초록 ▼

마이크로 RNAs 기반 무독성 유도만능 줄기세포 확립 및 신규 미분화 줄기세포 표지인자 발굴과 항체 개발을 위하여 아래와 같은 내용으로 연구를 수행함.
첫째, 새로운 전달체를 기반으로 리프로그래밍 인자들의 세포도입을 통한 유도만능 줄기세포를 제작하는 기술 개발하였음
둘째, 유도만능 줄기세포의 마우스 면역반응을 통한 미분화 상태 전분화능 줄기세포 특이적 표지마커들과 항체를 개발하였음
셋째, 신규 표지인자 Dsg2는 전분화능 줄기세포의 미분화 상태 및 전분화능을 유지하는데 핵심인자로서 역할을 규명하였음
다섯째, 신

마이크로 RNAs 기반 무독성 유도만능 줄기세포 확립 및 신규 미분화 줄기세포 표지인자 발굴과 항체 개발을 위하여 아래와 같은 내용으로 연구를 수행함.
첫째, 새로운 전달체를 기반으로 리프로그래밍 인자들의 세포도입을 통한 유도만능 줄기세포를 제작하는 기술 개발하였음
둘째, 유도만능 줄기세포의 마우스 면역반응을 통한 미분화 상태 전분화능 줄기세포 특이적 표지마커들과 항체를 개발하였음
셋째, 신규 표지인자 Dsg2는 전분화능 줄기세포의 미분화 상태 및 전분화능을 유지하는데 핵심인자로서 역할을 규명하였음
다섯째, 신규 표지인자 Dsg2는 기존 표지인자 마커들보다 미분화 상태 전분화능 줄기세포를 규정하는데 있어 보다 정확함을 규명하였고, 항체의 활용성 검증을 위한 대량생산 시스템을 구축하였음
여섯째, 항체에 독성물질을 결합하여 세포에 도입 시, 미분화 상태 전분화능 줄기세포만을 선택적으로 제거할 수 있는 유용성을 검증하였음
최종적으로는 항체에 형광물질 및 독성물질이 결합된 항체-약물복합체를 기반으로 한 생체 모니터링 시스템을 확립하였고 치료 안전성을 극대화시킴

(출처 : 보고서 요약서 3p)

Abstract ▼

Purpose & Contents
The aim of this study is to establish induced pluripotent stem cells (iPSCs) based on reprogramming factors and to identify novel undifferentiated iPSC surface markers, and to develop antibodies against them by mouse immunization. Finally, we aim to develop original technology

Purpose & Contents
The aim of this study is to establish induced pluripotent stem cells (iPSCs) based on reprogramming factors and to identify novel undifferentiated iPSC surface markers, and to develop antibodies against them by mouse immunization. Finally, we aim to develop original technology of safety validation for clinical application of stem cells through the establishment of cell separation system with high efficiency and purity.
1. Establishment of induced pluripotent stem cells (iPSCs) based on miRNAs
○ Optimization of transductional efficiency of reprogramming factors-vehicle complex into somatic cells
○ Establishment of induced pluripotent stem cells (iPSCs) based on reprogramming factors-vehicle complex and analysis of phenotype
○ Comparative analysis of the characteristics related pluripotency of iPSCs
2. Identification of novel undifferentiated iPSC surface markers and development of antibodies against them
○ Development of antibodies by mouse immunization
○ Selection of specific antibodies bind to undifferentiated iPSCs and identification of their target antigens
○ Validation of expression pattern of the novel surface markers on undifferentiated state and analysis of phenotype
3. Functional analysis of the novel iPSC surface markers
○ Development of expression regulation system of the novel iPSC surface markers
○ Functional analysis of the novel iPSC surface markers on pluripotency
○ Functional analysis of the novel iPSC surface markers on maintenance of undifferentiated state
○ Optimization of hybridoma culture system and mass production
4. Validation of function and control network of the novel iPSC surface markers on pluripotency
○ Functional analysis of pluripotency by expression control of the novel surface markers on undifferentiated state
○ Validation of the novel surface markers on undifferentiated state
5. Verification system development of in vivo safety of stem cell therapy
○ Development of a technique to eliminate undifferentiated iPSCs based on antibody-drug conjugates
○ Development of stem cell monitoring system based on fluorescent probe and antibody

Results
1. Generated induced pluripotent stem cells based on reprogramming factors-new vehicles
2. Identified novel undifferentiated PSC surface markers and developed antibodies against them
3. Elucidated the roles of novel PSC surface markers(Dsg2) on maintenance of undifferentiated state and pluriotency
4. Confirmed the specificity of Dsg2 compared to well defined surface markers(SSEA3,-4) in undifferentiated PSCs and usefulness of its antibody to remove the undifferentiated PSCs
5. Optimized hybridoma culture system and mass production
6. Development of antibody-drug conjugates for in vivo teratoma elimination
7. Development of antibody-dye conjugates for in vivo monitoring of stem cells

Expected Contribution
- The de-differantiation technology based on miRNAs-vehicle complex will be applicable to develop PSC from various somatic cell sources
- It will be able to provide new undifferentiated stem cell surface markers and antibodies against them
- New surface markers and antibodies will be applicable to characterize iPSCs and to monitor differentiation stage, and to validate therapeutic efficacy and safety of stem cells

(출처 : SUMMARY 5p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제 출 문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 요 약 문 ... 4
• SUMMARY ... 5
• CONTENTS ... 6
• 목차 ... 7
• 제1장. 연구개발과제의 개요 ... 8
• 1절 연구개발의 개요 ... 8
• 2절 연구개발의 필요성 ... 8
• 제2장. 국내외 기술 개발 현황 ... 18
• 1절 연구기술의 국내외 수준 ... 18
• 제3장. 연구 수행 내용 및 성과 ... 22
• 1절 이론적, 실험적 접근방법 ... 22
• 2절 연구 내용 및 연구 결과 ... 23
• 제4장. 목표 달성도 및 관련 분야 기여도 ... 55
• 제5장. 연구개발성과의 활용계획 ... 58
• 1절 연구개발결과의 활용계획 ... 58
• 2절 기대성과 ... 58
• 제6장. 연구 과정에서 수집한 해외 과학기술 정보 ... 59
• 제7장. 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구시설·장비 현황 ... 60
• 제8장. 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전 조치 이행 실적 ... 61
• 제9장. 연구개발과제의 대표적 연구 실적 ... 62
• 제10장. 참고 문헌 ... 64
• 끝페이지 ... 65