초록 ▼

간염 A 바이러스(Hepatitis A virus; HAV)와 로타바이러스(human rotavirus; HRV)는 전 세계적으로 급성 바이러스성 감염증을 유발하는 분변-경구로 전달되는 대표적인 병원체이다. 주요 감염 경로는 바이러스에 감염된 사람과의 접촉, 오염된 식품과 물 등으로, 본 연구는 물(식품용수)에서의 간염 A 바이러스와 로타바이러스를 검출하기 위한 농축방법 등을 비교 평가한 후 검출할 수 있는 최적의 시험법을 확립하는 것이다.
1-MDS 필터와 NanoCeram 필터에 분당 7(±1)L의 유량으로 500 L의 물

간염 A 바이러스(Hepatitis A virus; HAV)와 로타바이러스(human rotavirus; HRV)는 전 세계적으로 급성 바이러스성 감염증을 유발하는 분변-경구로 전달되는 대표적인 병원체이다. 주요 감염 경로는 바이러스에 감염된 사람과의 접촉, 오염된 식품과 물 등으로, 본 연구는 물(식품용수)에서의 간염 A 바이러스와 로타바이러스를 검출하기 위한 농축방법 등을 비교 평가한 후 검출할 수 있는 최적의 시험법을 확립하는 것이다.
1-MDS 필터와 NanoCeram 필터에 분당 7(±1)L의 유량으로 500 L의 물을 통과 시키면서, 간염 A 바이러스와 로타바이러스를 spiking한 후 필터로부터 흡착된 바이러스를 회수하고 농축하였다. 또한 필터에 흡착된 바이러스는 3가지 형태의 농축법(①1M HCl 농축(25 mL)), ②1M HCl 산 반응 침전 후 PEG 농축(최종 1 mL과 5 mL) ③1M HCl 산 반응 침전 후 Ultracentrifuge 농축(최종 1 mL과 5 mL))을 이용한 농축방법으로 검출효율성을 비교 검토하였다. 각 각의 농축액은 QIAamp Viral RNA mini Kit를 이용해 바이러스의 핵산을 추출하였으며 추출된 RNA는 10배씩 연속 희석하여 conventional RT-PCR을 이용해 유전자를 증폭하였다.
간염 A 바이러스의 경우는 Nanoceram필터를 사용해 1M HCl 산 반응 침전 후 PEG( 1mL)로 추가 농축하는 것과 1M HCl 산 반응 침전 후 Ultracentrifuge(1 mL)로 추가 농축하는 것이 동등하게 최대의 검출효율을 보였으며, 로타바이러스는 1-MDS를 사용해 1M HCl 산 반응 침전 후 PEG(1 mL)로 추가 농축하는 것이 가장 효과적인 검출법으로 확인되었다.
본 연구에서 식품용수에서의 간염 A 바이러스와 로타바이러스를 검출하기 위한 각 과정에서의 최적방법을 확립하였으며, 이 시험법들은 바이러스에 오염된 물로부터 간염 A 바이러스와 로타바이러스를 검출하기 위한 시험법으로 유용하게 사용될 것이다.

Abstract ▼

Hepatitis A virus (HAV) and human rotavirus (HRV) are the most common cause of acute viral infectious disease worldwide, and they are transmitted by the fecal-oral route. Contact with an infected person and ingestion of contaminated food or water are major routes of infection.
The objective of th

Hepatitis A virus (HAV) and human rotavirus (HRV) are the most common cause of acute viral infectious disease worldwide, and they are transmitted by the fecal-oral route. Contact with an infected person and ingestion of contaminated food or water are major routes of infection.
The objective of the this study was to evaluate the methods for concentration of HAV and HRV in water used food production.
Zeta Plus Virosorb 1-MDS and NanoCeram electropositive cartridge filters were used in this study. The diluted solutions of both viruses were then spiked through either 1MDS or NanoCeram cartridge filters at an average flow late of 7 (±1) liters per minute. After filtration, viruses retained by the filter were eluted and concentrated. We also compared the efficiency of concentration type in different conditions such as 1M HCl precipitation, PEG concentration after 1M HCl precipitation, and ultracentrifugation after 1M HCl precipitation. The RNA extraction used in this study was QIAamp Viral RNA mini Kit. Serial 10-fold dilution of extraction RNA were used for amplication via conventional RT-PCR.
For HAV, PEG concentration after 1M HCl precipitation and ultracentrifugation showed the highest detection efficiency than only 1M HCl precipitation. For HRV, PEG concentration after 1M HCl precipitation showed the highest detection efficiency.
In conclusion, we optimized detection procedure by evaluating each step and this developed methods will be useful tool for detection of HAV and HRV from contaminated waters.

목차 Contents

• 최종보고서 ... 1
• 표지 ... 2
• 요약문 ... 4
• Summary ... 5
• 목 차 ... 6
• Ⅰ. 연구개발과제 연구결과 ... 7
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 7
• 제 1절. 간염 A 바이러스(Hepatitis A Virus, 이하 HAV) 개요 ... 7
• 제 2절. 사람 로타바이러스(Human Rota Virus, 이하 HRV) 개요 ... 10
• 제 3절. 연구개발과제의 목표 ... 12
• 제 4절. 연구개발과제의 필요성 ... 12
• 제2장 연구개발과제의 국내?외 연구개발 현황 ... 14
• 제 1절. 국내 연구개발 현황 ... 14
• 제 2절. 국외 연구개발 현황 ... 14
• 제 3절. 연구결과 ... 27
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 16
• 제 1절. 연구수행 내용 ... 16
• 제 2절. 연구방법 ... 16
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 36
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 38
• 제 1절. 연구개발과제의 목표달성도 ... 38
• 제 2절. 연구개발과제의 관련분야 기여도 ... 38
• 제6장 연구개발과제 연구개발 결과 활용계획 ... 39
• 제1절 활용성과 ... 39
• 제2절 활용계획 ... 39
• 제7장 참고문헌 ... 42
• 제8장 첨부서류 ... 44