초록 ▼

5. 최종 연구결과 요약
세부과제명: 구제역바이러스 억제제의 seed 최적화 및 특성분석
o Ad-3siRNA 가 Ad-porcine IFNαγ보다 더 빠른 억제 효과를 나타냄
o 구제역의 7가지 혈청형에 모두 효과를 나타내었으나 strain 별로 효율 차이는 존재하였다.
o 구제역바이러스 생산에 적합한 조건 및 프로토콜안(접종 MOI, 동물접종용 바이러스 생산방법, 적정유전자 계대수, 미생물 오염 시험 등)을 확립하였다.
o Ad-porcine IFN-αγ를 돼지세포에 처리시 다양한 종류의 ISG(IFN

5. 최종 연구결과 요약
세부과제명: 구제역바이러스 억제제의 seed 최적화 및 특성분석
o Ad-3siRNA 가 Ad-porcine IFNαγ보다 더 빠른 억제 효과를 나타냄
o 구제역의 7가지 혈청형에 모두 효과를 나타내었으나 strain 별로 효율 차이는 존재하였다.
o 구제역바이러스 생산에 적합한 조건 및 프로토콜안(접종 MOI, 동물접종용 바이러스 생산방법, 적정유전자 계대수, 미생물 오염 시험 등)을 확립하였다.
o Ad-porcine IFN-αγ를 돼지세포에 처리시 다양한 종류의 ISG(IFN-stimulating gene) 의 유도가 일어남을 확인하여, 동물에서의 IFN 등의 유도를 예상해 볼 수 있었다.
세부과제명: 구제역바이러스 억제제 동물적용을 위한 조건 확립
o Ad-porcine IFN-αγ 와 Ad-3siRNA의 접종 조건은 근육접종(Intramuscular injection) 이 효율적인 것으로 판단하였다.
o Ad-porcine IFN-αγ 와 Ad-3siRNA의 혼합접종 후 접종 2일 후 공격접종시 Ad-3siRNA 의 혼합 비율을 더 높일 때 억제효과가 더 우수하였다.
o Ad-porcine IFN-αγ 와 Ad-3siRNA의 병용제를 10kg 돼지에서 1010 copy 이상으로 근육접종 했을때,직접 접촉을 통한 공격접종에서 관찰기간 (9일) 동안 모두 방어(protection) 됨을 관찰하였다.
o Ad-porcine IFN-αγ 와 Ad-3siRNA 병용제의 접종시간 경과에 따른 cytokine 분석결과 접종 4일째 가장 높아졌다가 7일째에는 하락하는 경향을 보였다.
o 마우스에서의 백신과 항바이러스제 병용 실험에서 구제역 백신의 효과는 강력하여 백신후 3일후에 방어되는것으로 확인되었고, 항바이러스제과 백신 후 2일째 공격된 동물에서 모두 방어하였다.
o 돼지에서의 백신과 항바이러스제의 병용실험은 현재 실험 중임

Abstract ▼

Because the currently available vaccines against foot-and-mouth disease (FMD)provide no protection until 4-7 days post-vaccination, the only alternative method to halt the spread of the FMD virus (FMDV) during outbreaks is the application of antiviral agents. Combinatorial treatment strategies have

Because the currently available vaccines against foot-and-mouth disease (FMD)provide no protection until 4-7 days post-vaccination, the only alternative method to halt the spread of the FMD virus (FMDV) during outbreaks is the application of antiviral agents. Combinatorial treatment strategies have been used to enhance the efficacy of antiviral agents, which may be advantageous in overcoming viral resistance mechanisms against antiviral treatments. We have developed a recombinant adenovirus that simultaneously expresses porcine interferon α and γ(Ad-porcine IFN-αγ), as well as 3 small interfering RNAs (Ad-3siRNA) targeting FMDV mRNAs encoding non-structural proteins. First, the antiviral effects of Ad-porcine IFN-αγ and Ad-3siRNA expression were tested in combination in porcine cells, suckling mice, and swine. We observed in porcine cells and mice,as well as robust protection against the highly pathogenic strain O/Andong/SKR/2010 and increased expression of cytokines in swine following combination treatment. We showed that combination treatment was effective against all serotypes of FMDV. In addition, we prepared the manual on production and storage of the antiviral agent (Ad-porcine IFN-αγ and Ad-3siRNA). Therefore, we suggest that the combined treatment with Ad-porcine IFN-αγ and Ad-3siRNA may offer fast-acting antiviral protection and be used with a vaccine during the period that the vaccine does not provide protection. Ad-porcine IFN-αγ and Ad-3siRNA with a vaccine.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 농림축산검역검사기술개발 연구과제 최종결과보고서 ... 2
• Ⅰ. 연구배경 및 목표 ... 4
• 1. 연구배경 ... 4
• 2. 연구최종목표 ... 6
• 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 6
• Ⅱ. 연구방법 및 수행전략 ... 6
• 1. 재 료 ... 6
• 2. 연구전략 및 방법 ... 7
• Ⅲ. 연구결과 ... 8
• 가. 구제역바이러스 억제제의 seed 최적화 및 특성분석 ... 8
• 나. 구제역바이러스 억제제 야외 적용을 위한 조건 확립 ... 17
• Ⅳ. 연구결과요약 ... 29
• 1. 구제역바이러스 억제제의 seed 최적화 및 특성분석 ... 29
• 2. 구제역바이러스 억제제 야외 적용을 위한 조건 확립 (돼지) ... 29
• Ⅴ. 고 찰 ... 30
• Ⅵ. 연구결과 활용실적 및 계획 ... 31
• Ⅶ. 참고자료 ... 31
• Ⅷ. 영문초록 ... 32
• 끝페이지 ... 33