초록 ▼

I. 연구개발의 목적 및 필요성
골다공증을 포함한 갱년기 증상은 폐경 후 여성의 건강한 삶에 가장 보편적 장애가 되고 있다.
골다공증 예방 및 치료를 위해 호르몬대체 치료가 빌리 행하여지고 있지만 많은 부작용이 보고되고 있으며 식물에서 유래하는 phytoestrogen, 특히 isoflavonoid는 estrogen과 유사한 활성을 가지고 있어 그 기능에 대한 연구가 진행되고 있다. 이에 회화나무 열매의 isoflavonoid 화합물을 이용하여 유효성분의 규명，효능의 검증 및 대량생산법 확립을 통한 산업화로 골다공증을 비

I. 연구개발의 목적 및 필요성
골다공증을 포함한 갱년기 증상은 폐경 후 여성의 건강한 삶에 가장 보편적 장애가 되고 있다.
골다공증 예방 및 치료를 위해 호르몬대체 치료가 빌리 행하여지고 있지만 많은 부작용이 보고되고 있으며 식물에서 유래하는 phytoestrogen, 특히 isoflavonoid는 estrogen과 유사한 활성을 가지고 있어 그 기능에 대한 연구가 진행되고 있다. 이에 회화나무 열매의 isoflavonoid 화합물을 이용하여 유효성분의 규명，효능의 검증 및 대량생산법 확립을 통한 산업화로 골다공증을 비롯한 갱년기 중상 예방 및 치료에 이용될 수 있는 신기능 천연소재를 개발하고자하였다.

II. 연구개발의 내용 및 범위
회화나무열매추출물의 제조 및 그 효소분해물의 제조，공정개선，조골세포증식효과，골다공증 동물모델을 통한 효능검증，시제품생산，genistein 및 genistin 생체이용률 평가. sulfatase의 glucuronidase activity 조사 및 HPLC 분석법 확립. genistein 생체이용률 개선을 위한 SLMs SLNs 최적제형 선정 및 약제학적 특성평가，골다공증 효능 isoflavonoid 의 분리，함량 분석 및 genistein 대량생산법 확립 . β-glucosidase 생성효소 screenmg, 효소활성 조건 검색，aglycone isoflavonoids 전환능력 보유 균주 screening 및 전환 효소 특성 규명，equol 전환 능력 보유 균주 screening 등을 통한 연구를 실시하였다.

III. 연구개발결과
회화나무열매로부터 조골세포에 대한 증식효능，동물모델에 대한 골다공증 개선 및 예방 효능이 있음을 확인하였고，고함량의 isoflavonoids를 갖는 공정 개선을 완료하였다. Genistein 및 genistin 생체이용률 평가 연구에서 SLMs, SLNs 동의 고형지질 미립구 등을 이용한 genistein 최적 제형화 연구에서 sulfatase의 glucuronidase activity 및 HPLC 분석법을 확립하였기에 기존 genistein rat 혈장 분석 조건에 비해 짧은 시간에 분석을 할 수 있다. 또한，회화나무 열매로부터 골다공증 개선 효능 및 isoflavonoid 의 도출과 기타 페놀성화합물의 도출을 목표로 하여 4종 이상의 isoflavonoid 와 4종 이상의 기타 페놀성 화합물 분리 및 구조분석을 하였으며 leading isoflavonoid로써 genistein을 도출하여 genistein 의 대량생산을 목표로 수율 60.3% 순도 99% 이상의 단일물질로 산업화를 위한 대량생산법 및 효율적 공정을 확립하였다. 더 높은 역가를 갖는 골다공증 개선효능을 갖는 isoflavonoid 유도체들의 전환기술을 확보하였다.

IV. 연구개발결과의 활용계획
유효성분 및 골다공증 효능이 입증되었으며，미국 FDA의 안전성시험을 통과하고 식품부원료로 식품의약품안전청에 등재되어 여러 식품에 적용이 가능해짐에 따라 골다공증 및 갱년기 관련 제품 등 건강기능식품 전반에 걸쳐 정제，캅셀，분말，음료 등의 제형으로 제형화가 가능하며，많은 종류의 렉스플라본 함유제품 생산이 가능하다. 현재 진행 중인 임상결과를 토대로 개별인정형 건강기능성식품으로서 개발할 예정이며 또한，본 연구과제의 결과에 대한 논문들은 골다공중 및 갱년기 관련 타 연구에 좋은 기초 자료가 될 것이다.

Abstract ▼

I. Objective and necessity of research
The climacteric symptoms incl uding osteoporosis are becoming the general obstacle in postmenopausal women. But, hormone replacement therapy(HRT) which is widely used for women suffered from a serious osteoporosis, have been reported many side effects.
Ph

I. Objective and necessity of research
The climacteric symptoms incl uding osteoporosis are becoming the general obstacle in postmenopausal women. But, hormone replacement therapy(HRT) which is widely used for women suffered from a serious osteoporosis, have been reported many side effects.
Phytoestrogen that have similar structure of estrogen can blind the estrogen receptor with low toxicity. Therefore we aim to develop a new natural source from Sophorae Fructus for the preventìng and treating climacteric symptoms.

II. Contents of research
To develop functional food for reducing the risk of osteoporosis from the Sophorae Fructus, we extracted and isolated isoflavonoids from fruits of Sophora japonica. Extracts of Sophorae Fructus containing a high contents of isoflavonoids evaluated biological activities a in vitro and in vivo study. Also, we tried the production of active derivative using microorganism, scale up process establishment.

III. Research result
We established producing process of Rexflavone, the extracts of Sophorae Fructus and searching osteoblast proliferation effects and animal test, making test-product. We characterized and compared the plasma pharmacokinetics of genistein and genistin, 7-O-glycoside form of genistein. And to enhance their oral bioabailability of genisetin, solid lipid microspheres(SLMs) and solid lipid nanoparticles(SLNs) were prepared and evaluated in diverse in vitro method. Also, we isolated active isoflavonoids from Sophorae Fructus, scale-up process establishment, screening of β- glucosidase productive microorganism and equol conversative microorganism. Genistein-SLMs might have several advantages such as enhanced gatrointestinal absorption, controlled release property, high loading capacity, and better stability. We isolated four isoflavonoid, three flavonoid and a gallotannin from the fruits of Sophora Japonica. The column chromatography on Rexflavone yielded a high pruity of genistein(60.3% of yield, 99% of purity).

IV. Application plan of result
Rexflavone, extract from the Sophorae Fructus used now as a subfunctional foods. Also, Now we are progressing the clinical study for evaluating efficacy and safety of Rexflavone. Therefore we can develop a nature dietary supplements or medicine for preventing and/or treating for osteoporosis.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 요약문 ... 5
• SUMMARY ... 6
• Contents ... 42
• 목차 ... 43
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 44
• 1. 연구 배경 및 필요성 ... 44
• 2. 연구목적 및 범위 ... 47
• 3. 기능적 추진체계 ... 48
• 4. 연차별 연구개발 추진계획 ... 49
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 50
• 1. 국내ㆍ외 관련분야에 대한 기술개발현황 ... 50
• 2. 연구결과가 국내ㆍ외 기술개발현황에서 차지하는 위치 ... 51
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 52
• 1. 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 결과 ... 52
• 2. 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 67
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 70
• 1. 총괄연구개발과제의 목표달성도 ... 70
• 2. 연구개발결과의 파급효과 ... 70
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 72
• 1. 연구개발결과의 활용계획 및 추가연구의 필요성 ... 72
• 2. 사업화(기업화) 목표 달성도 및 계획(해당과제만 작성함) ... 72
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 74
• 제7장 참고문헌 ... 74
• 제8장 첨부서류 ... 80
• 제1세부연구개발과제 연구결과 ... 114
• 1. 제1세부연구개발과제의 목표 ... 115
• 2. 제1세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ... 116
• 3. 제1세부연구개발과제의 최종 연구개발결과 ... 118
• 4. 제1세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 127
• 5. 제1세부연구개발과제의 목표달성도 ... 127
• 6. 참고문헌 ... 127
• 제1세부연구개발과제(위탁과제)연구결과 ... 130
• 1. 제1세부연구개발과제의 목표 ... 131
• 2. 제1세부연구개발과제(위탁과제)의 연구대상 및 방법 ... 131
• 3. 제1세부연구개발과제(위탁과제)의 최종 연구개발결과 ... 135
• 4. 제1세부연구개발과제(위탁과제)의 연구결과 고찰 및 결론 ... 148
• 5. 제1세부연구개발과제(위탁과제)의 목표달성도 ... 148
• 6. 참고문헌 ... 149
• 제2세부연구개발과제 연구결과 ... 152
• 1. 제2세부연구개발과제의 목표 ... 153
• 2. 제2세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ... 153
• 3. 제2세부연구개발과제의 최종 연구개발결과 ... 154
• 4. 제2세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 159
• 5. 제2세부연구개발과제의 목표달성도 ... 161
• 6. 참고문헌 ... 161
• 제3세부연구개발과제 연구결과 ... 163
• 1. 제3세부연구개발과제의 목표 ... 164
• 2. 제3세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ... 165
• 3. 제3세부연구개발과제의 최종 연구개발결과 ... 170
• 4. 제3세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 177
• 5. 제3세부연구개발과제의 목표달성도 ... 180
• 6. 참고문헌 ... 181
• 자체평가의견서 ... 184