[논문]Micropreparative purification of recombinant human interleukin-2

Wier, M.P.; Sparks, J.; Chaplin, A.M.

doi:10.1016/S0021-9673(01)94058-0

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Micropreparative purification of recombinant human interleukin-2

Journal of chromatography, v.396, 1987년, pp.209 - 215

Wier, M.P. , Sparks, J. , Chaplin, A.M.

Abstract ▼ AI-Helper

Recombinant Interleukin-2 (IL-2) is expressed in E. coli as insoluble aggregates; a protocol has been developed for solubilization, renaturation and purification of IL-2 from such aggregates at the 5-10-mg level. IL-2 aggregates were isolated from soluble proteins by centrifugation, subjected to a 1 M guanidine hydrochloride wash and a butan-1-ol wash (the latter to remove lipid), dissolved in 8 M guanidine hydrochloride-10 mM dithiothreitol and partly purified by gel permeation chromatography. Refolding/oxidation was then performed by dilution into Tris-HCl, pH 8.5 containing 1.5 μM copper sulphate to accelerate autoxidation. Final purification was by successive cation-exchange and reversed-phase high-performance liquid chromatographic steps, yielding over 99.5% pure IL-2 with an overall recovery of 20%.

참고문헌 (16)

Behring Inst. Mitt. Robb 77 56 1985

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Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. Robb 81 6486 1984 10.1073/pnas.81.20.6486

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Nucleic. Acids Res. Devos 11 4307 1983 10.1093/nar/11.13.4307

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Biochem. J. Liang 229 429 1985 10.1042/bj2290429

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Biochem. Biophys. Res. Commun. Kato 31 692 1985 10.1016/0006-291X(85)90472-3

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Biochem. J. Weir 244 1987
J. Immunol. Henderson 131 810 1983 10.4049/jimmunol.131.2.810

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Nature (London) Laemmli 227 680 1970 10.1038/227680a0

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Anal. Biochem. Wray 118 197 1981 10.1016/0003-2697(81)90179-2

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Biochemistry Shire 23 6474 1984 10.1021/bi00321a031

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Anal. Biochem. Browning 155 123 1986 10.1016/0003-2697(86)90236-8

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Biotechniques Light 3 298 1985 10.1038/nbt0485-298

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J. Chromatogr. Kunitani 359 391 1986 10.1016/0021-9673(86)80093-0

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Biochem. Biophys. Res. Commun. Yamada 135 837 1986 10.1016/0006-291X(86)91004-1

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J. Immunol. Gillis 120 2027 1978 10.4049/jimmunol.120.6.2027

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F. Battig, R. Plot, T. Gramanitsch and M. Wrann, presented as an oral presentation at 6th International Symposium on HPLC of Proteins, Peptides and Polynucleotides, Baden-Baden, October 20-22, 1986.

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