초록 ▼

최적의 화합물을 합성하기 위해 목표치를 상회하는 선도물질 유도체 및 최적 유효성을 보이는 화합물 (681개)를 합성하였으며, 물질의 developability를 다면 평가(TOPflash/GI50/k-RAS 분해능)로 측정하였음. 그 결과 선도물질과 유효성이 대등하거나 우수한 유도체를 14종 확보하였으며, 대사 안정성 평가, CYP450, 심장 독성등의 in vitro ADME 와 PAMPA, 용해도, Log D 같은 물성 확인,그리고 in vivo PK 을 통해 선도물질 대비 물성이 좋아진 화합물들을 도출하여 성실히 목표치를 달성

최적의 화합물을 합성하기 위해 목표치를 상회하는 선도물질 유도체 및 최적 유효성을 보이는 화합물 (681개)를 합성하였으며, 물질의 developability를 다면 평가(TOPflash/GI50/k-RAS 분해능)로 측정하였음. 그 결과 선도물질과 유효성이 대등하거나 우수한 유도체를 14종 확보하였으며, 대사 안정성 평가, CYP450, 심장 독성등의 in vitro ADME 와 PAMPA, 용해도, Log D 같은 물성 확인,그리고 in vivo PK 을 통해 선도물질 대비 물성이 좋아진 화합물들을 도출하여 성실히 목표치를 달성하였음. 또한 APC mutant CRC cell line screening을 통해 확보한 대장암 세포주에서 세포 성장과 군체 형성 실험을 수행하여 선도물질인 KYA1797K보다 효과적으로 암세포생장을 억제하는 화합물 2종을 최종 확보함으로서 당초 목표 이상의 연구를 수행하였음. 더 나아가 대장암이외에도 소세포 폐암과 AML같은 다른 암종에서도 항암억제 능력을 보이는 의미있는 결과를 도출하여, 적응증 확장이라는 가능성을 제시함. 최종 화합물 2종의 in vivo efficacy를 xenograft mouse model과 PDX 모텔에서 수행하려 준비중이었으나 실험 지연으로 인해 연구룰 수행할 수 없었으며, in vivo efficacy 실험 후에 진행하려 한 Non-rodent PK와 예비 독성 실험 역시 수행할 수 없었음. 비록 in vivo efficacy를 확인하지는 못하였으나 First-in-Class라는 과제의 어려움올 극복하고, 선도물질 대비 항암능력이 뛰어나면서 세포독성이 적은 최적화된 최종 화합물 2종을 도출한것에 큰 의의가 있으며, 더 나아가 back-up으로 새로운 scaffold를 확보함으로서 지적 재산권 강화 및 적응증 확장의 가능성을 보여 줌으로써 성공적인 과제 수행을 하였다고 판단됩 .

( 출처 : 보고서 요약서 3p )

Abstract ▼

lV. Results
◆ Confirmed the anti-cancer effect of KYA1797K in a cell lines that have various genetic characteristics related to APC/K-Ras.
- We observed that KYA1797K effectively inhibited the growth of various CRC cells which have activated Wnt/ß-catenin and Ras signaling pathway.
- We pro

lV. Results
◆ Confirmed the anti-cancer effect of KYA1797K in a cell lines that have various genetic characteristics related to APC/K-Ras.
- We observed that KYA1797K effectively inhibited the growth of various CRC cells which have activated Wnt/ß-catenin and Ras signaling pathway.
- We proved that KYA1797K inhibits cell growth sirnilar to anti-cancer drugs including 5- FU, AS703026 and XAV939 (AS703026/XAV939; is currently developing) in HCT15 and CRC cell lines.
- We confirmed that KYA1797K inhibited cell growth of HCT1l6 cells (haboring non-degradable β-catenin) weaker than other CRC cell lines, indicating that KYA1797K inhibits cell growth according to the mode of a action which we previously elucidated.
- We confirmed that colony formation was effectively inhibited by KYA1797K by treating the drug on various CRC cell lines (DLD-1, HCT15, SW480, etc).

◆ Confirmed KYA1797K’s anti-cancer effect in non NSCLC
- We confirmed that the β -catenin and Ras stability were decreased by KYA1797K treatment in NSCLC cells and cell growth and colony formation were also suppressed by KYA1797K.
- Based on the above results, we confirmed that KYA1797K can overcome the resistance of KRAS against Erlotinib.
- We observed that KYA1797K induces apoptosis (one of the major markers of anti-cancer effect) in NSCLC cells, which carries K -Ras mutation.
- In a mice model, which carries lung cancer due to K-Ras mutation, we observed that KYA1797K was effective in decreasing the cancer size, while Erlotinib was not effective.

◆ Obtained KYA1797K derivatives that inhibit the Wnt signaling pathway through high-throughput reporter assay
- We performed TOPflash reporter assay on 681 derivatives of KYA1797K.

◆ Selection of compounds destabilizing both ß- catenin Ras by westem blotting
- For selected 100 compounds, screened by TOPflash reporter assay, we performed westem blotting analysis and decided compounds that decreased ß-catenin and Ras simultaneously .

◆ Obtained derivatives that had enhanced activity than KYA1797K
- We confinned the effect of 28 KYA1797K derivatives on TOPflash reporter assay/westem blotting and inhibition of colony formation in DLD-1 and SW480 CRC cells.
- We sclected 6 derivatives (A3514, A3607, A2927, A3553 , A3594, and A3614) from above that showed promising effects for future research, and characterized each in detail.
- Through the TOPflash reporter assay/westem blotting/colony formation assay in low dose concentrations, we obtained A3514 and A3607 were more effective than KYA1797K.

◆ Identified novel isoindolone derivatives that have improved developability profiles than KYA1797K
- Isoindolone series of compounds demonstrated good PK profiles, Wnt activity, westem blotting, and CRC cell growth inhibition.

( 출처 : SUMMARY 11p )

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 요약문 ... 5
• SUMMARY ... 9
• CONTENTS ... 14
• 목차 ... 15
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 16
• 제1절 연구 개발의 목적 ... 16
• 제2절 연구 개발의 필요성 ... 18
• 제3절 연구 개발의 범위 ... 20
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 22
• 제1절 국내외 관련 분야에 대한 기술개발현황 ... 22
• 제2절 연구결과가 국내외 기술개발현황에서 차지하는 위치 ... 25
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 28
• 제1절 연구수행방법 ... 28
• 제2절 연구내용 및 연구결과 ... 31
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 62
• 제1절 단계별 연구목표 ... 62
• 제2절 평가의 착안점 ... 62
• 제3절 연구개발목표의 달성도 ... 63
• 제4절 관련분야에의 기여도 ... 64
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 65
• 제1절 추가연구의 필요성 및 다른 연구에의 응용 ... 65
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 66
• 제7장 연구시설·장비 현황 ... 67
• 제8장 참고문헌 ... 67
• 끝페이지 ... 69