초록 ▼

1. 항영양소/독소/알러젠 분석
쌀의 항영양소인 trypsin inhibitor, lectin 및 phytate, 감자의 항영양소인 chymotrypsin inhibitor 및 glycoalkaloid에 대한 분석법을 확립하였으며 또한 쌀 및 감자의 allergenic protein의 분석방법을 확립하여 LMO의 실질적동등성 평가에 대한 분석기술을 확립하였다.
2. 삽입유전자 산물의 대량생산/시료제공
LMO 작물의 신규 삽입유전자들인 TPSP 및 NDPK2 유전자의 산물 (단백질)을 대량발현/생산하여 인체위해성

1. 항영양소/독소/알러젠 분석
쌀의 항영양소인 trypsin inhibitor, lectin 및 phytate, 감자의 항영양소인 chymotrypsin inhibitor 및 glycoalkaloid에 대한 분석법을 확립하였으며 또한 쌀 및 감자의 allergenic protein의 분석방법을 확립하여 LMO의 실질적동등성 평가에 대한 분석기술을 확립하였다.
2. 삽입유전자 산물의 대량생산/시료제공
LMO 작물의 신규 삽입유전자들인 TPSP 및 NDPK2 유전자의 산물 (단백질)을 대량발현/생산하여 인체위해성 평가를 위한 시료로 제공하였다.
3. 유전자 발현량 분석
형질전환 감자의 신규삽입유전자 산물인 NDPK2에 대한 항체를 제작하여 NDPK2의 측정법을 확립하여 발현량을 측정한 결과 15.24±0.19ng/mg로 나타났다.
4. 발현단백질의 동등성 증명
형질전환 감자에 삽입된 유전자산물인 NDPK2 단백질과 형질전환 감자에서 발현되는 단백질의 동등성을 western blot 방법을 적용하여 동등성을 증명하였다.
5. 유전자이동 평가
LMO에 삽입된 유전자의 체내이동에 대한 in situ hybridization법을 이용한 평가기술 개발하여 유전자의 동태에 대한 조사를 실시하였다.
6. 알레르기 동물모델 개발
1단계에서 확립된 A/J mouse 모델에 대한 유효성을 검증하기위하여 allergenic protein으로 알려진 OVA, soybean trypsin inhibitor, conalbumin 및 myoglobin을 A/J 및 BN rat에 경구로 투여하여 투여단백질에 대한 특이 IgE 항체 생성여부를 측정한 결과 allergy 동물 모델로서의 사용 가능성을 나타내었다.
7. 혈청 sub-bank 지속적 구축
협동연구기관과 지속적으로 연계하여 혈청을 확보하여 혈청 sub-bank를 지속적으로 구축하고 있으며 이를 평가에 이용하고 있다.
8. 프로파일링 기술
형질전환 작물과 비형질전환 작물의 변화를 알아보기 위하여 TPSP를 형질전환 시킨 벼와 그의 모본에서 RNA를 추출하여 gene fishing 방법을 이용한 유전자발현변화 시험을 실시한 결과 13개의 유전자가 발현에 차이를 나타냈었다.
9. 인체위해성 평가자료 심사/위해성관리/대중홍보
인체위해성에 관련된 대중홍보 및 심사 지원을 실시하였다.
10. 환경스트레스 내성 형질전환 벼의 위해성 평가
환경스트레스 내성 TPSP 형질전환 벼의 위해성 여부를 알아보기 위하여 알레르기동물모델 및 환자혈청 IgE binding assay 등의 알레르기성 평가를 실시한 결과 알레르기유발성을 나타내지 않았으며 독성여부를 알아보기 위하여 반복투여독성 시험을 실시한 결과 독성을 나타내지 않았고 실질적 동등성을 알아보기 위하여 영양성분 및 항영양소/알러젠에 대한 분석을 실시한 결과 실질적 동등성을 나타내어 형질전환에 따른 위해성의 증감은 없는 것으로 나타났다.
11. 환경스트레스 내성 형질전환 감자의 위해성평가
환경스트레스 내성 NDPK2 형질전환 감자의 위해성 여부를 알아보기 위하여 아미노산 서열상동성 분석, 물리화학적 안정성 시험, 알레르기동물모델시험 및 환자혈청 IgE binding assay 등을 실시한 결과 알레르기유발성이 없는 것으로 나타났으며, 유전자 산물의 단회 경구 및 정맥내 투여, 유전독성 시험 및 형질전환 작물의 반복경구투여 독성 및 최기형성 시험 등의 독성에 대한 평가를 실시한 결과 독성을 나타내지 않았으며 실질적 동등성에 대하여 영양성분 분석 및 항영양소/독소/알러젠에 대한 평가를 실시한 결과 실질적인 동등성을 나타내어 형질전환에 따른 위해성의 증감은 없는 것으로 나타났다.

Abstract ▼

1. Analysis of anti-nutrients, toxin and allergen
Analysis method development for anti-nutrients, toxin and allergenic protein of rice and potato.
2. Mass production/ sample offer of insert-gene products
Proteins of insert-genes, TPSP and NDPK2, were mass produced and used as a sample fo

1. Analysis of anti-nutrients, toxin and allergen
Analysis method development for anti-nutrients, toxin and allergenic protein of rice and potato.
2. Mass production/ sample offer of insert-gene products
Proteins of insert-genes, TPSP and NDPK2, were mass produced and used as a sample for the human safety assessment.
3. Measurement of expression level for insert-gene product
NDPK2 protein expression level measurement for transgenic potato using antibody.
4. Substantial equivalence of expressed protein
Analysis of substantial equivalence between recombinant NDPK2 protein and NDPK2 protein in expressed potato using western blotting methods.
5. Development of evaluation method on gene transfer in the body
The movement of the insert genes were examined by the in situ hybridization method.
6. Development of animal models for allergenicity test
Necessities on the previously established A/J mouse model were considered and verified its possibilities to use as an allergic animal model.
7. Construction of serum sub-bank
Continuous construction of patient's serum sub-bank and used for evaluation of transgenic crops.
8. Profiling technique
Gene profile analysis of transgenic and non-transgenic crops using profiling technique as gene fishing method.
9. Examination of food safety assessment data and public relations of LMO
Examination of food safety assessment data and public relations of LMO.
10. Evaluation of the health safety on environmental stress tolerant TPSP transgenic rice
Evaluation of the health safety like allergenicity, toxicity and substantial equivalence on environmental stress tolerant TPSP transgenic rice.
11. Evaluation of the health safety on environmental stress tolerant NDPK2 transgenic potato
Evaluation of the health safety like allergenicity, toxicity and substantial equivalence on environmental stress tolerant NDPK2 transgenic potato.

목차 Contents

• 제 1 장 연구개발과제의 개요...28
• 제 1 절 연구개발의 배경 및 필요성...28
• 제 2 절 연구개발 목표 및 내용...30
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황...34
• 제 1 절 유전자변형 식품의 안전성...34
• 제 2 절 유전자변형 식품의 알레르기 유해성 평가...34
• 제 3절 알레르기 유발능력을 예측할 수 있는 동물모델...36
• 제 4 절 알레르기 환자 serum bank 구축...37
• 제 3 장 연구개발 수행내용 및 결과...38
• 제 1 절 LMO와 자연식품 비교(성분분석비교)...38
• 제2절 삽입유전자 산물의 대량생산/시료제공...68
• 제 3 절 LMO의 종류에 따른 인체위해성평가항목 가이드라인 작성...76
• 제 4 절 협동연구체제의 구축...102
• 제 5 절 알러젠 data base 구축...112
• 제 6 절 알레르기 동물모델 개발...116
• 제 7 절 알레르기성 평가법 표준화 (SOP 작성？수정, 시험법 validation)...126
• 제8절 단백질 독소data base 구축...136
• 제 9 절 LMO의 일반독성 및 특수독성 시험기술 개발...137
• 제 10 절 유전자 동태 및 체내이동 평가기술 개발...137
• 제 11 절 복합성 효과분석...138
• 제 13 절 Trehalose 유전자변형벼 인체위해성 평가...183
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...340
• 제 5 장 연구개발 결과의 활용계획...346
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보...347
• 제 7 장 참고문헌...348