보고서 정보
주관연구기관 |
(주)바이오톡스텍 |
연구책임자 |
박철범
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보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
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발행년월 | 2005-11 |
과제시작연도 |
2005 |
주관부처 |
식품의약품안전청 |
사업 관리 기관 |
식품의약품안전청 Korea Food & Drug Administration |
등록번호 |
TRKO201000016090 |
과제고유번호 |
1470001583 |
사업명 |
식품의약품안전성관리 |
DB 구축일자 |
2013-04-18
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키워드 |
적하수오.반복독성.유전독성.Polygoni multiflori Radix.repeated dose toxicity.genotoxicity.
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초록
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[1] 90일 경구 반복독성시험 적하수오에 대한 독성을 평가하고자, F344 rat를 사용하여 적하수오를 암·수 각각 0, 313, 625, 1250, 2500, 5000 mg/kg의 농도로 90일간 강제 경구 투여하였다. 90일 반복투여 독성시험의 투여용량 설정은 14일 반복투여 독성시험 결과에 따라 설정하였다. 14일 반복투여 용량결정시험을 실시한 결과, 수컷 5000 mg/kg 투여군에서 체중증가억제 경향이 관찰되었으나 암·수 시험물질투여군에서 적하수오에 의한 변화는 관찰되지 않았다. 따라서, 90일 반복투여 독성시험의 고용량
[1] 90일 경구 반복독성시험 적하수오에 대한 독성을 평가하고자, F344 rat를 사용하여 적하수오를 암·수 각각 0, 313, 625, 1250, 2500, 5000 mg/kg의 농도로 90일간 강제 경구 투여하였다. 90일 반복투여 독성시험의 투여용량 설정은 14일 반복투여 독성시험 결과에 따라 설정하였다. 14일 반복투여 용량결정시험을 실시한 결과, 수컷 5000 mg/kg 투여군에서 체중증가억제 경향이 관찰되었으나 암·수 시험물질투여군에서 적하수오에 의한 변화는 관찰되지 않았다. 따라서, 90일 반복투여 독성시험의 고용량은 5000 mg/kg으로, 공비 0.5를 적용하여 313, 625, 1250, 2500 mg/kg의 용량을 설정하였다. 90일 반복투여 독성시험의 투여기간동안 일반증상, 체중, 사료섭취량, 뇨검사, 혈액학적 및 혈액 생화학적 검사를 수행하였다. 생식독성 검사로서 부검시 정자형태검사와 관찰기간동안 질세포 검사를 수행하였다. 부검시 체내외 장기 조직에 대하여 육안적 관찰 및 장기무게를 측정하였고, 주요장기에 대해 조직병리학적 검사를 수행하였다. 관찰기간동안 적하수오에 의한 사망례는 관찰되지 않았다. 암·수 1250, 2500 및 5000mg/kg 투여군에서 투여 후 연변, 점액변 또는 설사가 용량의존적으로 관찰되었다. 수컷의 경우 5000 mg/kg 투여군에서 체중증가 억제 및 사료섭취량의 감소가 관찰되었다. 뇨검사 결과, 수컷 1250, 2500 및 5000 mg/kg 투여군에서 뇨량의 감소가 관찰되었고, sodium 항목은 수컷 모든 시험물질투여군에서, 암컷은 5000 mg/kg 투여군에서 증가가 관찰되었다. 수컷 1250, 2500 및 5000 mg/kg 투여군 및 암컷 2500 및 5000 mg/kg 투여군에서 pH의 감소, 비중, protein, glucose, ketone체, billirubin 및 erythrocyte의 증가가 관찰되었다. 혈액학적 검사 결과, 암·수 5000 mg/kg 투여군에서 적혈구수, 혈색소량 및 헤마토크리트치가 유의성 있게 감소하였다. 혈액생화학적 검사에서, 암컷 시험물질투여군에서 sodium이 용량의존적으로 유의성 있게 감소하였다. 수컷의 부고환 미부내 정자의 검사, 암컷 성주기의 주기성, 장기중량, 부검 및 조직병리학적 검사 결과, 시험물질에 의한 변화는 관찰되지 않았다. 따라서, 적하수오의 랫드를 이용한 13주 경구투여 독성시험을 실시한 결과, 무독성량(NOAEL)은 암·수 313 mg/kg 이하로 사료된다. [2] 유전독성시험 1) 세균을 이용한 복귀돌연변이 시험 적하수오추출물의 변이원성에 대해서, 살모넬라균 (TA98, TA100, TA1535, TA1537주) 및 대장균 (WP2uvrA(pKM101)균주)을 이용하여 변이원성시험 (비대사활성화 및 대사활성화인 경우)을 실시하였다. 본시험의 용량을 설정하기위해서 312.5, 625, 1,250, 2,500 및 5,000 μg/plate의 용량으로 용량설정시험을 실시한 결과, 대사활성화계의 적용유무에 관계없이 모든 용량에서 각 시험균주에 대해 생육저해가 인정되지 않았다. 본시험에서는 용량설정시험에서의 최고용량인 5,000 μg/plate를 최고용량으로 설정하고, 이하 공비 2로 최고용량을 포함한 5용량으로 시험을 수행하였다. 모든 시험물질용량군에서는 대사활성화계의 적용유무에 관계없이, 적하수오추출물에 의한 콜로니수는 용량의존적으로 증가되지 않았으며 음성대조군과 비교하여 2배 이상의 증가도 인정되지않았다. 또한, 대사활성화계의 적용유무에 관계없이 모든 시험균주에서 생육저해는 인정되지 않았으며, 시험물질에 의한 침전물도 관찰되지 않았다. 이상의 결과로부터, 해당 시험조건 하에서 적하수오추출물의 복귀돌연변이 유발성은 음성으로 판정되었다. 2) Chinese Hamster Lung (CHL)배양세포를 이용한 염색체이상시험 CHL(Chinese Hamster Lung) 배양세포를 이용하여 단시간처리법의 비대사활성화 및 대사활성화인 경우, 연속처리법의 24시간배양으로 시험물질 적하수오추출물의 염색체이상의 유발성을 검토하였다. 최고농도를 설정하기 위하여 세포증식억제시험을 실시한 결과, 대사활성화 적용유무에 관계없이 세포독성이 나타나지 않았기 때문에 1,250, 2,500, 5,000 μg/mL의 3단계 시험물질농도군과 음성대조군, 양성대조군(MMC : 0.05 μg/mL, B[a]P : 20 μg/mL)으로 시험을 실시하였다. 모든 시험물질농도군에서 구조이상을 가진 세포의 출현빈도와 숫적이상을 가진 세포의 출현빈도는 대사활성화계 적용여부에 관계없이 음성대조군에 비해 증가되지 않았다. 이상의 결과로부터, 본시험 조건하에서 적하수오추출물은 염색체이상을 유발하지 않는 물질로 판단된다. 3) 마우스를 이용한 소핵시험 적하수오추출물의 마우스 골수세포에 대한 소핵유발성 유무를 평가하여 유전독성 유무를 검토하였다. 적하수오추출물 1,250, 2,500, 5,000 mg/kg의 용량과, 음성대조군 및 양성대조군인 Mitomycin C 2 mg/kg 투여군을 설정한 후, 음성대조군과 시험물질투여군은 경구투여하고, 양성대조군은 복강투여하여 최종 투여 후 24시간 후에 대퇴골로부터 골수세포를 채취, 도말하여 소핵유발빈도를 검경하였다. 시험결과, 모든 시험물질투여군은 소핵유발 빈도에 있어서 음성대조군과 비교시 유의성 있는 차이는 보이지 않았다. 세포독성의 지표인 PCE/(PCE+NCE)의 비율은 모든 시험물질 투여군에서 음성대조군과 비교시 시험물질에 의한 유의성이 관찰되지 않았다. 이상의 결과로 본 시험 조건하에서 시험물질인 적하수오추출물은 마우스 골수세포의 소핵형성에 영향을 주지 않는 것으로 판단된다.
Abstract
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[1] 90 days repeated dose toxicity study of Polygoni multiflori Radix in Rats In this GLP study, 6 main study groups of 10 F344 rats/sex were given 0, 313, 625, 1250, 2500 and 5000 mg/kg Polygoni multiflori Radix, for 90 days. To select the dose of 90-day repeated dose toxicity study, 14-day repeate
[1] 90 days repeated dose toxicity study of Polygoni multiflori Radix in Rats In this GLP study, 6 main study groups of 10 F344 rats/sex were given 0, 313, 625, 1250, 2500 and 5000 mg/kg Polygoni multiflori Radix, for 90 days. To select the dose of 90-day repeated dose toxicity study, 14-day repeated dose ranging finding study was conducted. For the 14-day dose range finding study, test item was orally administered to male and female rats at dosage of 0, 313, 625, 1250, 2500 and 5000 mg/kg for 2 weeks. In the result of the study, there was decrease of body weight change in male 5,000 mg/kg treatment group. But there were no treatment-related toxicity of 5,000 mg/kg. Therefore, the high dose of 90-days repeated dose toxicity was established as 5,000 mg/kg and 313, 625, 1250 and 2500mg/kg selected. Standard endpoints in this study included mortality, clinical observations, change of body weights, analysis on food consumption, urinalysis, hematologic examination, serum biochemistry, analysis of organ weights, gross anatomic pathology and histopathology. Sperm morphology and vaginal cytology were conducted. All animals survived to the scheduled termination. In male and female 1250, 2500 and 5000 mg/kg treatment group, salivation, soft stool, mucous stool or diarrhea was observed dose-dependently. There was increase-suppression of body weight and decrease of food consumption in male 5000 mg/kg treatment group. For urinalysis, in male 1250, 2500 and 5000 mg/kg treatment group, there were decrease of the urine volume and increase of sodium. In female the 5000 mg/kg treatment group, sodium was increased. In male 1250, 2500 and 5000 mg/kg treatment group and female 2500 and 5000 mg/kg treatment group, there were decrease of pH and increase of protein, glucose, ketone body, billirubin and erythrocyte in urine. For the hematology, in the male and female 5000 mg/kg treatment group, there were significant decrease of RBC, hemoglobin and hematocrit. For blood chemistry, in female treatment group, sodium was significantly decreased. For the sperm morphology, vaginal cytology, organ weights, gross anatomic pathology and histopathology, there were no test item-related effect. Based on these results, no observed effect level(NOAEL) is considered to be under 313mg/kg in male and female. [2] Genotoxicity study of Polygoni multiflori Radix 1) Bacterial Reverse mutation test This study in terms of the Polygoni multiflori Radix, to determine a mutagenic potential is performed using histidine-requiring bacterial strain, Salmonella typhimurium (TA98, TA100, TA1535, and TA1537 strain) and tryptophan-requiring bacterial strain, Escherichia coli (WP2uvrA pKM101)) with and without S9 metabolic activation system. To determine a dose range in the main test, the dose-finding study was performed with 5 dose levels such as 312.5, 625, 1,250, 2,500 and 5,000 μg/plate regardless of application of S9 metabolic activation system. Accordingly, there was no cytotoxicity for every tester strain. The highest dose, 5,000 μg/plate, in the preliminary test was decided as the highest dose in the main test; and it was divided by the common ratio, 2, to make 5 dose groups including the highest dose. The number of revertant colony in terms of test item was not increased dose-dependently regardless of application of S9 metabolic activation system in the treatment groups; and was not increased more than 2 fold as compared with that of the negative control group. In addition, a cytotoxicity and precipitation in relation to the test substance were not observed regardless of application of S9 metabolic activation system. As a result, the test substance, did not show the genotoxic potential under the condition of this study. 2) Chromosome Aberration Test using Mammalian cultured cells The chromosome aberration test was performed under the condition as follows short time treatment without S9 and continuous treatment with S9 to examine a mutagenic potential of the test substance using Chinese hamster lung (CHL) cell. According to the MTT assay to determine the highest dose, there was no cytotoxicity regardless of application of S9 metabolic activation system. Therefore, the main test was performed with 3 dose levels of treatment groups such as 1250, 2500 and 5000 μg/mL including negative and positive control (MMC : 0.05 μg/mL, B[a]P : 20 μg/mL) groups. The test substance did not induce the numerical and structural chromosome aberrations regardless of application of S9 metabolic activation system as compared with that of the negative control group. In conclusion, the test substance did not induce the chromosomal aberration under the condition of this study. ) In vivo Micronucleus test in mice This study was designed to determine the mutagenic potential of the test substance in the micronucleus test using bone marrow cells in mice. The Polygoni multiflori Radix (1250, 2500 and 5000 mg/kg) and vehicle for the treatment and negative control group, respectively, were administered by gavage. The positive control (MMC: 2 mg/kg) is administered intraperitoneally. In 24 hours, the bone marrow cells were collected at the femur and made a samples to observe the appearance of induction of micro nucleus. There were no significant difference in appearance rate of micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPCEs) in polychromatic erythrocytes (PCEs) between treatment and control groups. In addition, PCE/(PCE+NCE) ratio did not show sign of cytotoxicity. In conclusion, the test substance did not induce micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPCEs) in the bone marrow cells in mice.
목차 Contents
- 용역연구사업 연구결과보고서 ...1
- 제출문 ...2
- 연구사업 최종보고서 요약문 ...3
- Project Summary ...6
- 목차 ...9
- 제1장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ...10
- 1.1 총괄연구개발과제의 목표...10
- 1.2 총괄연구개발과제의 목표달성도...12
- 1.3 국내?외 기술개발 현황...13
- 제2장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법 ...14
- 1절 연구내용...14
- 제3장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ...38
- 제4장 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ...253
- 제5장 총괄연구개발결과의 연구성과 ...258
- 5.1 활용성과...258
- 5.2 활용계획...259
- 제6장 기타중요변경사항 ...259
- 제7장 참고문헌 ...259
- 총괄 연구과제 요약...261
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