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미생물농약균주 Bacillus thuringiensis와 식중독균 Bacillus cereus의 신속검출 및 구분을 위한 유전자분석 kit 개발

보고서 정보
주관연구기관 동국대학교 산학협력단
연구책임자 홍광원
보고서유형최종보고서
발행국가대한민국
언어 한국어
발행년월2011-05
과제시작연도 2010
주관부처 중소기업청
사업 관리 기관 한국산업기술평가관리원 (중기청)
등록번호 TRKO201100014921
과제고유번호 1425065863
사업명 산학연공동기술개발
DB 구축일자 2013-04-18

초록

1. 최종목표
? Bacillus thuringiensis와 Bacillus cereus를 유전적으로 검출하고 구분할 수 있는일반 다중 중합효소연쇄반응 (multiplex PCR)과 실시간 다중 중합효소연쇄반응 (multiplex real-time PCR) 방법의 고안 및 유전자검사 kit의 개발
? 미생물농약균주 Bacillus thuringiensis와 식중독균 Bacillus cereus를 동시에 구분하는 PCR 분석법 (singleplex PCR, multiplex PCR, singleplex real-time P

목차 Contents

  • 사업비사용실적보고서...1
  • I. 총괄현황...1
  • II. 과제개발비 세부집행내역...1
  • 개발결과의견서...5
  • 최종보고요약서(초록)...6
  • 목차...8
  • 제 1 장 연구개발과제의 개요...11
  • 제 1 절 연구개발과제의 필요성 및 중요성...11
  • 1. 연구개발의 필요성...11
  • 2. 기술적 측면의 중요성...13
  • 3. 경제적 측면의 중요성...14
  • 4. 산업적 측면의 중요성...15
  • 제 2 절 연구개발과제의 범위...16
  • 1. Multiplex PCR방법 확립 및 kit 개발...16
  • 2. Multiplex real-time PCR방법 확립 및 kit 개발...16
  • 제 3 절 국내외 기술개발 현황...17
  • 제 2 장 과제개발 내용 및 방법...21
  • 제 1 절 DNA 추출...21
  • 1. Power PrepTM DNA extraction kit 사용...21
  • 2. Boiling 방법 사용...21
  • 3. 최적의 DNA 추출법 선정...22
  • 제 2 절 Target유전자 선택 및 Primer 제작...22
  • 제 3 절 미생물농약검출 Multiplex PCR 방법 개발 및 최적화...28
  • 1. Multiplex PCR 조건...28
  • 2. 수행결과...29
  • 2-1. Multiplex PCR을 통한 reference 균주확인...29
  • 2-2. Non-target 균주를 통한 Primer set 특이성 확인...29
  • 2-3. Multiplex PCR을 통한 미생물농약균주 확인...31
  • 2-4. Multiplex PCR을 통한 실제 식품 Test...32
  • 2-5. 구토형 식중독균 구분검출을 위한 Target Primer 추가 실험...34
  • 제 4 절 미생물농약검출 Multiplex real-time PCR 방법 개발 및 최적화...38
  • 1. Multiplex real-time PCR 조건...38
  • 2. 수행결과...38
  • 2-1. Multiplex real-time PCR 조건확립...38
  • 2-2. Multiplex real-time PCR을 통한 reference 균주확인...40
  • 2-3. Non-target 균주를 통한 Primer set와 probe의 특이성 확인...41
  • 2-4. Multiplex real-time PCR을 통한 미생물농약균주의 확인...42
  • 2-5. Multiplex real-time PCR을 통한 실제 식품 Test...43
  • 2-6. 검출한계...44
  • 제 5 절 Multiplex PCR 및 Multiplex real-time PCR의 Shelf life Test...45
  • 1. Multiplex PCR의 Shelf life Test...45
  • 2. Multiplex real-time PCR의 Shelf life Test...46
  • 제 3 장 관련 분야에의 기여도...48
  • 제 1 절 연구개발 목표의 달성도...48
  • 1. 특이적 프라이머, 프로브 세트의 개발...48
  • 2. 미생물농약 검출용 신속 유전자 분석기술 개발 및 실용화...48
  • 3. 미생물농약 검출용 신기술의 유용성 검증 및 기술보급...48
  • 제 2 절 관련 분야에의 기여도...49
  • 1. 기술적 기여도...49
  • 2. 경제.사회적 기여도...49
  • 제 4 장 연구개발 성과 및 성과활용 계획...50
  • 1. 개발기술의 상용화...50
  • 2. 개발기술의 보급계획...50
  • 3. 추가연구 및 타 연구에 활용 계획...50
  • 4. 특허...50
  • 제 5 장 참고문헌...51
  • 제 6 장 부록...54

표/그림 (12)

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참고문헌 (25)

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