[논문]꿀벌(Apis mellifera L.) 일벌독의 생체아민 cadaverine 함량 및 분석법

최홍민; 김효영; 김세건; 한상미

doi:10.5352/jls.2021.31.2.144

꿀벌(Apis mellifera L.) 일벌독의 생체아민 cadaverine 함량 및 분석법
Analysis of Cadaverine and Its Worker Honeybee Venom Content (Apis mellifera L.) 원문보기

생명과학회지 = Journal of life science, v.31 no.2, 2021년, pp.144 - 148

최홍민 (국립농업과학원 농업생물부 잠사양봉소재과) , 김효영 (국립농업과학원 농업생물부 잠사양봉소재과) , 김세건 (국립농업과학원 농업생물부 잠사양봉소재과) , 한상미 (국립농업과학원 농업생물부 잠사양봉소재과)

초록
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본 연구의 목적은 항염, 항균 등 다양한 기능성을 갖는 서양종꿀벌(Apis mellifera L.)의 일벌독에서 분리한 봉독의 활성아민 성분과 함량을 분석하고 그 분석법을 검토하였다. 본 연구에서는 Ultra Performance Liquid Chromatography에 Halo C18컬럼과, acetonitrile 및 증류수를 이동상으로 사용하여 분석시간 13분 이내에서 봉독의 cadaverine에 대한 성분 분석법을 개발하였고, 분석법 밸리데이션을 통하여 특이성, 정확성, 정밀성을 갖춘 분석법임이 확인되었다. 봉독의 cadaverine의 직선성은 R2=0.99 이상으로 측정되어 양호하게 분석되었고, 검출한계는 0.3 ㎍/ml, 정량한계는 0.3 ㎍/ml으로 나타났으며, 회수율은 97.6~99.1%로 나타났다. Cadaverine의 일내 정밀도는 상대표준편차(RSD) 값이 0.25~0.44%였으며, 일간 정밀도는 0.25~1.25%로 상대표준편차 값이 5% 이내의 우수한 정밀성을 갖는 것으로 확인되었다. 이러한 분석법을 통해 지금까지 봉독에서는 보고된 바 없는 활성아민 cadaverine이 평균 1.10±0.05 mg/g 함유된 것으로 확인되었다. 따라서 본 연구는 봉독에서 cadaverine 함량과 cadaverine 분석법에 대한 직선성, 검출한계, 정량한계 및 회수율을 측정한 결과, 모두 만족스러운 결과를 나타냈으며, 봉독의 cadaverine에 대한 기초자료와 생리활성에 연구로 사용될 수 있을 것으로 기대된다.

Abstract ▼ AI-Helper

This study aimed to analyze the content and composition of a biological amine, cadaverine, isolated from the venom of worker honeybees (Apis mellifera L.). This biological amine―which has diverse functionality, such as anti-inflammatory and antibacterial effects―has not been previously reported in bee venom. An assay completed in 13 minutes was developed for the cadaverine present in the bee venom using an ultra-performance liquid chromatograph and a Halo C18 column with acetonitrile and water as the mobile phase. The specificity, accuracy, and precision of the assay were verified, and the assay was validated. The linearity for cadaverine in the bee venom was R2=0.99 or above, indicating a moderate level. The limit of detection and limit of quantification were both 0.3 ㎍/ml, and the rate of recovery was 97.6%-99.1%. The relative standard deviation (RSD) of the intra-day precision and inter-day precision for cadaverine was 0.25%-0.44% and 0.25%-1.25%, respectively, with an RSD that fell within 5% indicating excellent precision. Through this novel assay, it was found that the mean content of cadaverine was 1.10±0.05 mg/g. Our results indicated that the linearity, limit of detection, limit of quantification, and rate of recovery of the cadaverine assay were of a satisfactory level, and the cadaverine content of the bee venom was ably determined. This study provides basic data on cadaverine in bee venom, which will prove useful in further studies on the bioactivity of this component.

주제어

표/그림 (7)

표 Table 1. Chromatographic conditions for analysis of cadaverine in honeybee venom
그림 Fig. 1. Chromatogram of (A) cadaverine and (B) honeybee ven-om at 254 nm.
그림 Fig. 2. Comparison of UV spectrum of (A) cadaverine, and (B) honeybee venom.
표 Table 2. Measurement of LOD, LOQ and linearity for cadaverine
표 Table 3. Precision data of cadaverine deviatives in honeybee venom
표 Table 4. Recovery rates of cadaverine deviatives in honeybee venom
표 Table 5. Contents of cadaverine in honeybee venom

AI 본문요약
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문제 정의

따라서 본 연구에서는 서양종 꿀벌 일벌의 독에서 생체 아민 성분인 cadaverine을 확인하고 봉독에서의 분석법을 확립하고자 하였다.

제안 방법

봉독 내 생체 아민류를 분석하기 위한 UPLC 분석법의 타당성을 검증하기 위하여 특이성, 직선성, 정확성, 정밀성, 검출한계, 정량한계 등을 평가하였다. 봉독 내 생체 아민인 cadaver- ine의 특이성은 표준품과 봉독 내 UPLC 크로마토그램의 피크의 머무름시간과 UV 스펙트럼 패턴의 일치 여부로 평가하였다.
봉독 내 생체 아민류를 분석하기 위한 UPLC 분석법의 타당성을 검증하기 위하여 특이성, 직선성, 정확성, 정밀성, 검출한계, 정량한계 등을 평가하였다. 봉독 내 생체 아민인 cadaver- ine의 특이성은 표준품과 봉독 내 UPLC 크로마토그램의 피크의 머무름시간과 UV 스펙트럼 패턴의 일치 여부로 평가하였다. Fig.
봉독 내에 존재하는 다양한 생체 아민류를 유도체화하여 분석하는 분석법을 확립하고자 다양한 용매 조성, 컬럼의 종류, 온도, 파장 등의 조건을 달리하여 새로운 분석 조건을 확립하였다(Table 1). 총 분석 시간은 13분이었으며, 이동상으로는 acetonitrile과 증류수를 사용하고, C18 (2.

성능/효과

본 연구를 통해 봉독 내에 생체 아민류를 분석할 수 있었으며, 기존 HPLC를 이용한 방법보다 짧은 시간 내에 높은 분리도와 재현성을 갖는 분석이 가능한 분석법을 확립하였다.
본 연구에서는 지금까지 봉독에서 보고된 바 없는 cadaverine 성분이 평균 0.11%가량 함유된 것으로 확인하였다. 또한 봉독에서의 생체 아민인 cadaverine 분석에 대한 직선성, 검출한계, 정량한계 및 회수율을 측정한 결과, 모두 만족스러운 결과를 나타냈으며, 봉독의 생체 아민에 대한 기초자료로 사용될 수 있을 것으로 기대되며 향후 cadaverine이 봉독에서의 역할에 대한 연구가 필요하다.
봉독 내 cadaverine 함량은 1.10±0.05 mg/g 존재하였고, 상대표준편차는 4.6%로 측정되었다
6%로 측정되었다. 봉독 내에 cadaverine 함량은 평균 0.11% 존재하는 것으로 확인되었다 (Table 5).
봉독에 cadaverine을 혼합하여 각각 12.5, 25, 50 μg/ml 농도에서 회수율을 측정한 결과, 97.6~99.1%로 높은 회수율을 나타내었다 (Table 4)

후속연구

11%가량 함유된 것으로 확인하였다. 또한 봉독에서의 생체 아민인 cadaverine 분석에 대한 직선성, 검출한계, 정량한계 및 회수율을 측정한 결과, 모두 만족스러운 결과를 나타냈으며, 봉독의 생체 아민에 대한 기초자료로 사용될 수 있을 것으로 기대되며 향후 cadaverine이 봉독에서의 역할에 대한 연구가 필요하다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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