자 추출물을 50% 에탄올에서 침적 시킨 후 여과한 뒤 감압 증류하여 에탄올 추출물을 얻었고 원물 대비 수율은 21.0%였다.
에틸 아세테이트 분획물은 1.25, 2.50, 및 5.00 μg/mL의 농도에서 각각 88.6, 160.1, 및 442.8 μg/mL의 τ 50 을 나타냈고, 이는 (+)-α-tocopherol은 물론 50% 에탄올 추출물과 물 분획물보다 뛰어났다(Table III, Fig. 5).
니파야자 싹 에탄올 추출물 및 물, 에틸아세테이트 분획물은 자유 라디칼과 다양한 형태의 ROS이 대한 높은 소거 활성을 나타냈다 이러한 결과를 바탕으로 피부의 손상 메커니즘을 바탕으로 설계된 적혈구 광용혈 실험을 수행하였고, 추출물과 분획물들은 산화적 손상으로 유도된 적혈구에 대해 뛰어난 세포 보호 효능을 나타냈다. 이러한 니파야자 싹의 항산화 및 세포 보호 효능은 본 연구진에 의해 보고된 기존에 많은 식물 추출물 및 분획물의 효능과 비교하여도 매우 우수하였다. 이와 더불어 니파야자 추출물 및 분획물들의 항균 활성도 확인하였다.
25 – 2,500 μg/mL 범위로 나타났고, MBC 및 MFC 값은 625 – 2,500 μg/mL의 범위의 값을 나타냈다. 이러한 에틸 아세테이트 분획의 항균 활성은 S. aureus, B subtilis, P. aeruginosa, C. albicans에 대해 양성 대조군으로 사용한 methyl paraben 보다 뛰어났다. 50% 에탄올 추출물은 4종의 균주(S.
이와 더불어 니파야자 추출물 및 분획물들의 항균 활성도 확인하였다. 특히 에틸 아세테이트 분획물은 그람 양성균, 그람 음성균 및 진균 모두에 관해 우수한 항균 활성을 나타내는 것을 확인하였다. 이상의 결과들을 통해 니파야자 싹이 화장품, 식품 및 의약품 등의 다양한 분야에서 항산화 및 항균 소재로의 활용 가능성이 있다고 판단되기에 이에 관한 후속 연구가 기대된다.
이상의 결과들을 통해 니파야자 싹이 화장품, 식품 및 의약품 등의 다양한 분야에서 항산화 및 항균 소재로의 활용 가능성이 있다고 판단되기에 이에 관한 후속 연구가 기대된다. 특히, 본 연구에서 수행된 모든 실험에서 에틸 아세테이트 분회물은 에탄올 추출물 및 물 분획물에 비해 우수한 항산화 및 항균 활성을 나타냈다. 이는 니파야자 싹의 우수한 효능을 나타내는 유효 성분이 에틸 아세테이트 분획물에 주요하게 존재하기 때문인 것으로 보이며, 이에 따라 에틸 아세테이트 분획물의 성분 분석과 개별 성분들의 효능 평가를 통한 유효 성분의 규명이 필요할 것으로 사료된다.

후속연구

^36,38,59,60)앞선실험에서 니파야자 추출물 및 분획물에 많은 양의 페놀성 화합물이 존재하는 것을 확인하였다. 따라서 추출물 및 분획물의 우수한 세포 보호 효과는 이러한 페놀성 화합물에서 기인한 것으로 판단되며, 추후 이러한 우수한 효능을 나타내는 유효 물질에 대한 성분 분석에 관한 연구가 진행되어야 할 것으로 사료된다.
aureus 에 대해 가장 우수한 항균력을 보였다. 위와 같은 실험 결과, 니파야자 싹 추출물과 분획물은 실험 균주에 대해 methyl paraben과 동등 혹은 이상의 항균 활성을 나타냈기에 파라 벤류를 대체할 천연 방부제로서의 응용 가능성이 존재한다고 판단된다.
특히, 본 연구에서 수행된 모든 실험에서 에틸 아세테이트 분회물은 에탄올 추출물 및 물 분획물에 비해 우수한 항산화 및 항균 활성을 나타냈다. 이는 니파야자 싹의 우수한 효능을 나타내는 유효 성분이 에틸 아세테이트 분획물에 주요하게 존재하기 때문인 것으로 보이며, 이에 따라 에틸 아세테이트 분획물의 성분 분석과 개별 성분들의 효능 평가를 통한 유효 성분의 규명이 필요할 것으로 사료된다.
특히 에틸 아세테이트 분획물은 그람 양성균, 그람 음성균 및 진균 모두에 관해 우수한 항균 활성을 나타내는 것을 확인하였다. 이상의 결과들을 통해 니파야자 싹이 화장품, 식품 및 의약품 등의 다양한 분야에서 항산화 및 항균 소재로의 활용 가능성이 있다고 판단되기에 이에 관한 후속 연구가 기대된다. 특히, 본 연구에서 수행된 모든 실험에서 에틸 아세테이트 분회물은 에탄올 추출물 및 물 분획물에 비해 우수한 항산화 및 항균 활성을 나타냈다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	광증감제의 특징은 무엇인가?	피부는 항시 산소에 접촉되어 있으며, porphyrin, nicotinamide, quinone 및 flavin과 같은 광증감제를 포함하고 있다. 이러한 광증감제는 태양 광선 노출로 에너지를 흡수하면, 산소에 에너지 전달을 통해 활성 산소종(rective oxygen species, ROS) 중 singlet oxygen(1O2)을 생성하거나(type II광증감 반응), 산소 분자에 전자 전달을 통해 superoxide anion radical(O2·− )및 부수적인 ROS를 생성한다(type I 광증감 반응). 4,5) 이렇게 생성된 ROS는 다양한 산화적 손상을 통해 노화에 관여한다.
	피부 노화는 무엇에 의해 결정되는가	피부 노화는 유전, 개인의 생활 습관 및 외부 환경 등 다양한 요인들에 의해 결정된다. 이 중 외부 환경의 요인은 공해나 담배 연기, 태양 광선을 말하며, 지표면에 도달하는 다양한 파장 영역의 빛은 피부의 광노화(photoaging)를 유발하는 주요 원인으로 보고되고 있다.
	피부 노화의 원인인 외부환경 요인은 어떠한 것이 있는가?	피부 노화는 유전, 개인의 생활 습관 및 외부 환경 등 다양한 요인들에 의해 결정된다. 이 중 외부 환경의 요인은 공해나 담배 연기, 태양 광선을 말하며, 지표면에 도달하는 다양한 파장 영역의 빛은 피부의 광노화(photoaging)를 유발하는 주요 원인으로 보고되고 있다. 1-3)

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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