보고서 정보
주관연구기관 |
연세대학교 치과대학 Yonsei University |
연구책임자 |
이승일
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참여연구자 |
유주현
,
유윤정
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보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
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발행년월 | 1999-05 |
주관부처 |
보건복지부 |
사업 관리 기관 |
연세대학교 Yonsei University |
등록번호 |
TRKO200200019848 |
DB 구축일자 |
2013-04-18
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초록
▼
$\circ$ 연구개발목표 및 내용
디인자성 질환인 치아우식증을 예방하기 위하여 토양으로부터 유리되는 용균효소를 사용하였다. 여러가지 조건에서 S. mutans를 선택적으로 억제하는 용균효소 1012, 4830, 5215를 분리하고 이의 항우식효과를 평가하였다, 토양미생물에서 추출한 용균효소의 항우식효과 가능성을 이끌어 내기 위하여 1) 토양으로부터 S. mutans에 대한 용균효소를 생성하는 미생물을 분리하여, 이들 미생물로부터 용균효소를 분리 정제하고, 2) 분리된 용균효소의 물리화학적 특성 (pH 및
$\circ$ 연구개발목표 및 내용
디인자성 질환인 치아우식증을 예방하기 위하여 토양으로부터 유리되는 용균효소를 사용하였다. 여러가지 조건에서 S. mutans를 선택적으로 억제하는 용균효소 1012, 4830, 5215를 분리하고 이의 항우식효과를 평가하였다, 토양미생물에서 추출한 용균효소의 항우식효과 가능성을 이끌어 내기 위하여 1) 토양으로부터 S. mutans에 대한 용균효소를 생성하는 미생물을 분리하여, 이들 미생물로부터 용균효소를 분리 정제하고, 2) 분리된 용균효소의 물리화학적 특성 (pH 및 온도에 따른 활성 및 안정성) 및 작용기작 (다양한 균주에 대한 용균 spectrum 및 효소의 활성)을 평가하며, 3) 시험관내 , 4) 인공구강모델 및 5) 생체내 (실험동물 및 사람을 대상으로) 용균효소의 항우식효과 및 세포독성능을 분석하였다.
$\circ$ 연구결과
시험관 및 구강모델에서의 연구결과 세 가지 1012, 4830 및 5215 효소 모두 독성이 없으며, S. mutans의 산생성 및 세포외 다당체의 합성은 억제하지 않았으나 S. mutans 의 hydroxyapatite bead에 대한 부착 및 hydroxyapatite bead 의 $Ca^{2+}$ 유리를 억제하였다, 또한 인공적으로 우식을 유발시킨 법랑질 표면경도에 대하여 1012 와 4830 그리고 5215 효소 모두 표면경도를 증가시켰다. 따라서 이들 용균효소는 적어도 시험관내에서 세균 자체를 용해시키는 작용이외에 1) 세균의 치면부착 차단, 2) demineralization의 억제, 그리고 reminerlization은 촉진시켜 항우식효과를 나타내는 것으로 생각되지만, S. mutans의 산생성능 및 세포 외 다당체합성에 용균효소가 아무런 영향을 미치지 않는 점으로 미루어 보아, 용균효소에 의한 $Ca^{2+}$ 유리 억제 효과는 산생성능의 차이가 아닌 용균효소 그 자체 물리화학적 특성 때문에 발생된 결과로 풀이된다, 특히 4830 및 5215 효소에 의한 S. mutans외 부착 및 $Ca^{2+}$ 유리 억제효과가 사람 타액 및 인공 타액이 있는 조건에서 그 효과가 다른게 나타나는 것으로 보아 용균효소와 타액단백질간에 화학적인 interaction 이 용균효소의 항우식효과를 결정하는 중요한 인자로 생각된다.
결론적요로 토양미생물에서 추출한 1012 ,483O 및 5215 효소의 항우식 효과를 시험관, 인공구강 및 생체내에서 단계적으로 검토하여 이들 용균효소가 항우식제로서 사용 가능한가를 평가하였으며, 그 결과 여기서 사용한 모든 용균효소들은 세균 세포벽의 peptidoglycan 의 peptide를 절단하는 endopeptidase 역할을 하는 물질로 확인되었으며, 특히 4830 효소가 최종적으로 사람 구강에서 1) 세균의 치면 부착을 억제하거나, 아니면 2) 탈회억제, 혹은 재광화 촉진과정을 통하여 항우식효과를 나봐내는 것으로 생각한다.
Abstract
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Dental canes is perhaps one of the most common infectious diseases. Although canes prevalence in many countries has declined remarkably, dental caries in Korea remains to be controlled. The essential process in dental caries involves demineralization of tooth surface by lowering pH in dental plaque
Dental canes is perhaps one of the most common infectious diseases. Although canes prevalence in many countries has declined remarkably, dental caries in Korea remains to be controlled. The essential process in dental caries involves demineralization of tooth surface by lowering pH in dental plaque consisting of a variety of microorganisms. It is believed that Streptococcus mutans (S. muians) plays a major role in the development of the dental caries by producing high concentration of organic acids. In the dental caries development, there are four processes which are the bacterial attachment, proliferation, glucose polymerization and acid production. These observations justify a broadening of current caries-prevention strategies, which presently rely heavily on. lytic enzyme against bacteria, to include the incoorperation of antimicrobial agents have a direct inhibitory effect on the growth and metabolism of oral organism, while chemotherapeutic agents can function indirectly by removing dental plaque or by interfering with microbial adhesion and plaque formation
Antimicrobial agents can be used to prevent the initiation and the progression of dental caries. For prevention of dental caries which is caused by this process, searching for potential cariogenic agents other than fluoride has been a great attention to improve oral health worldwide. Therefore, the purpose of this study was to test the cariogenic potential of three microbial enzymes (1012, 4830, 5215), isolated from Korean soil. As results of this study, no toxic effects of lytic enzyme on normal cell were seen through the animal study. And it may be speculated that lytic enzymes released from soil bacteria seems to disrupt the bacterial cell wall by means of breakdown of peptidoglycan. In fact lytic enzymes, 1012, 4830 and 5215 not only prevented the attachment of S. mutans to hydroxyapatite beads but inhibit demineralization m vivo. Of particular, in animal study, lytic enzyme 4830 resulted in a significant (p<0.05) reduction of buccal and lingual smooth surface caries as compared to 1012 or negative control. Moreover, we found that 4830 has an ability to inhibit the demineralization and to accelerate the remineralization process on human subjects.
목차 Contents
- 제출문...1
- 요약문...3
- 영문요약문(SUMMARY)...7
- 목차...8
- 제1장 서론...8
- 1. 연구개발의 목적...8
- 2. 연구개발의 필요성 및 범위...11
- 제2장 국내.외 기술개발 현황...14
- 제3장 연구개발 수행 내용 및 결과...17
- 1 절. 제 1 세부과제...17
- 2 절. 제 2 세부과제...36
- 3 절. 제 3 세부과제...56
- 4 절. 제 4 세부과제...75
- 5 절. 제 5 세부과제...92
- 제4장 연구개발 목표 달성도 및 대외 기여도...102
- 1. 연구개발 목표 및 달성도...102
- 2. 대외 기여도...103
- 제5장 연구개발 결과의 활용성과 및 계획...104
- 가. 계량적 성과...104
- 나. 성과내용기술...104
- 다. 활용계획...105
- 제6장 기타 중요변경사항...106
- 제7장 참고문헌...107
- 최종보고서요약(초록)...115
- 사업계획서와 그 집행실적과의 대비표...116
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