초록 ▼

국내 식육에서 총 70주의 L. monocytogenes을 분리하였으며, 이는 14주의 serotype 1/2a (닭고기: 6주, 돼지고기: 1주, 돼지분변: 7주), 12주의 serotyp 1/2b (닭고기: 3주, 돼지고기: 1주, 햄버거: 1주, 돼지분변: 7주), 44주의 serotyp 1/2c (닭고기: 19주, 돼지고기: 6주, 돼지분변: 17주, 도축장 칼: 1주, silage: 1주)로서 1/2c가 60% 이상의 비율을 차지하였다. 또한 L. monocytogenes의 대표적인 병원성 인자인 haemolytic act

국내 식육에서 총 70주의 L. monocytogenes을 분리하였으며, 이는 14주의 serotype 1/2a (닭고기: 6주, 돼지고기: 1주, 돼지분변: 7주), 12주의 serotyp 1/2b (닭고기: 3주, 돼지고기: 1주, 햄버거: 1주, 돼지분변: 7주), 44주의 serotyp 1/2c (닭고기: 19주, 돼지고기: 6주, 돼지분변: 17주, 도축장 칼: 1주, silage: 1주)로서 1/2c가 60% 이상의 비율을 차지하였다. 또한 L. monocytogenes의 대표적인 병원성 인자인 haemolytic activity (LLO) 및 phosphatidylinositol-phospholipase (PI-PLC), phosphatidylcholin-phospholipase C (PC-PLC)의 activity를 측정하였을 때, 분리 장소나 혈청형 등과 상관성 없이 병원성의 차이를 나타내었으며, serotype내에서 각각의 병원성 인자에 대한 능력이 다른 균주들이 분리되었다. 따라서 in vitro 시험에서 나타난 병원성 차이를 정착하게 분석하고 비교하기 위하여 마우스를 이용한 생체내에서의 병원성을 병리학적으로 관찰하였다.
총 70주의 L. monocytogenes을 분리주에 대해 L. monocytogenes의 대표적인 병원성 인자인 LLO, PI-PLC, PC-PLC activity 및 혈청형 별로 강독주와 약독주를 21개주 선별하여 리스테리아에 감수성이 높은 BALB/c 마우스를 대상으로 생체 내 병원성 비교를 수행하였으며, 간, 비장, 위, 뇌에서의 균수를 측정하고 병리학적평가를 수행하였다.
마우스 감염 시험결과 Serotype 및 LLO, Pi-PLC, Pc-PLC activity에 따른 각 장기에서의 균주 감염률이 차이가 나지 않았으며, in vitro 시험결과에 상관없이 in vivo에서는 각 장기에서 균체가 검출되었다. 또한, 분리된 모든 균주가 경구 접종시, 마우스의 간 및 비장에서 translocation되어 검출되는 것을 확인하였다.
병리학적인 소견은, 정상적인 BALB/c 마우스의 위에서는 NGR(non-glandular region) 부위와 fundus 부위 모두에서 호중구, 림프구, 궤양소 등이 관찰되지 않았으며, NGR-fundus junction부위에서만 소수의 호중구 및 호산구가 submucosa 층에서 관찰되었다 그러나 L1, L16, L20, L24 등을 제외한 거의 모든 군에서 호중구, 림프구 등을 동반한 급성위염소견이 관찰되었으며, L64, L15 등은 궤양을 동반한 중증의 급성위염 소견이 관찰되었으며, 이는 표준균주 (ATCC 51774)보다 심한 병변을 나타내었다. 간장에서는 호중구, 림프구, 마크로파지 등으로 이루어진 multi focal necrosis, granuloma 가 간 실질에 산발적으로 관찰되었으며, 비장에서는 적비수 내의 호중구 침윤과 백비수의 괴사 및 탈락이 특징적으로 관찰되었다. 그러나 병리학적인 비교에서도, In vitro 시험에서 나타난 균주의 독력에 따른 차이는 관찰되지 않았다.
또한, Hemolytic activity 와 PC-PLC에서 강한 능력을 보이는 균주를 serotype별로 각각 한 균주를 선정하여 리스테리아에 저항성을 가진 것으로 알려진 ICR마우스에 경구 감염시켰을 때, BALB/c에서 보다 약한 병변이 관찰되었으나, 각 장기에서 균체가 검출되었다. 특히, ATCC ,51774접종 마우스 한 개체에서 뇌에서 균체가 검출되고 meningitis가 관찰되었다. 이는 단독 경구 감염으로서는 처음 관찰된 사례이나, 개체차에 의한 결과인지, 동물의 strain 에 따른 건지에 대해서는 추가 연구가 필요할 것으로 생각된다.

Abstract ▼

In order to investigate the possible pathogenicities of Listeria monocytogenes strains isolated from Korea, a total of 70 isolates from rared pork, pigpen (slaughter house) and from vegetable were characterized by serotyping, and analysis of the virulent Pc-PLC and Pi-PLC. Serotyping indicated the p

In order to investigate the possible pathogenicities of Listeria monocytogenes strains isolated from Korea, a total of 70 isolates from rared pork, pigpen (slaughter house) and from vegetable were characterized by serotyping, and analysis of the virulent Pc-PLC and Pi-PLC. Serotyping indicated the presence of three different serovars: 1/2a, 1/2b and 1/2c. Among the 70 isolates from poultry, vegetable, pork and related environments the serovars prevalence was 1/2a (14/70), 1/2b (12/70) and 1/2c (44/70). In addition, to investigate the relationship between the results oft study in vitro(for PC-PLC and Pi-PLC) and their pathogenicities in vivo, isolated L. monocytogenes were orally inoculated to female BALB/c mice.
The pathogenic potential of a given L. monocytogenes strain as determined by bacterial enumeration and histopathological scoring. Colony forming units (CFUs) of each organs (liver, spleen, stomach, brain) were calculated from plate counts on the PALCM listeria selective agar.
Our results showed no significant differences in the virulence-related in vitro properties of the strains analyzed. All strains were equally pathogenic following Intra-peritoneal inoculation of mice. In mice inoculated intra-oral with 21 representative strains of the 4 types of listeriosis, there were no significant differences in the bacterial count when comparing serotypes and virulence activities, suggesting that the strains were comparable in terms of mean oral infectivity.

목차 Contents

• 용역연구사업 연구결과보고서...1
• 표지...2
• 제출문...5
• 목차...6
• 연구결과보고서 요약문...7
• 국문요약문...7
• 영문요약문...8
• II. 총괄연구개발과제 연구결과...9
• 제1장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표...9
• 1.1 총괄연구개발과제의 목표...9
• 1.2 총괄연구개발과제의 목표달성도...12
• 1.3 국내.외 기술개발 현황...14
• 제2장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법...18
• 1. 국내 식품에서의 L. monocytogenes 오염도 조사...18
• 2. L. monocytogenes 분리주들의 병원성 조사...22
• 3. L. monocytogenes 분리주들의 생체내에서의 병원성 조사(in vivo)...24
• 제3장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 결과...27
• 1. 국내 식품에서의 L. monocytogenes 오염도 조사...27
• 2. L. monocytogenes 분리주들의 병원성 조사 (실험실내 조사, in vitro)...28
• 3. L. monocytogenes 분리주들의 생체내에서의 병원성 조사 (in vitro)...31
• 제4장 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 (가이드라인 포함)...38
• 1절. 연구결과 괄 및 결론...38
• 2절. 가이드라인...40
• 제5장 총괄연구개발과제의 연구성과...63
• 5.1 활용성과...63
• 5.2 활용계획...64
• 제6장 참고문헌...65
• 제7장 첨부서류...66
• III. 제1세부연구개발과제 연구결과...67
• 제1장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표...68
• 1.1 세부연구개발과제의 목표...68
• 1.2 세부연구개발과제의 목표달성도...69
• 1.3 국내.외 기술개발 현황...69
• 제2장 세부연구개발과제의 연구대상 및 방법...72
• 1. L. monocytogenes 분리주들의 생체내에서의 병원성 조사 (in vivo)...72
• 제3장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 결과...75
• 1절 연구개발 결과...75
• 2절 Listeria monocytogenes에 대한 가이드라인...81
• 제4장 세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론...82
• 제5장 세부연구개발과제의 연구성과...83
• 5.1 활용성과...83
• 5.2 활용성과...84
• 제6장 참고문헌...84
• 제7장 첨부서류...84
• III. 제2세부연구개발과제 연구결과...85
• 제1장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표...86
• 1.1 세부연구개발과제의 목표...86
• 1.2 세부연구개발과제의 목표달성도...89
• 1.3 국내.외 기술개발 현황...90
• 제2장 세부연구개발과제의 연구대상 및 방법...92
• 1절 연구개발 내용...92
• 2절 연구방법...94
• 제3장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 결과...101
• 1. 국내식품에서의 L. monocytogenes 오염도 조사...101
• 2. L. monocytogenes 분리주들의 병원성 조사 (실험실내 조사, in vitro)...102
• 제4장 세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론...106
• 제5장 세부연구개발과제의 연구성과...108
• 5.1 활용성과...108
• 5.2 활용계획...109
• 제6장 창고문헌...109
• 제7장 첨부서류...109
• IV. 총괄연구과제요약...110
• V. 제 1 세부연구과제요약...113
• VI. 제 2 세부연구과제요약...116