초록 ▼

III. 사업(연구개발)의 내용 및 범위
1. 해양 생물 유래 신규 시알산 전이효소 발굴
○ 신규 ST 유전자 발굴 및 발현 분석
○ ST 효소 분리 정제 및 생화학적 특성 규명
○ 시알산 부가반응을 위한 표면 발현 및 고정화 기술개발
2. 해양유래 유지/다당류 가수분해효소 발굴 및 응용
○ 유지/다당류 가수분해효소 유전자 클로닝, 유전자 서열 비교분석
○ 효소 발현 특성분석
○ 표면발현하여 ‘Application-ready' 상태의 효소 라이브러리 구축
3. 해양 생명체 유래 광학선

III. 사업(연구개발)의 내용 및 범위
1. 해양 생물 유래 신규 시알산 전이효소 발굴
○ 신규 ST 유전자 발굴 및 발현 분석
○ ST 효소 분리 정제 및 생화학적 특성 규명
○ 시알산 부가반응을 위한 표면 발현 및 고정화 기술개발
2. 해양유래 유지/다당류 가수분해효소 발굴 및 응용
○ 유지/다당류 가수분해효소 유전자 클로닝, 유전자 서열 비교분석
○ 효소 발현 특성분석
○ 표면발현하여 ‘Application-ready' 상태의 효소 라이브러리 구축
3. 해양 생명체 유래 광학선택적 epoxide hydrolase 발굴 및 구조분석
○ epoxide hydrolase 유전자 5종 이상 확보 및 단백질대량생산
○ 광학 선택적 epoxide 분해와 관련한 특성분석
○ Homology modeling 에 의한 3차 구조 규명
4. 유용 해양천연물을 이용한 항암활성 선도물질 도출
○ 신규 해양 천연물 시료의 in vitro 항암활성 평가을 통한 신규 유효물질 지속적 도출
○ 항암 선도물질의 pharmacokinetics 평가
○ 신규 유도체 in vivo 항암 활성 평가

Abstract ▼

II. Objectives
Identification, characterization and/or development of the following medically or industrially useful materials and technologies using marine organism-orginated materials;
○ Identification and characterization of novel marine invertebrate-originated sialyltransferase orthologues

II. Objectives
Identification, characterization and/or development of the following medically or industrially useful materials and technologies using marine organism-orginated materials;
○ Identification and characterization of novel marine invertebrate-originated sialyltransferase orthologues and development of technologies for glycan remodeling of pharmaceutical glycoproteins
○ Establishment of a library of novel lipase/esterase genes from marine organisms and development of an application system to use the biocatalytic enzymes
○ Identification and characterization of chiral selective epoxide hydrolases and analysis of the chiral selective mechanisms
○ Identification of extracts of marine organisms having anti-proliferation activity and selection of lead compounds by using efficacy and pharmacokinetics evaluation
III. Results
1. Identification and characterization of novel sialyltransferases originated from marine organisms
○ Identification and expression of novel sialyltransferase orthologues
■ Based on 40 ST candidates identified by bioinformatic search of public sequence databases, 3 cDNA clones of sea urchin (Strongylocentrotus intermedius) ST candidates were obtained in collaboration with KORDI
■ Development of Escherichia coli and Hansenula polymorpha expression system by using a cDNA clone of Strongylocentrotus purpuratus α2,6-sialyltransferase candidate
○ Purification and biochemical characterization of recombinant STs
■ Expression and purification of the S. intermedius α2,6 ST as a soluble protein in E. coli and examination of the sialyltransferase activity
■ Development of sea squirt (Halocynthia roretzi) α2,6 ST expression systems in E. coli and on the surface of Saccharomyces cerevisiae
○ Development of yeast surface and animal cell expression system
■ Expression in E. coli, purification, activity assay, and production of polyclonal antiserum of α-2,6 sialyltransferase of H. rorentzi
■ Expression of α2,6 STs of S. intermedius and H. roretzi and α2,3Gal ST of Ciona savignyi on the surface of S. cerevisiae and examination of their enzyme activity
■ Development of CHO cell expression system of STs S. intermedius, H. roretzi and C. savignyi

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 기관고유사업보고서 초록 ... 3
• 요약문 ... 4
• SUMMARY ... 8
• CONTENTS ... 11
• 목차 ... 12
• 제 1 장 서론 ... 13
• 제 1 절 연구개발의 목적 ... 13
• 제 2절 연구개발의 필요성 ... 13
• 제 2 장 국내·외 기술개발 현황 ... 15
• 제 1 절 국내 기술개발 현황 ... 15
• 제 3 장 연구개발 수행 내용 및 결과 ... 18
• 제 1 절 연구개발 목표 ... 18
• 제 2 절 연구개발 전략 ... 20
• 제 3 절 연구개발 내용 및 결과 ... 25
• 제 4 장 사업(연구개발)목표 달성도 및 대외기여도 ... 81
• 제 1 절 연구개발목표 달성도 ... 81
• 제 2 절 대외 기여도 ... 82
• 제 5 장 연구개발 결과의 활용계획 ... 83
• □ 해양 무척추동물 유래 당쇄수식 효소 개발 ... 83
• □ 해양유래 유지/다당류 가수분해효소 발굴 및 응용 ... 83
• □ 해양 생명체 유래 광학선택적 epoxide hydrolase 개발 및 구조분석 ... 84
• □ 유용 해양천연물을 이용한 항암활성 선도물질 도출 ... 84
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 85
• 제 1 절 연구사례의 조사 ... 85
• 제 2 절 세부 기술사항의 검토 분석 ... 91
• 제 3 절 관련 특허 동향 ... 94
• 제 7 장 참고문헌 ... 106