$\require{mediawiki-texvc}$
  • 검색어에 아래의 연산자를 사용하시면 더 정확한 검색결과를 얻을 수 있습니다.
  • 검색연산자
검색연산자 기능 검색시 예
() 우선순위가 가장 높은 연산자 예1) (나노 (기계 | machine))
공백 두 개의 검색어(식)을 모두 포함하고 있는 문서 검색 예1) (나노 기계)
예2) 나노 장영실
| 두 개의 검색어(식) 중 하나 이상 포함하고 있는 문서 검색 예1) (줄기세포 | 면역)
예2) 줄기세포 | 장영실
! NOT 이후에 있는 검색어가 포함된 문서는 제외 예1) (황금 !백금)
예2) !image
* 검색어의 *란에 0개 이상의 임의의 문자가 포함된 문서 검색 예) semi*
"" 따옴표 내의 구문과 완전히 일치하는 문서만 검색 예) "Transform and Quantization"
쳇봇 이모티콘
안녕하세요!
ScienceON 챗봇입니다.
궁금한 것은 저에게 물어봐주세요.

논문 상세정보

초록

연구배경: EGF는 혈관생성이나 종양생성, 전이 등으로 암을 악화시킬 수 있는 유전자이지만 비정상적으로 EGF 수용체의 활성이 떨어져 있는 당뇨병환자에게는 표피의 재생성을 유도하여 피부상처회복을 촉진시켜주는 중요한 성장인자이다. 현재 판매되고 있는 Peptide EGF는 당뇨병성 족부궤양 상처치료에 유용하게 사용되고 있지만 가격이 매우 비싸고 임상치료에 있어 효율성이 떨어진다. 또한 매일 도포해야 하는 불편함으로 임상에서 사용하기에는 불편하다. EGF 유전자 치료는 이러한 단점들을 극복하여 한 번의 투여로 상처의 회복을 기대할 수 있다. 방법: 각각의 EGF 유전자를 만들기 위해 PCR 방법을 통해 생성, 증폭시켰으며 pβ-vactor에 클로닝하기 위해 제한효소 EcoRⅠ과 NotⅠ을 사용하였다. 클로닝된 유전자들은 여러 종류의 세포주에 BPEI polymer를 이용하여 transfection을 하고 Human EGF ELISA kit로 단백질 양을 측정하였다. 그리고 Western blotting을 통하여 EGF의 생물학적 기능을 관찰하였다. 결과: $EGF^{159}$$EGF^{828}$를 pβ-vector에 클로닝하여 만들었으며 ELISA 실험을 통해 단백질 생성을 확인하였다. 그 결과 $EGF^{159}$는 세포 안에서만 발현이 되지만 $EGF^{828}$은 발현된 단백질이 세포 밖으로까지 배출되었으며 furin cleavage site를 포함한 EGF 유전자는 포함하지 않은 EGF 유전자보다 그 발현율이 2배 이상 차이가 나는 것을 볼 수 있었다. 또한 배지 속으로 배출된 EGF 단백질은 EGF 수용체의 하계 신호전달물질인 PI3K와 GSK3β의 인산화를 Western blotting 실험을 통하여 관찰함으로써 생물학적 기능을 가지고 있음을 확인할 수 있었다. 결론: pβ-furin $EGF^{828}$은 생물학적으로 활성이 있는 EGF의 발현 효율을 높여 당뇨병성 족부 궤양의 비바이러스 유전자 치료에 유용하게 사용될 수 있을 것이다.

Abstract

Background: Epidermal Growth Factor (EGF) is one of the important growth factors involved in the epithelialization during cutaneous wound healing. Peptide EGF has been used for the treatment of diabetic foot ulcer. But the inferiority of cost-effectiveness and the inconvenience of daily application might have restricted its wide clinical usage. EGF gene therapy could dramatically improve the efficacy and inconvenience through long-term expression and bypassing the EGF degradation by hostile non-specific proteinases expressed in the wound bed. Methods: EGF DNAs were amplified via PCR. For the more effective secretion from the transfected cell, we inserted furin cleavage site into EGF plasmids. The efficacy of novel plasmid pβ-EGF was verified by transfection into the various animal cell lines, and the biologic potency of expressed EGF was confirmed via phosphorylation of PI3K and GSK3β by Western blotting. Results: We tested various kinds of human EGFs. One of the human EGF isoforms, $EGF^{828}$ including a membrane-anchoring domain was successfully released as the mature EGF protein in the cell culture media. Also EGF plasmid including furin cleavage site showed more than 2-fold increased EGF expression compared with the sequence without furin cleavage site. Conclusion: In conclusion, these findings suggest that mature EGF could be released easily out of cells by modifying EGF DNA sequence. Our novel EGF plasmid DNA could markedly increase the efficiency of non-viral gene therapy for diabetic foot ulcer.

참고문헌 (0)

  1. 이 논문의 참고문헌 없음

이 논문을 인용한 문헌 (0)

  1. 이 논문을 인용한 문헌 없음

원문보기

원문 PDF 다운로드

  • 원문 PDF 정보가 존재하지 않습니다.

원문 URL 링크

원문 PDF 파일 및 링크정보가 존재하지 않을 경우 KISTI DDS 시스템에서 제공하는 원문복사서비스를 사용할 수 있습니다. (원문복사서비스 안내 바로 가기)

상세조회 0건 원문조회 0건

DOI 인용 스타일