초록 ▼

5. 최종 연구결과 요약
◦ 브루셀라 혈청학적 진단법 공유
- 로즈뱅갈 진단법 공유 및 전수
◦ 브루셀라 야외주 분리․동정 기술공유
- 브루셀라선택배지(MBS) 제조법 전수
- 브루셀라용 가검물 처리방법 전수 : 가검물 채취, 가검물 전처리, 배양조건 등
- 브루셀라균이 의심되는 집락검사
․ 5% 면양혈액배지에 균계대
․ 의심되는 집락에 대한 생화학적 검사 : Catalase test, Oxidase test, Urease test 등
․ 브루셀라균 유전학적 검사법 실시 : 특이 pr

5. 최종 연구결과 요약
◦ 브루셀라 혈청학적 진단법 공유
- 로즈뱅갈 진단법 공유 및 전수
◦ 브루셀라 야외주 분리․동정 기술공유
- 브루셀라선택배지(MBS) 제조법 전수
- 브루셀라용 가검물 처리방법 전수 : 가검물 채취, 가검물 전처리, 배양조건 등
- 브루셀라균이 의심되는 집락검사
․ 5% 면양혈액배지에 균계대
․ 의심되는 집락에 대한 생화학적 검사 : Catalase test, Oxidase test, Urease test 등
․ 브루셀라균 유전학적 검사법 실시 : 특이 primer가 함유된 유전학적 검사법 실시
․ 사슴에서 채취한 가검물의 결과 B. melitensis로 추정됨
◦ 중국에서 채취한 가검혈청에 대한 브루셀라 항체검사 실시
- 로즈뱅갈, Tube test, FPA 실시
- 소 137두, 양 100두, 돼지 132두 모두 음성
◦ 소결핵 유전자 추출 및 특이유전자 검출 기술 전수 및 확립
- 특이 Primer가 함유된 PCR premixure 제공 및 검사방법 전수
◦ 중국에서 채취한 가검혈청에 대한 결핵 항체검사 실시
- cELISA 실시
- 소 137두, 양 100두, 돼지 132두 모두 음성
◦ 톡소플라즈마 진단액 제공, 진단기술전수 및 진단검사
- 톡소플라즈마 항체진단 IFA법 진단액 제공 및 기술전수
- 톡소플라즈마 항체진단법 Latex 진단액 제공 및 기술전수
◦ 중국에서 채취한 돼지혈청에 대한 톡소플라즈마 항체검사 실시
- NVRQS-Latex로 실시 : 132두 중 19두 양성(14.4% 양성)
<중국측 자체 실험결과>
◦ 브루셀라 야외주 분리․동정
- 브루셀라선택배지(MBS) 제조 및 가검물을 처리하여 의심되는 집락검사 완료
- AMOS PCR결과 4개의 양성집락 검출
- 현재 로즈뱅갈 양성소의 질 분비물로부터 의심집락 검사 중
◦ 중국측 소혈청에 대한 브루셀라 항체검사(로즈뱅갈) 실시
- 1년차(2008.10-2009.9) : 775두 중 112두 양성(14.45% 양성)
- 2년차(2009.10-현재) : 663두 중 80두 양성(12.06% 양성)
◦ 중국측 돼지혈청에 대한 톡소플라즈마 항체검사(IFA) 실시
- 1년차(2008.10-2009.9) : 789두 중 115두 양성(14.57% 양성)
<중국 브루셀라 야외주 분리 시도>
◦ 소목장 20두의 질분비물 브루셀라선택배지(MBS)에 배양 시도
◦ 중국 동북삼성지역 소 브루셀라 혈청검사 실시
- 평판응집반응 실시
- 총 24개 현․시의 소1369두 중 112두 양성(8.2% 양성률)
<중국 소결핵 항체가 검사 실시>
◦ 중국 연변 4개 지역에서 사육되는 소에 대한 혈청검사 결과
- Dip stick 결과 총 265두 중 14마리 양성: 5.3% 양성률
- ELISA 결과 총 251두 중 6마리 양성: 2.4% 양성률
<돼지 톡소플라즈마 백신 야외실험>
◦ 3개의 그룹으로 진행
- 1군: Toxoplasma BEI Vaccine + IMS1313(총 volume의 50%): 30일령 7두
- 2군: SFC-Vero Antigen + Toxoplasma Only Antigen BEI Vaccine + IMS1313(총 volume의 50%) : 30일령 9두
- 3군: Control: 30일령 8두
◦ 1차 백신 후 항체가 검사: IFA 항체검사법
- 1:32 ～ 128배까지 항체 양성
◦ 2차 백신 후 항체가 검사: IFA 항체검사법
- 1:512～ 800배까지 항체 양성
◦ 공격접종 실시: 1x10⁷ tachyzoites/마리
◦ 공격접종 실시 후 군별 임상증상 및 부검을 실시한 결과 1군은 7마리 중 1마리, 2군은 9마리 모두 생존, 대조군인 3군은 8마리 중 2마리 사망함. 군별 임상증상을 관찰한 결과 대조군이 전체적으로 발진, 구토, 설사, 식욕, 원기부족, 발열, 소변실금 등 임상증상이 백신접종군에 비해 주로 나타남.

Abstract ▼

The final goal of this study is to identify the status of zoonosis infection in animals, exchange the information about the zoonosis, and support the diagnostic technology of zoonosis for the promotion of OIE international reference lab. and the control of diseases in Northeastern Asia (Yanbian area

The final goal of this study is to identify the status of zoonosis infection in animals, exchange the information about the zoonosis, and support the diagnostic technology of zoonosis for the promotion of OIE international reference lab. and the control of diseases in Northeastern Asia (Yanbian area).
The methods of serological diagnosis, isolation and identification of brucellosis were transferred to Yabian agricultural college in China. Serological survey of brucellosis in Yanbian area were done in NVRQS by RBT(Rose bangal test): Cattle 3.6%(5/137), Sheep 9.9%(10/101), and Pig 6.8%(9/132). The serological test for brucellosis was also done in Yanbian Veterinary College in China by RBT; In 1,438 of bovine sera collected from October, 2008 to September, 2010, 192 sera (13.35%) were positive. The brucella mellitensis was isolated from the aborted deer sample and confirmed by the biochemical tests and AMOS/Bruce ladder PCR.
The methods of serological diagnosis, isolation and identification of Tuberculosis were also transferred. Serological survey of brucellosis in Yanbian area were done in NVRQS: Cattle(137), Sheep(101), and Pig(132) were all negative by cELISA. The serological test for Tuberculosis was also done in Yanbian Veterinary College in China by the Dip stick and ELISA; In 265 of bovine sera collected from October, 2008 to September, 2010, 14 sera (5.3%) were positive in Dip stick and 6 sera(2.4%) in ELISA.
Finally the methods of serological diagnosis for Toxoplasmosis was also transferred. Serological survey of Toxoplasmosis in Yanbian area were done in NVRQS by the latex agglutination test: Pig 14.4%(19/132). The serological test for Toxoplasmosis was also done in Yanbian Veterinary College in China by IFA; In 789 of swine sera collected from October, 2008 to September, 2010, 115 sera (14.57%) were positive. In addition, Toxoplasma vaccination experiment was conducted in China. In the 24 pigs, the treatment were administered in three groups. The first group was given vaccination twice with T. gondii tachyzoite cultured in Vero cells and the second group also dose given vaccination twice with T. gondii tachyzoite cultured in SFC-Vero cells and then challenged with 1x10⁷ T. gondii tachyzoites. The third group doesn't given vaccination as a control and just challenged with 1x10⁷ T. gondii tachyzoites. After challenging pigs with T. gondii tachyzoites, the serological tests, clinical signs and autopsy were examined. 6 of 7 in the first group, all nine in the second group, and 6 of 8 in the control group were survived. Statistical observations of clinical symptoms such as a whole rash, vomiting, diarrhea, lack of vigor and heat were mostly over in the control group.

목차 Contents

• 총괄요약표 ... 1
• 연구과제 최종결과보고서 ... 3
• Ⅰ. 연구배경 및 목표 ... 3
• 1. 연구배경 ... 3
• 2. 연구최종목표 ... 4
• 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 4
• Ⅱ. 연구방법 및 수행전략 ... 5
• 1. 재료 ... 5
• 2. 연구전략 및 방법 ... 5
• Ⅲ. 연구결과 ... 6
• Ⅲ-1. 진단법 전수 및 공유 ... 6
• Ⅲ-2. 브루셀라 및 결핵 관련 세미나 실시 ... 22
• Ⅲ-3. 브루셀라 연구 결과 ... 23
• Ⅲ-4. 결핵 연구 결과 ... 29
• Ⅲ-5. 톡소플라즈마 연구 결과 ... 29
• Ⅳ. 연구결과요약 및 고찰 ... 41
• 1) 브루셀라 진단법 전수 및 공유 ... 41
• 2) 결핵 진단법 전수 및 공유 ... 41
• 3) 톡소플라즈마 진단액 제공, 진단기술전수 및 진단검사 ... 41
• 4) 중국 내 동물의 혈청검사 실시 ... 41
• 5) 중국측 브루셀라 야외주 분리.동정 결과 ... 41
• 6) 중국측 소혈청에 대한 브루셀라 항체검사(로즈뱅갈) 실시 ... 41
• 7) 중국 소결핵 항체가 검사 실시 ... 42
• 8) 중국측 돼지혈청에 대한 톡소플라즈마 항체검사(IFA) 실시 ... 42
• 9) 돼지 톡소플라즈마 백신 야외실험 ... 42
• Ⅴ. 연구결과 활용실적 및 계획 ... 42
• Ⅵ. 참고문헌 ... 43
• Ⅶ. 영문초록 ... 44
• 끝페이지 ... 44