초록 ▼

현재 국내에서 생산되는 반합성 penicillin 제제 항생물질의 생산량은 '70년내에 이르러 급격히 증가하고 있으며 따라서 이외 합성에 필요한 전구물질6-APA의 수요도 크게 증가하고있다. 현재까지의 추세로 보아서 1980년에 이르러 6-APA의 소요량은 약 160톤에 달할것으로 생각되며 현 싯가 약 120억원에 해당되는 양이 된다. 본 연구실에서는 현 시점에서의 6-APA의 국내생산의 중요성을 인식하여 현재 국내에서 사용되고있는 화학적 공정에 비하여 여러가지 잇점을 갖고 있는 penicillin amidase를 사용한 효소가수분

현재 국내에서 생산되는 반합성 penicillin 제제 항생물질의 생산량은 '70년내에 이르러 급격히 증가하고 있으며 따라서 이외 합성에 필요한 전구물질6-APA의 수요도 크게 증가하고있다. 현재까지의 추세로 보아서 1980년에 이르러 6-APA의 소요량은 약 160톤에 달할것으로 생각되며 현 싯가 약 120억원에 해당되는 양이 된다. 본 연구실에서는 현 시점에서의 6-APA의 국내생산의 중요성을 인식하여 현재 국내에서 사용되고있는 화학적 공정에 비하여 여러가지 잇점을 갖고 있는 penicillin amidase를 사용한 효소가수분해법으로 6-APA를 생산하는 연구를 시작하였다.
본 연구에서는 효소원으로 Escherichia coli를 사용 하였고, penicillin amidase 생산에 대한 배지조성을 최적화 하였으며 균체효소의 제반 특성을 조사하고, 이 효소를 고정화 하여 단일공정, 연속 공정을 통한 6-APA생산에 관한 실험실적 연구를 검토 하였기에 결과를 보고하는 바이다.

목차 Contents

• 표지 ...1
• 제출문 ...5
• 머리말 ...7
• 차례 ...9
• I. 서론...11
• II. 실험재료 및 방법...12
• 1. 사용균주...12
• 2. 배지조성 및 발효조건...12
• 3. 균체 효소(Whole-cell enzyme)의 준비...13
• 4. 효소반응 및 효소 활성도의 측정...13
• 5. 효소의 특성...15
• 6. 효소의 고정화...16
• 7. 고정화 효소의 컬럼 조작(column operation)...17
• III. 실험결과 및 고찰...18
• 1. 균주선정...18
• 2. 배지조성의 최적화...18
• 가. 유기질소원의 종류 및 농도...18
• 나. 탄소원의 종류 및 농도...20
• 다. phenylacetic acid(PAA)의 첨가농도 및 시간...21
• 라. 금속이온의 종류 및 농도...23
• 마. 최적 pH...23
• 3. 효소생산의 발효경과...25
• 4. Penicillin amidase의 특성...25
• 가. 최적온도 및 pH...25
• 나. 온도 및 pH에 따르는 효소의 안정도...28
• 다. 반응시간에 따르는 변환율...29
• 라. 효소의 재사용 및 acetone 처리 효과...30
• 5. 고정화 효소의 특성...32
• 가. 효소의 활성도...32
• 나. 최적온도 및 pH...32
• 다. 온도에 대한 효소안정도...34
• 6. 고정화 효소의 반응공정...36
• 가. 단일공정...36
• 나. 컬럼을 이용한 연속공정...36
• 7. Chromatography에 의한 6-APA의 동정...45
• IV. 결론 및 건의사항...47
• 참고문헌...49