선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 최근에는 새싹인삼의 성장과 진세노사이드에 영향을 미치는 광량이나 물의 미네랄 함량 등의 재배 연구는 활발하지만[16], 기능성에 관한 연구는 미비한 실정이다. 따라서, 본 연구에서는 알코올 섭취 후에 나타나는 증상에 대하여 예방할 수 있는 천연소재를 찾고자 새싹인삼 지상부 추출물을 이용하여 알코올에 의해 간이 손상된 동물모델을 이용하여 간 보호 효과를 확인하고자 하였으며, 새싹인삼의 지표성분 후보가 될 수 있는 주요한 성분에 대하여 정량분석을 진행하였다.
- 앞서 언급했듯이, 새싹인삼 지상부 추출물(HGE)의 항산화 활성을 확인해 보기 위해 DPPH, ABTS, 및 SOD 유사 활성을 측정 결과, 농도 의존적으로 항산화 활성이 증가함을 확인하였다. 따라서, 알코올로 간독성을 유발한 동물모델에서의 간 보호 효과를 확인해 보고자 하였다.
- 알코올 섭취에 의한 독성물질 생성의 예방 효과를 확인하기 위해 시료 자체의 항산화능을 알아보았다. 새싹인삼 지상부 추출물 (HGE)들의 항산화 활성 분석을 위해 DPPH, ABTS 라디칼 소거 활성과 SOD (super oxide dismutase)활성을 비교 분석하여 나타내었다.
제안 방법
- 추출하였다. 1차 추출 후 Filter paper (No. 1, WHATMAN, Maidstone, England)를 이용하여 추출액을 여과하였고, 감압증류장치(N-1000, EYELA, Tokyo, Japan)로 농축하였다. 농축된 엑스를 −80oC 초저온 냉동고 및 동결건조기 (FD8508, Ilshin, Dongducheon, Korea)를 이용하여 건조하여 주정 추출물 분말을 얻었다.
- 70% 발효주정 추출물로 얻어진 새싹인삼 지상부 동결 건조물을 100mg을 1mL의 메탄올에 녹이고 0.2µm의 13mm 디스크 필터(Chromdisc Co., Daegu, Korea)로 여과하여 UV 검출기가 장착된 HPLC로 정량분석 하였다. 사용된 컬럼은 Advanced Materials Technology사의 Halo® RP-Amide (4.
- 알코올은 간의 기능 이상을 유도하는 물질로 사용되었다. 7일 동안 25% 농도의 에탄올을 마우스에 경구투여 하였으며, 실험 마지막 날에 체중과 기관(간, 비장) 무게를 측정하였다. 25%의 에탄올을 투여한 마우스는 체중이 감소되었을 뿐 아니라, 간과 비장에서의 무게 감소도 보였다(Fig.
- 채취한 혈액은 상온에서 1, 200×g, 20분간 원심분리 후 혈장을 분리하여 분석에 이용하였으며, 간과 비장 조직은 생리식염수로 수세 후 중량 측정 및 분석에 사용되었다. Aspartate aminotransferase (AST)와 alanine aminotransferase (ALT)의 활성은 ALT와 AST kit (Sigma-Aldrich) 를 사용해서 비색정량으로 계산하였다. 혈장 내 LDH (lactate dehydrogenase)의 양은 LDH assay kit (Sigma-Aldrich)로 측정되었다.
- 본연구에서는 인삼 뿌리가 아닌, 새싹인삼 지상부를 대상으로 실험을 하였기에, 인삼 꽃봉오리 (flower buds)에서 분리보고가 되어 있는 ginsenoside F1, F2, F3, 및 F5를 정량분석 하였다. Ginsenoside 4종의 정량분석을 위해 UV 검출기가 장착된 HPLC를 사용하여 추출된 새싹인삼 지상부를 분석하였다. 최적의 용매 기울기 조건을 확립하고 분석된 결과의 머무름 시간을 비교하였을 때, ginsenoside F5 (1)는 18.
- SOD 유사 활성 실험은SOD Assay kit-WST를 사용하여 측정하였다. SOD 유사 활성이 NBT (nitroblue tetrazolium)의 환원 저해 능력을 실험하는 photochemical NBT method를 사용하였다.
- 건조된 새싹인삼 지상부(잎, 줄기)을 잘게 분쇄한 후, 환류추출 장비를 이용하여 100g의 새싹인삼 지상부 건조물에 800mL의 30% 발효주정을 넣고 70oC에서 4시간 동안 열수 추출하였다. 1차 추출 후 Filter paper (No.
- 1). 검량 곡선은 표준물질의 5농도 범위 안에서 측정된 값을 회기 분석을 통해 작성하였다. 상관계수(r2)는 화합물 4종에 대해 0.
- 새싹인삼 지상부 추출물에서 알코올로 유발된 산화적 스트레스에 의한 간 손상에 대한 보호 효과를 확인해 보기 위해 새싹인삼 지상부 추출물(HGE)을 30% 발효주정(발효 에탄올)을 사용하여 70oC에서 4시간 동안 열수 추출하였다. 기존에 인삼 추출물을 확보하는 방법은 주로 공업용 에탄올이나 메탄올[13]과 같은 실험용 용매를 이용한 방법으로 추출 효율을 높이는 방법이 많이 이용되었지만, 본연구에서는 식품에 원료로 사용하기에 적합하고, 짧은 추출시간과 동시에 적당한 추출온도를 사용하여 추출물의 유효성분의 변화를 최소화하였다. 앞서 언급했듯이, 새싹인삼 지상부 추출물(HGE)의 항산화 활성을 확인해 보기 위해 DPPH, ABTS, 및 SOD 유사 활성을 측정 결과, 농도 의존적으로 항산화 활성이 증가함을 확인하였다.
- 1, WHATMAN, Maidstone, England)를 이용하여 추출액을 여과하였고, 감압증류장치(N-1000, EYELA, Tokyo, Japan)로 농축하였다. 농축된 엑스를 −80oC 초저온 냉동고 및 동결건조기 (FD8508, Ilshin, Dongducheon, Korea)를 이용하여 건조하여 주정 추출물 분말을 얻었다.
- 간 손상의 마커로써 혈중 ALT, AST, 및 LDH와 같은 효소들의 농도 증가는 간세포 손상과 세포막의 기능 손실을 나타낸다 [33]. 따라서, 알코올성 간 손상을 준 마우스에 HGE시료를경구투여 후, 간 지표 효소인 LDH (lactate dehydrogenase)를조사함으로써 동물모델에서의 항산화 효과를 알아보았다. 혈중 LDH의 수치는 알코올을 섭취한 군에서 증가되었고, 증가된 LDH 수치는 HGE 추출물을 4와 12mg/kg의 농도로 경구 투여한 경우 대조군과 유사한 정도로 감소하였고, 농도가 증가할수록 감소효과는 더 커진 것을 확인하였다(Fig.
- 정상군과 알코올 투여군은 PBS (phosphate-bufered saline) 버퍼를, 알코올-새싹인삼 지상부 추출물 투여군은 HGE 추출물을 각각 4와 12mg/kg 농도로 10일간 경구 투여하였다. 모든 실험군은 경구 투여 3일 후부터 대조군은 PBS 버퍼를, 알코올 투여군과 알코올-HGE 투여군은 25% ethanol (w/v) (Merck, Palo Alto, CA, USA)을 5g/kg 농도로 7일간 경구 투여 하였다. 최종 투여 후 24시간 절식 시킨 다음, 혈액과 조직을 채취하였다.
- SOD 유사 활성이 NBT (nitroblue tetrazolium)의 환원 저해 능력을 실험하는 photochemical NBT method를 사용하였다. 반응액은 50mM carbonic buffer (pH 10.2), 0.1mM EDTA, 0.1mM xanthine, 0.025mM NBT로 하였고, NBT의 환원 저해율을 450nm에서 측정하였다. SOD 효소 유사 활성은 다음의 계산식에 의해 환산하였다.
- 본연구에서는 인삼 뿌리가 아닌, 새싹인삼 지상부를 대상으로 실험을 하였기에, 인삼 꽃봉오리 (flower buds)에서 분리보고가 되어 있는 ginsenoside F1, F2, F3, 및 F5를 정량분석 하였다. Ginsenoside 4종의 정량분석을 위해 UV 검출기가 장착된 HPLC를 사용하여 추출된 새싹인삼 지상부를 분석하였다.
- 시료 자체의 항산화능을 알아보았다. 새싹인삼 지상부 추출물 (HGE)들의 항산화 활성 분석을 위해 DPPH, ABTS 라디칼 소거 활성과 SOD (super oxide dismutase)활성을 비교 분석하여 나타내었다. DPPH는 짙은 보라색의 안정한 항산화 물질에 의해 환원 반응이 일어나면서 보라색이 탈색되는 원리를 이용하여 측정하고, 그 측정 방법이 비교적 간단하여 시료로부터 항산화 활성을 측정하는데 주로 이용된다 [23].
- 1000 µg/mL 농도의 시료의 경우 DPPH 라디칼 소거활성과 ABTS 라디칼 소거활성에 비해 SOD 유사활성의 정도가 50% 이하로 다소 낮았는데, 이는 다른 이전의 연구들에서도 유사한 결과들이 있었다. 새싹인삼 지상부 추출물에서 알코올로 유발된 산화적 스트레스에 의한 간 손상에 대한 보호 효과를 확인해 보기 위해 새싹인삼 지상부 추출물(HGE)을 30% 발효주정(발효 에탄올)을 사용하여 70oC에서 4시간 동안 열수 추출하였다. 기존에 인삼 추출물을 확보하는 방법은 주로 공업용 에탄올이나 메탄올[13]과 같은 실험용 용매를 이용한 방법으로 추출 효율을 높이는 방법이 많이 이용되었지만, 본연구에서는 식품에 원료로 사용하기에 적합하고, 짧은 추출시간과 동시에 적당한 추출온도를 사용하여 추출물의 유효성분의 변화를 최소화하였다.
- 알코올 간독성(AILD, alcohol induced-liver damage)의 유발은 Harrison-Findik 등[23]의 방법에 따라 이루어졌다. 실험군은 대조군(Con), 알코올 투여군(EtOH), 알코올-새싹인삼 지상부 추출물 투여군(EtOH/HGE)으로 각 군에 7마리씩 무작위로 나누었다. 정상군과 알코올 투여군은 PBS (phosphate-bufered saline) 버퍼를, 알코올-새싹인삼 지상부 추출물 투여군은 HGE 추출물을 각각 4와 12mg/kg 농도로 10일간 경구 투여하였다.
- 7 µm, Wilmington, DE, USA)를 사용하여 50oC에서 실시하였다. 이동상은 증류수(A) 및 acetonitrile (B)를 상용하였으며, B를 6 분 동안 27oC에서 28%로 증가시킨 후, 4분 동안 28%로 유지, 다시 20분 동안 B를 28oC에서 34%로 증가시켰고 이후 3분 동안 34oC에서 80%로 증가시켰으며 그 후에 2분 동안 B를 27% 수준으로 유지시키는 조건으로 기울기 용리 하였다. 이때 유속은 0.
- 실험군은 대조군(Con), 알코올 투여군(EtOH), 알코올-새싹인삼 지상부 추출물 투여군(EtOH/HGE)으로 각 군에 7마리씩 무작위로 나누었다. 정상군과 알코올 투여군은 PBS (phosphate-bufered saline) 버퍼를, 알코올-새싹인삼 지상부 추출물 투여군은 HGE 추출물을 각각 4와 12mg/kg 농도로 10일간 경구 투여하였다. 모든 실험군은 경구 투여 3일 후부터 대조군은 PBS 버퍼를, 알코올 투여군과 알코올-HGE 투여군은 25% ethanol (w/v) (Merck, Palo Alto, CA, USA)을 5g/kg 농도로 7일간 경구 투여 하였다.
- 측정하였다[21]. 즉, 0.6mM DPPH 용액 0.1mL에 시료를 동량으로 첨가하고, 실온에서 암상태로 30분간 반응시킨 후 517nm에서 흡광도를 측정하였다(infinite m200, TECAN, Männedorf, Switzerland). 결과 값은 시료를 첨가하지 않은 대조군과 비교하여 라디칼의 제거 활성으로 나타내었다.
- , Phennsylvania, USA)을 이용하여 마취 후 개복하여 heparin (H3393, Sigma- Aldrich) 처리한 주사기를 대정맥에서 혈액을 채취하였으며 간 (Liver)과 비장(spleen) 또한 적출하였다. 채취한 혈액은 상온에서 1, 200×g, 20분간 원심분리 후 혈장을 분리하여 분석에 이용하였으며, 간과 비장 조직은 생리식염수로 수세 후 중량 측정 및 분석에 사용되었다. Aspartate aminotransferase (AST)와 alanine aminotransferase (ALT)의 활성은 ALT와 AST kit (Sigma-Aldrich) 를 사용해서 비색정량으로 계산하였다.
- 모든 실험군은 경구 투여 3일 후부터 대조군은 PBS 버퍼를, 알코올 투여군과 알코올-HGE 투여군은 25% ethanol (w/v) (Merck, Palo Alto, CA, USA)을 5g/kg 농도로 7일간 경구 투여 하였다. 최종 투여 후 24시간 절식 시킨 다음, 혈액과 조직을 채취하였다.
대상 데이터
- 본 실험에 사용한 실험동물은 5주령 된 수컷 Balb/c 마우스로 라온 바이오로부터 공급받아 1주일간 일정한 조건(기온 25±3oC, 습도 50%, 명암주기 12시간)에 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 모든 실험동물의 취급 및 사후 처리는 경희대학교 동물실험 윤리위원회의 기준(승인번호 KHUASP-18-006)을 준수하여 수행되었다.
- 본 연구에서 사용된 수경재배 인삼은 국립원예특작과학원 인삼 특작부에서 제공된 것으로, 환경조절이 가능한 식물공장에서 1 년근 묘삼을 식재하여, 30일간 재배한 새싹인삼을 수확하여 사용하였다. 표본시료(NIHHS-1801)는 국립원예특작과학원 인삼특작부 성분분석실에 보관되어 있다.
- 정량분석에 사용된 장비는 Agilent 1200 series HPLC system (Agilent, Santa Clara, CA, USA)을 사용하였다. 분석을 위한 증류수, Methanol (MeOH) 및 Acetonitile 은 HPLC grade (Fisher Scientific Korea Ltd., Seoul, Korea) 를 사용하였으며, 분석 용매에 첨가한 Formic Acid는 99.0%의 Optima™ LC/MS (Fisher Scientific) 급을 사용하였다. 시료의 항산화 활성 실험을 위해 1, 1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH, Calbiochem, San Diego, USA), 2, 2-azino-bis-3-ethylbenzothiazoline- 6-sulfonicacid (ABTS, Sigma, St.
- , Daegu, Korea)로 여과하여 UV 검출기가 장착된 HPLC로 정량분석 하였다. 사용된 컬럼은 Advanced Materials Technology사의 Halo® RP-Amide (4.6×150mm, 2.7 µm, Wilmington, DE, USA)를 사용하여 50oC에서 실시하였다. 이동상은 증류수(A) 및 acetonitrile (B)를 상용하였으며, B를 6 분 동안 27oC에서 28%로 증가시킨 후, 4분 동안 28%로 유지, 다시 20분 동안 B를 28oC에서 34%로 증가시켰고 이후 3분 동안 34oC에서 80%로 증가시켰으며 그 후에 2분 동안 B를 27% 수준으로 유지시키는 조건으로 기울기 용리 하였다.
- 새싹인삼 지상부 추출물의 성분분석에 사용한 ginsenoside F1, F2, F3, 및 F5 성분은 ChromaDex사(Irvine, CA, USA)로부터 구입하여 사용하였다. 정량분석에 사용된 장비는 Agilent 1200 series HPLC system (Agilent, Santa Clara, CA, USA)을 사용하였다.
- 시료의 채취는 2% isofluorane (Piramal Inc., Phennsylvania, USA)을 이용하여 마취 후 개복하여 heparin (H3393, Sigma- Aldrich) 처리한 주사기를 대정맥에서 혈액을 채취하였으며 간 (Liver)과 비장(spleen) 또한 적출하였다. 채취한 혈액은 상온에서 1, 200×g, 20분간 원심분리 후 혈장을 분리하여 분석에 이용하였으며, 간과 비장 조직은 생리식염수로 수세 후 중량 측정 및 분석에 사용되었다.
- 0%의 Optima™ LC/MS (Fisher Scientific) 급을 사용하였다. 시료의 항산화 활성 실험을 위해 1, 1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH, Calbiochem, San Diego, USA), 2, 2-azino-bis-3-ethylbenzothiazoline- 6-sulfonicacid (ABTS, Sigma, St. Louis, MO, USA), SOD Assay kit-WST (Sigma) 제품을 사용하였다. 그 외의 시약 및 용매는 모두 일급 이상의 시약을 구입하여 사용하였으며 기기는 별도 표기하였다.
데이터처리
- 실험결과는 평균값과 표준편차(mean±standard)로 표시하였고, 각 시료군 간의 통계적 분석은 본 실험에서 얻은 결과를 student t-test와 Duncan’s multiple range test를 이용하여 각 그룹간 통계적 유의성을 검정하였다. 각 군의 유의성은 p<0.
- 결과 값은 시료를 첨가하지 않은 대조군과 비교하여 라디칼의 제거 활성으로 나타내었다. 실험은 3 회 반복 수행하여 평균값을 제시하였다.
- 결과 값은 시료를 첨가하지 않은 대조군과 비교하여 라디칼의 제거 활성으로 나타냈다. 실험은 3회 반복 수행하여 평균값으로 나타내었다.
이론/모형
- SOD 유사 활성이 NBT (nitroblue tetrazolium)의 환원 저해 능력을 실험하는 photochemical NBT method를 사용하였다. 반응액은 50mM carbonic buffer (pH 10.
- 시료의 항산화 활성은DPPH 라디칼 제거 활성 방법을 이용하여 측정하였다[21]. 즉, 0.
- 모든 실험동물의 취급 및 사후 처리는 경희대학교 동물실험 윤리위원회의 기준(승인번호 KHUASP-18-006)을 준수하여 수행되었다. 알코올 간독성(AILD, alcohol induced-liver damage)의 유발은 Harrison-Findik 등[23]의 방법에 따라 이루어졌다. 실험군은 대조군(Con), 알코올 투여군(EtOH), 알코올-새싹인삼 지상부 추출물 투여군(EtOH/HGE)으로 각 군에 7마리씩 무작위로 나누었다.
성능/효과
- 7일 동안 25% 농도의 에탄올을 마우스에 경구투여 하였으며, 실험 마지막 날에 체중과 기관(간, 비장) 무게를 측정하였다. 25%의 에탄올을 투여한 마우스는 체중이 감소되었을 뿐 아니라, 간과 비장에서의 무게 감소도 보였다(Fig. 3). 기관 무게의 감소는 에탄올 처리에 의해 유도된 독성(toxicity) 때문인 듯 하다.
- 2-B에 제시하였다. 50, 100, 250, 500, 1000 (µg/mL) 농도에서 7.5±0.7, 23±2.5, 40.3±2.7, 60±4.6, 77±5.2%로 나타나 농도 의존적으로 라디칼 소거능이 증가함을 보였다. 특히, 1000µg/mL에서 70% 이상의 소거활성을 나타내었는데, 인삼, 홍삼 추출물의 항산화 연구에서와 마찬가지로 추출물의 농도가 증가할수록 DPPH 라디칼 소거능이 증가하였고[27], HGE 추출물의 경우 더 높은 활성을 나타내었다.
- 9999로 매우 높은 값을 보여주었다(Table 1). Ginsenoside 4종을 함량분석한 결과, 2.5mg/g (1), 4.4mg/g (2), 1.4mg/g (3), 및 23.3mg/g (4)으로 확인되었다. Tung 등[25]으로부터 인삼 추출물과 ginsenoside Rg1등 주요한 물질이 간기능 개선 효과가 있는 것으로 알려져 있으나, 새싹인삼 지상부 추출물의 알코올성 간손상을 유발한 마우스 모델에서의 간 보호 활성 및 인삼 꽃봉오리에서 분리보고가 되어있는 ginsenoside 4종의 함량분석은 이번 연구에서 처음 보고하였다.
- 새싹인삼 지상부 추출물 (HGE)을 급여하는 동안 마우스의 비정상적인 체중의 증가와 감소는 관찰되지 않았다(data not shown). HGE의 경구투여는 알코올로 유발된 간독성 상태에서 마우스의 체중과 비장 무게를 회복시켰고, 체중에 대한 상대적인 간 무게의 경우는 EtOH군이 가장 높은 수치를 나타내어 알코올의 처리가 상대적으로 간의 중량을 증가시키는 것으로 확인되었다. 이것은 이전에 연구되었던 알코올로 유발한 간독성 동물 모델에서 체중에 비해 상대적으로 간 중량이 유의적으로 상승되었다고 보고한 연구 결과 [30]와 일치하였다.
- 이것은 이전에 연구되었던 알코올로 유발한 간독성 동물 모델에서 체중에 비해 상대적으로 간 중량이 유의적으로 상승되었다고 보고한 연구 결과 [30]와 일치하였다. 결과적으로, HGE의 적용이 간조직 무게 증가에는 효과가 없는 이유가 확실히 밝혀지진 않지만, 아마도 이러한 작용은 영양학적 지원(nutritional support) 혹은 에탄올에 의한 손상으로부터의 간세포 보호 작용과 연관되어 있는 것으로 분석되었다.
- 5). 따라서, 새싹인삼 지상부 추출물(HGE)은 알코올성 간독성에 의한 산화 스트레스를 완화시키는데 효과가 있다고 사료된다. 본 연구 결과를 종합해 볼 때, 새싹 인삼잎 추출물이 알코올로 유발된 산화 스트레스와 간독성에 대한 보호 효과를 확인하였으며, 향후 인체 적용시험 등 추가연구를 통하여 건강기능성식품소재로 활용될 수 있을 것으로 생각된다.
- 특히 알코올로 유발된 급성 간독성을 보이는 간에서의 ALT와 AST의 활성이 증가된다고 보고되고 있다[5]. 따라서, 알코올성 간손상을 입은 실험 동물에서의 간 기능 회복에 대한 새싹인삼 지상부 추출물의 효과를 혈중 ALT 및 AST 활성으로 확인한 결과, 알코올만 처리한 EtOH 그룹의 경우 ALT, AST 각각 145.33±34.43, 218.67 ±58.29 U/L의 수치를 보여 실험군내에서 유의적으로 가장 높은 수치를 나타내었으므로 알코올로 인한 간독성이 유발됨을 확인하였다(p<0.05). 반면에 알코올 투여와 HGE를 함께 처리한 군의 ALT 및 AST 수치는 알코올만 단독으로 투여했던 군의 ALT 및 AST 수치에 비해 상당히 낮아졌으며, 무처리 대조군과 유사한 정도의 수치를 나타낸 경우도 있었다.
- 이 과정에서 형성된 아세트알데히드가 세포 내 물질의 배출을 억제시켜서 세포 내의 단백질, 지질, 수분 등이 간세포를 팽창시키게 된다[18]. 따라서, 이번 연구에서는 실험동물의 체중 및 간 무게 측정과 체중에 대한 간 중량의 비율 등이 간손상의 정도를 확인할 수 있는 지표로 사용되었다. 알코올은 간의 기능 이상을 유도하는 물질로 사용되었다.
- 05). 반면에 알코올 투여와 HGE를 함께 처리한 군의 ALT 및 AST 수치는 알코올만 단독으로 투여했던 군의 ALT 및 AST 수치에 비해 상당히 낮아졌으며, 무처리 대조군과 유사한 정도의 수치를 나타낸 경우도 있었다. 특히, ALT 활성의 경우, HGE 투여군의 수치는 각각 78.
- DPPH는 짙은 보라색의 안정한 항산화 물질에 의해 환원 반응이 일어나면서 보라색이 탈색되는 원리를 이용하여 측정하고, 그 측정 방법이 비교적 간단하여 시료로부터 항산화 활성을 측정하는데 주로 이용된다 [23]. 새싹인삼 지상부 추출물 (HGE)의 DPPH 라디칼 소거능을 측정한 결과(Fig. 2-A), 50, 100, 250, 500, 1000 (µg/mL) 농도에서 10±2.3, 16.5±2.8, 21±1.4, 43±3.1, 65±3.6%로 나타나 농도 의존적으로 라디칼 소거능이 증가함을 보였다. ABTS 라디칼 소거 활성을 DPPH 방법과 함께 항산화능을 스크리닝 하는데 많이 이용되며 ABTS 를 peroxidase, H2O2와 반응시켜 생성된 활성 양이온인 ABTS+가 시료 중의 항산화성 물질에 의해 제거되어 고유의 청록색의 변화를 흡광도 값으로 나타내어 추출물의 ABTS+ 라디칼 소거 활성을 측정할 수 있다 [26].
- SOD 유사 활성이란 SOD처럼 superoxide를 정상의 산소로 전환시킬 수는 없으나, superoxide 의 반응성을 억제하여 생체를 산화적 손상으로부터 보호할 수 있는 phytochemical의 저분자 물질을 일컫는다[28]. 새싹인삼 지상부 추출물(HGE)의 SOD 유사 활성을 측정해 본 결과(Fig. 2C), 시료의 농도가 증가할수록 SOD 유사활성이 증가하였다. 50, 100, 250, 500, 1000 (µg/mL) 농도에서 5.
- 기존에 인삼 추출물을 확보하는 방법은 주로 공업용 에탄올이나 메탄올[13]과 같은 실험용 용매를 이용한 방법으로 추출 효율을 높이는 방법이 많이 이용되었지만, 본연구에서는 식품에 원료로 사용하기에 적합하고, 짧은 추출시간과 동시에 적당한 추출온도를 사용하여 추출물의 유효성분의 변화를 최소화하였다. 앞서 언급했듯이, 새싹인삼 지상부 추출물(HGE)의 항산화 활성을 확인해 보기 위해 DPPH, ABTS, 및 SOD 유사 활성을 측정 결과, 농도 의존적으로 항산화 활성이 증가함을 확인하였다. 따라서, 알코올로 간독성을 유발한 동물모델에서의 간 보호 효과를 확인해 보고자 하였다.
- 따라서, 알코올성 간 손상을 준 마우스에 HGE시료를경구투여 후, 간 지표 효소인 LDH (lactate dehydrogenase)를조사함으로써 동물모델에서의 항산화 효과를 알아보았다. 혈중 LDH의 수치는 알코올을 섭취한 군에서 증가되었고, 증가된 LDH 수치는 HGE 추출물을 4와 12mg/kg의 농도로 경구 투여한 경우 대조군과 유사한 정도로 감소하였고, 농도가 증가할수록 감소효과는 더 커진 것을 확인하였다(Fig. 5). 따라서, 새싹인삼 지상부 추출물(HGE)은 알코올성 간독성에 의한 산화 스트레스를 완화시키는데 효과가 있다고 사료된다.
후속연구
- 본 연구 결과를 종합해 볼 때, 새싹 인삼잎 추출물이 알코올로 유발된 산화 스트레스와 간독성에 대한 보호 효과를 확인하였으며, 향후 인체 적용시험 등 추가연구를 통하여 건강기능성식품소재로 활용될 수 있을 것으로 생각된다. 또한, 함량이 높은 ginsenoside F2는 지표성분 선정의 기초자료로 이용할 수 있을 것으로 기대된다.
- 따라서, 새싹인삼 지상부 추출물(HGE)은 알코올성 간독성에 의한 산화 스트레스를 완화시키는데 효과가 있다고 사료된다. 본 연구 결과를 종합해 볼 때, 새싹 인삼잎 추출물이 알코올로 유발된 산화 스트레스와 간독성에 대한 보호 효과를 확인하였으며, 향후 인체 적용시험 등 추가연구를 통하여 건강기능성식품소재로 활용될 수 있을 것으로 생각된다. 또한, 함량이 높은 ginsenoside F2는 지표성분 선정의 기초자료로 이용할 수 있을 것으로 기대된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.