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논문 상세정보

마우스 Collectin-Placenta 1 유전자의 발현 연구

Expression Study of The Mouse Collectin-Placenta 1 Gene

초록

포유류에 존재하는 Collectin-Placenta 1 (CL-P1)을 포함한 여러 종류의 scavenger 수용체는 주로 내피 세포, 대식 세포 및 평활근 세포 표면에 발현되는 분자이다. 이들 분자는 산화 된 저밀도 지질 단백질 (oxLDL)에 결합하여 처리 할 수 있는 세포 표면 당 단백질이다. 이들 분자 중 케르세틴이 CL-P1 활성화에 어떤 영향을 미치는가를 확인하였다. 케르세틴은 산화 반응을 담당하는 자유 라디칼의 제거제 역할을 하여 산화를 중지시키는 항산화제로 알려져 있다. 본 논문에서는 마우스 CL-P1 유전자 promoter 부분의 전사 시작 점부터 -500 번째 염기까지의 단편을 DNA 중합효소를 이용하여 클로닝 하였다. 그 후에 대식세포 계열인 RAW264.7 및 섬유아세포계열의 NIH3T3 세포에 도입하여 케르세틴이 CL-P1 유전자 발현에 어떠한 영향을 미치는지에 대한 연구를 하였다. 이 부위에는 세포주기 조절 인자인 E2F 결합부위를 비롯해서 여러 종류의 전사 인자가 결합하는 염기서열이 다수 위치하고 있다. 이러한 500염기 단편을 pGL4.10 기본 벡터 및 프로모터에 연결시킨 후 세포에 도입시켰다. 그리고 배양 중에 케르세틴을 처리하여 유전자 발현양을 형광 색소 발현기법으로 측정하였다. 그 결과 유전자 발현이 시작되는 앞쪽 부분의 -250에서 -350사이의 염기들이 CL-P1 단백질을 만드는데 중요하다는 것을 확인하였다. 그 중에서도 E2F결합 부위가 결정적인 것 이라는 것을 DNA 돌연변이 실험을 통해 확인 하였다. 또한 부착 세포인 RAW264.7 배양액에 케르세틴을 첨가 한 결과, 배양용기 표면에서 탈락하는 현상을 확인하였다. 즉 발현된 CL-P1단백질이 케르세틴에 의해 세표 표면의 부착 분자에도 영향을 주는 것을 확인하였다.

Abstract

Several types of scavenger receptors, including the Collectin-Placenta 1 (CL-P1) receptorthat is present in mammals, are molecules that are expressed on the surfaces of endothelial cells, macrophages and smooth muscle cells. These molecules are cell surface glycoproteins that can be conjugated to oxidized low density lipoprotein (oxLDL). Among these molecules, the effect of quercetin on CL-P1 activation has been confirmed. Quercetin is known as an antioxidant that stops oxidation because it acts to remove free radicals that are responsible for the oxidation reaction. In this study, fragments from the transcription start site of the mouse CL-P1 gene promoter to the -500th base were cloned using DNA polymerase. These fragments were then introduced into macrophage like RAW264.7 cells and fibroblast-like NIH3T3 cells to study the effect of quercetin on the CL-P1 gene expression. As a result, we found that bases ranging from -250 to -350 in the anterior part where gene expression starts are important for producing CL-P1 protein. Among them, the DNA mutation experiments we performed confirmed that the E2F binding sites are critical for producing the CL-P1 protein? In addition, when quercetin was added to the RAW264.7 culture medium, which was a culture of adherent cells, observedthe phenomenon of the cells falling off from the surface of the culture container.

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핵심어 질문 논문에서 추출한 답변
CL-P1유전자
CL-P1유전자의 역할은?
주로 혈관 내피세포, 대식세포, 민 근육세포에서 발현되어 처리해야할 쓰레기 단백지질을 세포가 식음하게끔 하여 처리하는 역할

CL-P1유전자는 Scavenger 수용체의 일종으로 파괴된 세균의 세포벽 성분 등을 혈액으로부터 제거하는 역할뿐만 아니라 산화된 저밀도 단백지질과 결합하는 단백질을 만드는 등의 다양한 기능을 하는 유전자로 알려져 있다[5, 6]. 주로 혈관 내피세포, 대식세포, 민 근육세포에서 발현되어 처리해야할 쓰레기 단백지질을 세포가 식음하게끔 하여 처리하는 역할을 하는 유전자로 밝혀져 있지만, 그 외에도 다른 기능이 있을 것이란 추측이 많다.

Scavenger 수용체
Scavenger 수용체란 무엇인가?
자기 자신의 분자 중에 노후화되었거나 변형되어 쓸모가 없는 분자를 제거하는 일명 쓰레기 수용체

Scavenger 수용체는 자기 자신의 분자 중에 노후화되었거나 변형되어 쓸모가 없는 분자를 제거하는 일명 쓰레기 수용체로 알려져 있다[1, 2, 3]. 최근에는 허혈성 심장질환 및 당뇨병환자의 심장외막조직에서의 Scavenger 수용체에 대한 연구 등이 이루어져 있다[4].

CL-P1유전자
CL-P1유전자의 기능은?
Scavenger 수용체의 일종으로 파괴된 세균의 세포벽 성분 등을 혈액으로부터 제거하는 역할뿐만 아니라 산화된 저밀도 단백지질과 결합하는 단백질을 만드는 등

최근에는 허혈성 심장질환 및 당뇨병환자의 심장외막조직에서의 Scavenger 수용체에 대한 연구 등이 이루어져 있다[4]. CL-P1유전자는 Scavenger 수용체의 일종으로 파괴된 세균의 세포벽 성분 등을 혈액으로부터 제거하는 역할뿐만 아니라 산화된 저밀도 단백지질과 결합하는 단백질을 만드는 등의 다양한 기능을 하는 유전자로 알려져 있다[5, 6]. 주로 혈관 내피세포, 대식세포, 민 근육세포에서 발현되어 처리해야할 쓰레기 단백지질을 세포가 식음하게끔 하여 처리하는 역할을 하는 유전자로 밝혀져 있지만, 그 외에도 다른 기능이 있을 것이란 추측이 많다.

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