IPC분류정보
국가/구분 |
한국(KR)/등록특허
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국제특허분류(IPC8판) |
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출원번호 |
10-2015-0189847
(2015-12-30)
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등록번호 |
10-1672240-0000
(2016-10-28)
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DOI |
http://doi.org/10.8080/1020150189847
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발명자
/ 주소 |
- 신경진
/ 서울특별시 서초구 방배로 *** 가동 ***호
- 이은영
/ 서울특별시 양천구 목동 중앙본로**길 **, ***호
- 오유나
/ 서울특별시 용산구 원효로 *** 용산e편한세상 ***동 ****호
- 양영근
/ 충청북도 청주시 청원구 오창읍 오창중앙로 **, ***동 ***호 (중앙하이츠빌아파트)
- 이승환
/ 서울특별시 서초구 반포대로 *** 대검찰청 과학수사기획관실
- 심정은
/ 서울특별시 서초구 반포대로 *** 대검찰청 과학수사*과
- 김혜연
/ 서울특별시 서초구 반포대로 *** 대검찰청 과학수사*과
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출원인 / 주소 |
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대리인 / 주소 |
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심사청구여부 |
있음 (2015-12-30) |
심사진행상태 |
등록결정(일반) |
법적상태 |
등록 |
초록
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본 발명은 23개의 global STR 유전자형을 동시에 분석할 수 있는 인간 객체(human subject) 염색체 상의 STR 분석방법(Kplex-23 system)에 관한 것이다. 본 발명에서 구축한 Kplex-23 system은 CODIS Core Loci Working Group에서 확장을 권고하는 STR과 유럽 표준 확장 STR을 포함하여 성별을 구분하는 마커 및 Y 염색체 SNP 등 23개 마커를 동시에 분석할 수 있다. 본 발명의 분석방법은 기존 Kplex system과의 호환성을 최대한 유지하면서도 희귀 대립유전자가
본 발명은 23개의 global STR 유전자형을 동시에 분석할 수 있는 인간 객체(human subject) 염색체 상의 STR 분석방법(Kplex-23 system)에 관한 것이다. 본 발명에서 구축한 Kplex-23 system은 CODIS Core Loci Working Group에서 확장을 권고하는 STR과 유럽 표준 확장 STR을 포함하여 성별을 구분하는 마커 및 Y 염색체 SNP 등 23개 마커를 동시에 분석할 수 있다. 본 발명의 분석방법은 기존 Kplex system과의 호환성을 최대한 유지하면서도 희귀 대립유전자가 나타날 경우에도 STR 유전자형을 결정에 문제가 최소화 되도록 설계되었다. 특히, 4개의 형광 dye를 사용하여 모든 마커의 amplicon 크기가 70 bp ~ 420 bp가 되도록 구축되었으며, 100 pg의 DNA를 대상으로도 allele drop-in이나 drop-out 없이 모든 STR의 유전자형을 결정할 수 있는 민감도를 가지고 있다. 본 발명의 분석방법을 적용한 분석키트는 Prototype 개발 단계에서 사용한 기본적인 PCR 효소와 버퍼뿐 아니라 국산 효소와 버퍼를 사용하여도 대등한 PCR performance를 나타내므로, 향후 대립유전자 사다리의 구축을 통하여 확장 STR 분석키트를 국산화 할 수 있을 것이다.
대표청구항
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다음의 단계를 포함하는 인간 객체(human subject) 염색체 상의 STR (short tandem repeat) 분석방법: (a) 인간 객체 DNA 시료의 아멜로제닌(Amelogenin), D5S818, TH01, D18S51, TPOX (Human thyroid peroxidase gene), D1S1656, D3S1358, D7S820, D21S11, D19S433, D10S1248, D22S1045, CSF1PO (Human c-fms proto-oncogene for CSF-1 receptor gene), vWA (v
다음의 단계를 포함하는 인간 객체(human subject) 염색체 상의 STR (short tandem repeat) 분석방법: (a) 인간 객체 DNA 시료의 아멜로제닌(Amelogenin), D5S818, TH01, D18S51, TPOX (Human thyroid peroxidase gene), D1S1656, D3S1358, D7S820, D21S11, D19S433, D10S1248, D22S1045, CSF1PO (Human c-fms proto-oncogene for CSF-1 receptor gene), vWA (von Willebrand factor A), D16S539, D2S1338, D2S441, DYS391, D8S1179, D13S317, FGA (Human fibrinogen alpha chain), Y-M175 및 D12S391 의 유전좌위에 상보적으로 결합하는 각각의 프라이머를 이용하여 증폭을 실시하는 단계; 및(b) 상기 단계 (a)의 멀티플렉스 증폭 산물을 이용하여 상기 유전좌위의 대립유전자형을 결정하여, 상기 인간 객체를 유전자로 감식하는 단계; 를 포함하는 멀티플렉스 유전자 증폭을 이용한 분석대상의 인간 객체의 유전자 감식을 위한 분석방법으로서,상기 아멜로제닌 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제1서열 및 제2서열이고; 상기 D5S818 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제3서열 및 제4서열이며; 상기 TH01 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제5서열 및 제6서열이고; 상기 D18S51 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제7서열 및 제8서열이며; 상기 TPOX 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제9서열 및 제10서열이고; 상기 D1S1656 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제11서열 및 제12서열이며; 상기 D3S1358 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제13서열 및 제14서열이고; 상기 D7S820 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제15서열 및 제16서열이며; 상기 D21S11 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제17서열 및 제18서열이고; 상기 D19S433 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제19서열 및 제20서열이며; 상기 D10S1248 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제21서열 및 제22서열이고, 상기 D22S1045 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제23서열 및 제24서열이며; 상기 CSF1PO 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제25서열 및 제26서열이고; 상기 vWA 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제27서열 및 제28서열이며; 상기 D16S539 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제29서열 및 제30서열이고; 상기 D2S1338 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제31서열 및 제32서열이며; 상기 D2S441 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제33서열 및 제34서열이며; 상기 DYS391 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제35서열 및 제36서열이며; 상기 D8S1179 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제37서열 및 제38서열이며; 상기 D13S317 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제39서열 및 제40서열이며; 상기 FGA 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제41서열 및 제42서열이며; 상기 Y-M175 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제43서열 및 제44서열이며; 상기 D12S391 유전좌위에 상보적으로 결합하는 프라이머는 서열목록 제45서열 및 제46서열이고,상기 서열목록 제1서열 내지 제12서열로 구성된 군으로부터 선택되는 프라이머는 제1형광염료로 표지되고, 상기 서열목록 제13서열 내지 제24서열로 구성된 군으로부터 선택되는 프라이머는 제2형광염료로 표지되며, 상기 서열목록 제25서열 내지 제36서열로 구성된 군으로부터 선택되는 프라이머는 제3형광염료로 표지되고, 상기 서열목록 제37서열 내지 제46서열로 구성된 군으로부터 선택되는 프라이머는 제4형광염료로 표지되며,상기 단계 (a)의 증폭산물은 70-420 bp 인 분석방법.
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