초록 ▼

1. 연구개발의 목표
본 과제의 최종목표는 "애엽성분유래 염증성장질환치료제 개발" 과제를 차질없이 추진, 향후 4년 내에 국외 라이센싱을 실현하고 동시에 국내 임상개발 제품화를 달성에 있다.

2. 연구개발의 진행
(1) 연구 기간 : 2001년 6월 ~ 2005년 4월 (총 4년)
(2) 연구비 : 총 14억 3,600만원 (정부출연금: 6억 3,600 만원)
(3) 참여연구원 : 총 104명 (4년간)
(4) 연구기관
- 주관연구기관 : 동아제약(주) 연구소 (김순회 연구위원)
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1. 연구개발의 목표
본 과제의 최종목표는 "애엽성분유래 염증성장질환치료제 개발" 과제를 차질없이 추진, 향후 4년 내에 국외 라이센싱을 실현하고 동시에 국내 임상개발 제품화를 달성에 있다.

2. 연구개발의 진행
(1) 연구 기간 : 2001년 6월 ~ 2005년 4월 (총 4년)
(2) 연구비 : 총 14억 3,600만원 (정부출연금: 6억 3,600 만원)
(3) 참여연구원 : 총 104명 (4년간)
(4) 연구기관
- 주관연구기관 : 동아제약(주) 연구소 (김순회 연구위원)
- 세부과제 및 위탁과제 : 서울대학교 의과대학 (송인성 교수), 고려대학교 생명공학원 (김재홍 교수), 서울대학교 임상의학센터 (장인진 교수), 서울대학교 약학대학 (이명걸 교수, 서영준 교수), 덕성여자대학교 약학대학 (손영택 교수), 한국화학연구원, Cereb (프랑스)

3. 연구개발 내용 및 결과
(1) 제제화 및 안정성 연구
- 원료 합성 : 전임상 및 임상연구에 필요한 DA-6034 원료합성 (5.3 Kg)
- 원료 규격 설정 : 형광분석법을 통한 HPLC 분석법을 확립하여 원료의 규격을 설정
- 제제화 연구 : 정제의 formulation을 결정하여, 10, 20, 50, 100 mg 정을 타정
- 원료 및 제제의 규격에 대한 기준 및 시험법을 확립 : 6개월 가속시험 및 2주 가혹시험을 실시하였고, 24개월 이상의 유효기간 안정성을 확보
- 장기 보존연구 : 3년 예정으로 진행 중이며, (24개월) 및 제제 (12개월) 모두 안정함을 확인
- 공정개선연구 : 원료단가의 절감과 공정을 단순화시켰으며, scale-up 연구 진행 중
- 원료 polymorphism 연구 : 11개의 polymorpherm를 밝혔으며, 이 중 3개 polymorphor는 약간의 용해도의 개선을 나타냄.
(2) 약효 약리 연구
- 일반약리 시험 : DA-6034가 부작용이 없음을 확인
- 작용기전 연구 :
a. Cereb, DA-6034 1 ug/ml에서 측정항목에 유의적인 영향이 없었음
b. DA-6034의 염증성대장염 (IBD)에 대한 기전연구 : 염증과 신호전달에 관여하는 단백질 발현 측정 중
c. 지질과산화에 미치는 영향 : 용량의존적으로 지질과산화물 생성을 억제 (IC50=:32.4 ug/ml)
d. adhesion molecules에 의한 세포l 내 영향, 성장인자에 미치는 영향, 활성산소 생성에 대한 영향 : 영향 없음
e. cPLA2 assay : cPLA2의 역가증가에 대한 영향 없음
f. chemoattractants에 대한 저해효과 (DA-6034, 1ug/ml) : 영향 없음
- HT-29 세포주 실험 : MPO, PGE2, IL-1β는 유의한 차이 없음. LTB4, TNF-α는 유의적으로 감소 (p<0.05). LPS와 TNF-a 자극 시 ERK, JNK 및 p38의 활성화에 영향을 주지 않았으나 NF-kB를 감소시켰으며, IkBa 분해에 영향을 주지 않음. TNF-a와 IL-8 mRNA 발현을 농도 의존적으로 감소시킴.
- AGS 및 MCF10A-ras 세포주 실험 : COX-2 발현 억제함. 이는 ERK 활성화 및 transcription factor (NF-kB, AP-1)의 DNA binding 억제, p65의 핵내로의 translocation 억제, ikB의 degradation 억제에 기인됨을 확인함.
- DSS 유발성 장염모델 : mortality 및 설사율을 감소시켰으며, 이러한 치료효과는 HSP70의 감소에 의한 것으로 추정됨.
- TNBS 유발성 소장염 : 육안병변은 유의한 호전을 보임 (p<0.05).
- 천식 동물모델에서의 eosinophils/macrophages의 침윤 분석 : eosinophil 침윤억제효과 관찰
(3) 약동력학 연구
- DSS 유발 염중성 대장염 모델 :조직 손상부위에서 F값이 증가하였고, 소장에 머무는 시간이 약 16시간 증가함을 확인함.
- TNBS 유발 염증성 대장염 모델 : 조직 손상부위에서 F값이 증가하였고, 콜라를 투여하여 위장내 pH를 산성으로 만든 경우나 cimetidine 또는 omeprazole을 투여하여 염기성으로 만든 경우에 약물 흡수에는 별 영향이 없었음.
(4) 독성 연구
- 개에서 4주반복투여 독성시험 : 안전한 것으로 판단되며 현재 조직검사 중임.
- 설치류 및 비설치류에 대한 13주 반복투여 독성시험 : 6월말경 최종보고서 완료 예정임.
(5) 임상 연구
- 염증성 장질환에 대한 1상 임상 연구 : 단회 및 반복투여 결과, 경구 투여 시 거의 흡수되지않는 약동학적 특성을 나타내었고, 안전성 및 내약성이 우수한 것으로 보고됨.
- 경증 또는 중등도 활동성 궤양성 대장염 (UC)에 대한 전기 2상 임상시험 : 3개 기관 (서울대병원, 연세대 병원, 서울아산병원)에서 DA-6034 50, 100mg, 200mg 으로 실시 중임. 6월말 경에 전기 2상 임상연구를 완료할 예정임.
(6) 기타
- 라이센싱을 위한 연구결과 및 자료를 작성 중

대부분의 염증성장질환 치료제들의 문제점은 심각한 부작용임. 우리 DA-6034는 천연물의 유효성분 유도체로 안전하며, 전신 흡수율이 0.1% 미만이고, 주로 위장관점막에 집중적으로 분포하는 특성을 가지고 있음. 이러한 기존의 약제와 차별화된 특성을 바탕으로 Dr. Falk, Menarni, Beohringer Ingelheim등과 라이센싱 협의 중에 있으며, 전기2상의 임상시험이 끝나는 시점에 구체적인 결과가 있을 것으로 예상됨. 이와 같이 제품화시 시판중인 약물의 대체효과가 클 것으로 예상되며, 국제경쟁력이 매우 높은 약물로서 판단됨.

Abstract ▼

1. Aim of the project
The final aim of the this project is to develop, license DA-6034 as a new therapeutic agent of inflammatory bowel disease from Artemisiae Herba in the market within 4 years

2. Progress of study
(1) Project period : 2001. 6. ~ 2005. 4. (total 4 years)
(2) Projec

1. Aim of the project
The final aim of the this project is to develop, license DA-6034 as a new therapeutic agent of inflammatory bowel disease from Artemisiae Herba in the market within 4 years

2. Progress of study
(1) Project period : 2001. 6. ~ 2005. 4. (total 4 years)
(2) Project expenses : total ₩1,436,000,000 (Government supports : ₩ 636,000,000)
(3) Participated researchers : total 104 persons (for 4 years)
(4) Participated organ
- Major progect : Research Laboratories, Dong-A Pharm. Co., Ltd. (Soon Hae Kim)
- Sub project and consignment project : College of medicine, Seoul national university (In Sung Song); Department of biotechnology, Korea university (Jae Hong Kim); Clinical medicine research laboratory, Seoul national university (In Jin Jang); College of pharmacy, Seoul national university (Myung Gul Lee, Young Joon Surh); College of pharmacy, Duksung Women's university (Young Taek Son); Korea research institue of chemical technology, Cereb (France)

3. The contents and results of study
(1) Formulation & Stability
- Synthesis of DA-6034 : Syntheses of DA-6034 for preclinical and clinical study was performed (5.3 Kg).
- Standardization of DA-6034 : The standardization of DA-6034 was established by HPLC analysis methods.
- Study of formulation : The formulation of DA-6034 tablet was established and 10, 20, 50 and 100 mg tablets were produced.
- Establishment of standard and test methods of substance and tablets : 6-month accelerated test and 2-weeks severe test were performed and 24-month stability was confirmed.
- long-term stability test : 3-year long-term stability test is now being conducted and 24-month stability of DA-6034 substance and 12-month stability of DA-6034 tablet were confirmed
- Study of process improvement : the study for cost reduction and simple process was perfected and study of scale-up is now being conducted
- Study of polymorphism : 11 polymorphor were discovered and 3 polymorphor showed improvement of solubility among these polymorphor.
(2) Efficacy and pharmacology study
- general pharmacology test : DA-6034 did not exert any of serious pharmacological effects.
- Mechanism study :
a. Cereb, DA-6034 (1 ug/ml) did not exert any of effects in various measurement factors.
b. Mechanism study in IBD : The expression of proteins involvmented in the inflammation and signaling pathway is noe being conducted.
c. Effects of DA-6034 in lipid peroxidation : DA-6034 inhibited lipid peroxidation in the dose-dependent method (IC50=:32.4 ug/ml).
d. Effects of DA-6034 being dependent on adhesion molecules in the cell and effects of DA-6034 in growth factor and reactive oxygen species : DA-6034 did not effect.
e. cPLA2 assay : DA-6034 did not effect in the threshold value of cPLA2.
f. Effects of DA-6034 in chemoattractants : DA-6034 (1ug/ml) did not effect.
- Study of DA-6034 in the HT-29 cell line : DA-6034 did not effect in MPO, PGE2 and IL-1β and significantly decreased LTB4 and TNF-α (p<0.05). DA-6034 did not effect on activation of ERK, JNK and p38 by LPS and TNF-a stimulation. But DA-6034 decreased NF-kB levels and did not effect on the IkBa degradation. DA-6034 decreased mRNA expression of TNF-a and IL-8 in the dose-dependent method.
- Study of DA-6034 in AGS and MCF10A-ras cell line : DA-6034 inhibited COX-2 expression by ERK activation, inhibition of DNA binding of transcription factor (NF-kB, AP-1), translocation of p65 and degradation of ikB.
- Effects of DA-6034 in DSS induced IBD model : DA-6034 decreased mortality and diarrhea incidence and these efficacy was expected that DA-6034 decreased HSP70.
- Effects of DA-6034 in TNBS induced small intestine inflammation : DA-6034 significantly decreased lesion score (p<0.05).
- Effects of DA-6034 in asthma animal model : DA-6034 inhibited eosinophilia
(3) Pharmacokinetic study
- Effects of DA-6034 in DSS induced IBD model : DA-6034 increased F values in the damaged tissue site and stay in small intestine for the longer time.
- Effects of DA-6034 in TNBS induced IBD model : DA-6034 increased F values in the damaged tissue site. DA-6034 did not effect on the decrease of pH by cola and increase of pH by cimetidine or omeprazole in the gastrointestine
(4) Toxicity study
- 4 week repeated toxicity study in dogs : No abnormal observations were noted. Tissue macroscopic observation is now being conducted
- 13 week repeated toxicity study in rodents and other laboratory animals : final report will be perfected in the end of June.
(5) Clinical study
- Phase 1 clinical study for IBD : DA-6034 was almost never absorbed by single and repeat oral administration and showed high safty.
- Phase 2a clinical study for mile or moderate active UC : Phase 2a clinical study is now being conducted in DA-6034 50, 100 and 200 mg dosage in 3 medical centers (Seoul national medical center, Yonsei medical center, Asan hospital),으로 실시 중임. Final report will be perfected in the end of June.
(6) other study
- Data preparation for licensing

DA-6034, effective derivative origined from herbal medicine, is safe, shows the whole body absorption of <0.1% and is mainly distributed in gastrointestinal mucosa. Dong-A has been under contested licensing with Dr. Falk, Menarni, Beohringer Ingelheim Kyorin and Pfizer. It is expected that DA-6034 will show alternate ability against existing drugs and excellent international competitiveness.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 3
• 목차 ... 4
• 요약문 ... 5
• SUMMARY ... 7
• 총괄연구개발과제 연구결과 ... 9
• 1. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 9
• 2. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 결과 ... 14
• 3. 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 55
• 4. 사업화 목표 달성도 및 계획(개발과제만 해당함) ... 57
• 5. 총괄연구개발과제의 연구성과 ... 61
• 6. 연구개발결과의 파급효과 ... 80
• 7. 첨부서류 ... 81
• 제1세부연구개발과제 연구결과 ... 82
• 1. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 83
• 2. 제1세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ... 87
• 3. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발결과 ... 108
• 4. 제1세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 153
• 5. 제1세부연구개발과제의 연구성과 ... 155
• 최종보고서 비공개 승인요청서 ... 156