초록 ▼

1. 본 연구를 통해 신경 독성 물질 투여를 통한 PD 모델 미니돼지 생산 및 모니터링 시스템을 확립하였다.

2. 형질전환 복제 기법을 이용한 1) hAPP발현과 2) hAPP와 PS1 다중 발현 AD모델 미니돼지 2종을 각각 생산 하였다.

3. 형질전환 및 녹아웃 복제 기법을 이용한 1) hSNCA발현과 2) Parkin KO PD모델 미니돼지 2종을 각각 생산하였다.

4. 생산된 1종의 AD 돼지(hAPP발현)와 2종의 PD 돼지(hSNCA발현, Parkin KO)의 번식능을 검증하였으며,

1. 본 연구를 통해 신경 독성 물질 투여를 통한 PD 모델 미니돼지 생산 및 모니터링 시스템을 확립하였다.

2. 형질전환 복제 기법을 이용한 1) hAPP발현과 2) hAPP와 PS1 다중 발현 AD모델 미니돼지 2종을 각각 생산 하였다.

3. 형질전환 및 녹아웃 복제 기법을 이용한 1) hSNCA발현과 2) Parkin KO PD모델 미니돼지 2종을 각각 생산하였다.

4. 생산된 1종의 AD 돼지(hAPP발현)와 2종의 PD 돼지(hSNCA발현, Parkin KO)의 번식능을 검증하였으며, 후대의 생산을 통해 생식선전이를 검증하였다.

5. 생산된 형질전환 PD 모델돼지간의 교배를 통해 다중 형질전환 PD 모델 미니돼지를 생산하였다.

6. AD/PD모델 미니돼지의 행동학적/영상학적 기법을 이용한 비침습적 모니터링 시스템을 구축하였다.

7. 비침습적 모니터링 시스템을 이용하여 1종의 AD 돼지(hAPP발현)와 2종의 PD 돼지(hSNCA발현, Parkin KO)의 전임상모델로의 가능성을 검증하였다.

8. AD/PD모델 미니돼지의 조직병리학적 평가 및 유전자 프로파일링 시스템 구축을 통해 모델 돼지에서의 변화상을 관찰하였다.

9. AD/PD모델 미니돼지의 활용 기반 구축을 위하여 특허 출원 및 기술이전을 실시하였다.

(출처 : 요약서 3p)

Abstract ▼

Purpose&Contents
The purpose of this research is 1) to produce two kinds of Alzheimer's disease (AD) minipigs using transgenic cells overexpressing AD related genes through somatic cell nuclear transfer (SCNT) technology, 2) to produce three kinds of Parkinson’s disease (PD) minipigs combined wit

Purpose&Contents
The purpose of this research is 1) to produce two kinds of Alzheimer's disease (AD) minipigs using transgenic cells overexpressing AD related genes through somatic cell nuclear transfer (SCNT) technology, 2) to produce three kinds of Parkinson’s disease (PD) minipigs combined with genetic engineering technology and SCNT and 3) to analyze the clinical phenotypes of those minipigs via non-invasive approaches for proceeding the investigation of the most representative neurodegenerative disease.
Therefore, subsequently, the final goal is to establish AD/PD animal model for human clinical use.

Results
1. Production of PD model minipig via neurotoxic chemical injection and monitoring system has been established by this research.

2. Using transgenic cells and SCNT technology, 1) hAPP overexpression minipigs and 2) hAPP and PS1 multi-genes overexpressing minipigs were produced.

3. Using genetically engineered cells with transgenesis or knockout system,
1) hSNCA overexpressing minipigs and 2) Parkin KO minipigs were generated.

4. Reproductive ability of one type of AD minipigs (hAPP) and two types of PD minipigs (hSNCA overexpreesion and Parkin KO, respectively) was proved and germline transmission was confirmed by producing offsprings.

5. Multi-genes modified PD minipigs were produced via breeding PD minipigs.

6. Non-invasive monitoring system such as behavioral and imaging approaches was established through AD/PD minipigs analysis.

7. The possibility of AD/PD minipigs as preclinical animal models was proved by using of non-invasive minitoring system for one type of minipigs (hAPP) and two types of PD minipigs (hSNCA overexpreesion and Parkin KO, respectively).

8. Clinical phenotypes of AD/PD minipigs have been observed via evaluation of histopathological anlaysis and genetic profiling system.

9. To establish AD/PD model minipigs for application basement, patent applications and technology licensings were performed.

Expected Contribution
1. Production of PD model pig and analysis of behavioral scoring were applied to internal patent and this invention is performed for technology licensing.

2. Production of transgenic minipig for AD model and use of those are applied for domestic patent and technology licensing. The produced AD minipigs are analyzed for the first time by non-invasive investigation and established cells for producing those minipigs and AD minipigs could be used for commercialization.

3. Production of genetically engineered minipigs for PD model and use of those are applied for domestic patent and technology licensing. The produced PD minipigs could be used for diagnosis and therapeutic research.

4. PD model pig production via Parkin knockout and use of those are applied for domestic patent. This is the first Parkin KO minipigs produced by SCNT and consequently imaging and behavioral analysis result suggest the value for the human clinical use. Therefore, they could be used for the PD diagnosis and drug development or its related technology could be transferred to international/domestic company.

(출처 : SUMMARY 5p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 국문 요약문 ... 4
• SUMMARY ... 5
• CONTENTS ... 7
• 목차 ... 8
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 10
• 제1절 연구개발 목적 ... 10
• 제2절 연구개발의 필요성 ... 10
• 제3절 연구개발 범위 ... 14
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 16
• 제1절 신경독성물질 투여를 통한 퇴행성 뇌진환 모델 확립 연구 동향 ... 16
• 제2절 퇴행성 뇌신경 질환 (AD/PD)의 메카니즘 및 병인 유전자 연구 ... 17
• 제3절 비설치류에서 퇴행성 뇌신경 질환 모델 동물 생산 ... 18
• 제4절 비설치류에서 퇴행성 뇌신경 질환 모델 동물 생산 ... 21
• 제5절 퇴행성 뇌질환 모델 돼지의 시장 현황 ... 23
• 제3장 연구수행 내용 및 결과 ... 24
• 제1절 연구개발의 추진전략ㆍ방법 및 추진체계, 추진일정 ... 24
• 제2절 연구개발 방법 및 연구결과 ... 31
• 1세부: 체세포 핵이식 기법에 의한 퇴행성 뇌신경 질환 미니돼지 생산 ... 31
• 2세부: 질환 모델 미니돼지의 영상학적 분석 및 행동학적 분석 ... 131
• 1협동: 질환 모델 미니돼지 생산을 위한 ZFN 합성 및 유전자 프로파일링 ... 200
• 2협동: 질환 모델 돼지의 사육 및 관리기법 확립 ... 237
• 제3절 연구과제 결과 총정리 ... 284
• 제4절 연구과제의 성과 ... 287
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 294
• 제5장 연구개발의 활용계획 ... 299
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 301
• 제7장 연구개발 성과의 보안등급 ... 301
• 제8장 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구시설․장비 현황 ... 301
• 제9장 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전조치 이행 실적 ... 302
• 제10장 연구개발과제의 대표적 연구실적 ... 306
• 제11장 기타사항 ... 306
• 제12장 참고문헌 ... 307
• 끝페이지 ... 311