초록 ▼

○ LRS와 editing 도메인이 제거된 LRS (LRSdED)를 제작하고 대장균에서 발현시켜 정제하였으며 이를 대상으로 결정체시리님을 실시하였다.
○ LRSdED의 결정체를 제작하였으며 X-선 회절데이터를 수집하였다.
○ LRS의 N-말단 도메인, editing 도메인, helical 도메인 (anticodon binding 도메인), C-말단 도메인으로 나누고 각 도메인과 연결체에 대한 클로닝과 발현, 정제를 실시하였다.
○ RagB와 RagD를 대장균에서 발현, 정제하였으며 이들의 복합체를 생산하였다.

○ LRS와 editing 도메인이 제거된 LRS (LRSdED)를 제작하고 대장균에서 발현시켜 정제하였으며 이를 대상으로 결정체시리님을 실시하였다.
○ LRSdED의 결정체를 제작하였으며 X-선 회절데이터를 수집하였다.
○ LRS의 N-말단 도메인, editing 도메인, helical 도메인 (anticodon binding 도메인), C-말단 도메인으로 나누고 각 도메인과 연결체에 대한 클로닝과 발현, 정제를 실시하였다.
○ RagB와 RagD를 대장균에서 발현, 정제하였으며 이들의 복합체를 생산하였다.
○ LRS-RagD 복합체와 LRS-RagB-RagD 복합체의 발현시스템을 개발하고 발현 및 정제를 실시하였다.
○ MRS의 다양한 발현 벡터에 클로닝하고 발현 및 정제를 실시하였다.
○ MRS의 N-말단과 AIMP3의 복합체를 발현 정제하였으며 결정체 스크리닝을 실시하였다.

(출처 : 보고서 요약서 3p)

Abstract ▼

IV. Results

(1) Various version of expression constructs for full-length LRS and a LRS derivative, which has a deletion of editing domain (LRS dED), were generated. The proteins were over-expressed in several E. coli strains and purified. Crystal screening was done with the purified proteins.

IV. Results

(1) Various version of expression constructs for full-length LRS and a LRS derivative, which has a deletion of editing domain (LRS dED), were generated. The proteins were over-expressed in several E. coli strains and purified. Crystal screening was done with the purified proteins.
(2) Crystals of LRS dED were obtained and their x-ray diffraction data set were collected.
(3) LRS protein was divided to four domains including N-terminal, editing, helical, and C-terminal domains and various version of each domains were expressed and purified.
(4) Expression systems for LRS-RagD and LRS-RagD-RagB complexes were developed and the complexes were expressed and purified.
(5) RagB and RagD were expressed in E. coli and were purified, and their complex was produced.
(6) MRS was expressed and purified as a series of constructs using various expression vectors.
(7) A complex of AIMP3 and N-terminal domain of MRS were expressed, purified and subjected to crystal screening.

(출처 : SUMMARY 6p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 요약문 ... 4
• SUMMARY ... 6
• CONTENTS ... 8
• 목차 ... 9
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 10
• 1. 연구개발의 목적 ... 10
• 2. 연구개발의 필요성 ... 10
• 3. 연구개발 범위 ... 10
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 11
• 1. LRS의 새로운 기능에 대한 연구 ... 11
• 2. LRS 구조에 대한 연구 현황 ... 11
• 3. RagB와 RagD 구조에 대한 연구 현황 ... 11
• 4. LRS와 RagD의 상호작용에 대한 연구 현황 ... 11
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 12
• 제1절 연구방법 ... 12
• 1. 단백질의 구조 예측 및 변이단백질의 제작 ... 12
• 2. 단백질의 발현 및 정제 ... 12
• 3. 단백질결정화 ... 12
• 4. X-ray 회절 및 구조결정 ... 12
• 제2절 연구내용 ... 13
• 1. LRS 결정구조 규명 ... 13
• 2. LRS의 leucine 인식기작 규명 ... 13
• 3. LRS의 RagD GAP 활성 ... 13
• 4. 추가된 연구내용 ... 13
• 제3절 연구결과 ... 14
• 1. LRS 결정구조 ... 14
• 2. LRS와 leucine, leucyl adenylate 복합체 ... 20
• 3. LRS와 RagD의 interaction ... 21
• 4. RagB와 RagD의 interaction ... 29
• 5. MRS 결정구조 ... 33
• 6. MRS와 AIMP3의 interaction ... 35
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 37
• 1. 연구별 연구개발 목표와 달성도 ... 37
• 가. LRS 결정구조 규명 ... 37
• 나. LRS의 leucine 인식기작 규명 ... 37
• 다. LRS와 RagD의 상호작용 ... 37
• 라. 추가된 연구목표 ... 37
• 2. 관련분야의 기술발전에의 기여도 ... 37
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 38
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 39
• 제7장 연구시설·장비 현황 ... 39
• 제8장 참고문헌 ... 40
• 끝페이지 ... 40