초록 ▼

○ 사람의 유전체 안에 안전한 유전자 삽입을 위한 안전한 위치 2 곳 발굴.
○ 유전자 가위와 single strand oligonucleotide를 이용하여 생체외에서 성공적인 유전 교정을 달성함
○ 발굴된 유전자에 해당하는 유전자가위의 제작 및 효과까지 검증. 후보 지역에 마커 유전자를 삽입하고, 발현을 확인함.
○유전자 가위를 발현하는 바이러스를 성공적으로 제작하고 생체 내에서 작용여부까지 확인함.
○ 간 유전질환 마우스 모델에서 유전자 가위를 이용하여 질환 유전자 교정 여부를 확인하였으며, 증상 완화까지

○ 사람의 유전체 안에 안전한 유전자 삽입을 위한 안전한 위치 2 곳 발굴.
○ 유전자 가위와 single strand oligonucleotide를 이용하여 생체외에서 성공적인 유전 교정을 달성함
○ 발굴된 유전자에 해당하는 유전자가위의 제작 및 효과까지 검증. 후보 지역에 마커 유전자를 삽입하고, 발현을 확인함.
○유전자 가위를 발현하는 바이러스를 성공적으로 제작하고 생체 내에서 작용여부까지 확인함.
○ 간 유전질환 마우스 모델에서 유전자 가위를 이용하여 질환 유전자 교정 여부를 확인하였으며, 증상 완화까지 관찰함.

(출처:보고서 요약서 3p)

Abstract ▼

Results
□ Exploration and validation of Safe harbor in the genome for gene insertion
- The standard of candidate sites for gene insertion has been set up and candidate sites has been selected.
- Production and validation of CRISPR-Cas9 targeting selected candidate sites.
- Insertion of m

Results
□ Exploration and validation of Safe harbor in the genome for gene insertion
- The standard of candidate sites for gene insertion has been set up and candidate sites has been selected.
- Production and validation of CRISPR-Cas9 targeting selected candidate sites.
- Insertion of marker gene such as GFP to the candidate sites using CRISPR-Cas9.
- Validation of marker gene insertion, and check the expression level of marker gene
- Preparation of cell line which has the exterior gene inside the candidate sites.
- Investigation of the gene expression level in the cell line by performing RT-PCR.
- Finally, Safe harbor where neighbour gene expression is not affected by gene insertion has been selected.

□ Correction of genetic defects using CRISPR-Cas9 with single-strand oligonucleotide.
- Cell culture of genetic disease models such as Phenylketonuria model
- Design and production of CRISPR-Cas9 to correct defective genes and validation of this CRISPR-Cas9.
- Design and production of the optimized single-strand oligonucleotide.
- A cell line of which defective gene that causes a disease is edited by delivering single-strand oligonucleotide with CRISPR-Cas9 has been made and validated.
- RGEN combined with cell-penetrating protein has been made and using this complex, in vivo genome editing has been performed.
- Genome has been edited using CRISPR-Cas9 with viruses such as AAV, adenovirus.

(출처:SUMMARY 5p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제 출 문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 국문 요약문 ... 4
• SUMMARY ... 5
• CONTENTS ... 6
• 목차 ... 7
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 8
• 1-1. 연구개발 목적 ... 8
• 1-2. 연구개발의 필요성 ... 8
• 1-3. 연구개발 범위 ... 8
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 8
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 9
• 4. 목표달성도 및 관련분야 기여도 ... 22
• 4-1. 목표달성도 ... 22
• 4-2. 관련분야 기여도 ... 23
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 24
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 26
• 7. 연구개발성과의 보안등급 ... 26
• 8. 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구시설·장비 현황 ... 26
• 9. 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전조치 이행실적 ... 27
• 10. 연구개발과제의 대표적 연구실적 ... 27
• 11. 기타사항 ... 28
• 12. 참고문헌 ... 29
• 별첨4. 실적 증빙자료 ... 30
• 별첨5. 기타 첨부서류 ... 47
• 끝페이지 ... 58