[보고서]마비성패독 중 표준독소 분리정제에 관한 연구-삭시토신(S axitoxin) 및 고니오톡신(Gonyautoxin

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마비성패독 중 표준독소 분리정제에 관한 연구-삭시토신(S axitoxin) 및 고니오톡신(Gonyautoxin

S tudy on purification of standard toxin from paralytic shellfish poison in shellfish

과제명	마비성패독 중 표준독소 분리정제에 관한 연구-삭시토신(Saxitoxin) 및 고니오톡신(Gonyautoxin)
주관연구기관	강릉원주대학교
보고서유형	최종보고서
발행국가	대한민국
언어	한국어
발행년월	2015-09
과제시작년도	2014
주관부처	식품의약품안전청 Korea Food & Drug Administration
등록번호	TRKO201600010558
과제고유번호	1475008111
사업명	식품등안전관리
DB 구축일자	2016-10-15
키워드	패류독소.마비성패독.삭시토신.고니오톡신.분리ㆍ정제.shellfish toxin.Paralytic shellfish toxin.Saxitoxin.Gonyautoxin.Purification.
DOI	https://doi.org/10.23000/TRKO201600010558

연구과제
타임라인
▼

과제명

마비성패독 중 표준독소 분리정제에 관한 연구-삭시토신(Saxitoxin) 및 고니오톡신(Gonyautoxin)

과제기간

2014

총연구비 ...

초록
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1. 시료의 확보
마산시 덕동, 거제도 시방리, 부산 용호동에서 독화된 패류 약 80kg(독소함량 83,861 ㎍) 확보하였으며, GTX4, 1과 GTX3, 2의 mole%와 독소함량비가 높았으며 STX의 함량은 극히 미량인 것...

1. 시료의 확보
마산시 덕동, 거제도 시방리, 부산 용호동에서 독화된 패류 약 80kg(독소함량 83,861 ㎍) 확보하였으며, GTX4, 1과 GTX3, 2의 mole%와 독소함량비가 높았으며 STX의 함량은 극히 미량인 것으로 나타났음

2. 마비성패독 중 STX , GTX 분리법 마련
독화된 패류에서 패류 중량 3배의 80% ethyl alcohol로 독소를 추출하고, 동량의 CH₂Cl₂로 지방성분을 제거하여 조독소를 분리하는 방법을 확립하였으며 독소의 수율은 72.5%이었음

3. 마비성패독 중 STX , GTX 정제법 마련
분리한 조독소를 활성탄 처리, Bio-gel P2 gel filtration, Bio-Rex 70 cation exchange column chromatography를 통하여 GTX1+4와 GTX2+3를 정제하였고 GTX1, 4의 독소함량은 840㎍이었으며 최종 수율은 4.2%이었다. GTX2, 3의 독소함량은 1,680㎍이었으며 최종 수율은 8.4%이었음

4. 마비성패독 중 STX , GTX 순도 확인법 마련
GTX1+4의 표준품과 정제독소를 대상으로 negative mode로 parent ion 410을 daughter ion 367으로 쪼개어 SRM으로 분석한 결과, 동일한 ion을 확인 할 수 있었음
GTX2+3의 표준품과 정제독소를 대상으로 negative mode로 parent ion 394을 daughter ion 357으로 쪼개어 SRM으로 분석한 결과, 동일한 ion을 확인 할 수 있었음
GTX1+4와 2+3의 표준품과 정제독소를 대상으로 negative mode로 스펙트럼을 비교한 결과, ion의 비율이 확인되었음
¹H NMR을 측정한 결과, 두 화합물의 입체구조에 따라 다른 chemical shift를 양상을 보이는 것을 확인하였으며, GTX 3 및 2의 적분값의 비율이 1:2.85인 값을 나타내어 이 결과는 위의 LC분석 자료와 동일함을 시사하였음

5. 마비성패독 중 STX , GTX 표준품 확보
GTX1+GTX4 10mL (독소함량 840 ㎍)와 GTX2+3 10 mL (독소함량 1,680 ㎍)를 확보하였음

Abstract
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1. Collection of toxic shellfish
Toxic shellfish (80kg) containing 83,861 ㎍ of paralytic shellfish toxin (PST) were collected a...

1. Collection of toxic shellfish
Toxic shellfish (80kg) containing 83,861 ㎍ of paralytic shellfish toxin (PST) were collected at Duck-dong, Masan-si and Sibang-ri, Keoje-si, Gyungsangnam-do, and Yonhho-dong, Busan-si, Korea. The main toxin components were GTX1, 2, 3, and 4 but content of STX was extremely smal.l

2. Establishment of isolation method STX , GTX 1+4, GTX 2+3 from toxic shellfish
The crude toxins were extracted from toxic shellfish with 80% ethyl alcohol and CH₂Cl₂로 and the yield of toxin was 72.5%.

3. Establishment of purification method STX , GTX 1+4, GTX 2+3 from toxic shellfish.
GTX1+4 and GTX2+3 were purified from crude toxin with Bio-gel P2 gel filtration, Bio-Rex 70 cation exchange column chromatography. The toxin amount GTX1+4 and GTX2+3 were 840 ㎍ and 1,680 ㎍, respectively. The yield of GTX1+4 and GTX2+3 were 4.2% and 8.4%, respectively.

4. Establishment of purity verification method of STX , GTX 1+4, GTX 2+3 purified from toxic shellfish.
GTX1+4 and GTX2+3 were confirmed to identical ion to standard toxin with LC/MS/MS and SRM by negative mode.
GTX2+3 were showed different chemical shift by solid structure with ¹H NMR and their ratio was 1;2.85.

5. Collection of 10 mL of saxitoxin (STX ,15μg/mL), Gonyautoxin (GTX 1+GTX 4 : 25μg/mL, GTX 2+GTX 3 :40 μg/mL) with 95% of purity
GTX1+4 (10 mL, 840 ㎍) and GTX2+3 (10 mL, 1,680 ㎍) were collected from toxic shellfish.

연구자의 다른 보고서

신일식(2)

표 / 그림 (41)

참고문헌

이 보고서와 함께 이용한 콘텐츠

과제명(ProjectTitle) :	마비성패독 중 표준독소 분리정제에 관한 연구-삭시토신(Saxitoxin) 및 고니오톡신(Gonyautoxin)
연구책임자(Manager) :	신일식
과제기간(DetailSeriesProject) :	2014
총연구비 (DetailSeriesProject) :	-
키워드(keyword) :	패류독소, 마비성패독, 삭시토신, 고니오톡신
과제수행기간(LeadAgency) :	강릉원주대학교
연구목표(Goal) :	고농도의 마비성패독을 함유하고 있는 패류(진주담치, 굴)로부터 마비성패독 중 순도 95% 이상의 STX(15μg/mL), GTX1+GTX4(25μg/mL), GTX2+GTX3(40 μg/mL) 각각 10 mL 확보
연구내용(Abstract) :	1. 마비성패독으로 독화된 패류 시료 확보● 우리나라에서 마비성패독은 1-6월 사이에 주로 검출됨● 따라서 마비성패독 함량이 높은 기간(4-5월)을 중심으로 패류시료 다량 확보 ● 국립수산과학원의 마비성패독 발생속보를 활용하고 자료 협조2. 마비성패독 중 STX, GTX 분리법 마련● 독화된 패류로부터 우리나라에서 주로 검출되는 STX과 GTX의 분리법 개...
기대효과(Effect) :	○ Saxitoxin 및 Gonyautoxin 표준품 확보를 통한 기기분석 효율성 제고○ 마비성패독 검사를 기기분석방법으로 대체시 표준품으로 활용○ 패류 안전관리를 위한 해양독소 정제방법 등의 기술 확보○ 마비성패독의 정확한 함량 검사로 수산식품 안전성확보 및 국민건강 증진

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