초록 ▼

인간화항체인 hzVSF(humanize VSF)의 변이체(variant) 12번과 13번을 세포주(CHO)에 도입하여 생산하고 면역원성，활성 및 생산성을 조사하여 후보물질 hzVSF v13을 도출하였음. 바이러스 감염 세포, 동물 및 사람의 조직에서 hzVSF의 수용체인 VR이 발현되었고 정상세포에서는 발견되지 않았음. 비임상독성시험을 통하여 hzVSF v13의 정맥투여시 PK를 확인한 결과 마우스 단회투여시 반감기가 약 10 일이었으며，랫드 및 비글견에 2주간 총 6회 투여시 반감기는 약 20일이었음. 또한 hzVSF v13의 i

인간화항체인 hzVSF(humanize VSF)의 변이체(variant) 12번과 13번을 세포주(CHO)에 도입하여 생산하고 면역원성，활성 및 생산성을 조사하여 후보물질 hzVSF v13을 도출하였음. 바이러스 감염 세포, 동물 및 사람의 조직에서 hzVSF의 수용체인 VR이 발현되었고 정상세포에서는 발견되지 않았음. 비임상독성시험을 통하여 hzVSF v13의 정맥투여시 PK를 확인한 결과 마우스 단회투여시 반감기가 약 10 일이었으며，랫드 및 비글견에 2주간 총 6회 투여시 반감기는 약 20일이었음. 또한 hzVSF v13의 in vitro 항바이러스능을 확인한 결과 HBV와 HCV의 genotype 1a, 1b 및 2a에서 탁월한 유효성을 나타냄. SCID/Alb-uPA 마우스에 사람의 간세포를 이식한 후 HBV 및 HCV를 감염시킨 마우스모델을 이 용하여 hzVSF v13의 효과를 입증하였으며，사람의 B형간염과 유사한 우드척간염바이러스를 우드척에 감염시킨 모델에서도 hzVSF v13에 투여에 의해 임상증상이 완화되는 것을 확인하였음. 하지만 Ebola 바이러스에 대해서는 hzVSF v13이 효과가 없었음. 이러한 결과들로부터 hzVSF v13을 다양한 바이러스 감염증에 적용 가능한 후보물질로 도출하였으며, B형 및 C형 간염을 적응증으로 지속적으로 개발 하고 있음

(출처 : 요약서 3p)

Abstract ▼

IV Results
○ To deduce the candidates of hzVSF variant 12 and variant 13 obtained by in silico de-immunization
○ Although hzVSF v12 is expected to have low immunogenicity, antiviral activity is similar to hzVSF wt, and hzVSF v13 is a relatively high immunogenicity candidate with excellent anti

IV Results
○ To deduce the candidates of hzVSF variant 12 and variant 13 obtained by in silico de-immunization
○ Although hzVSF v12 is expected to have low immunogenicity, antiviral activity is similar to hzVSF wt, and hzVSF v13 is a relatively high immunogenicity candidate with excellent antiviral activity
○ Stable pooled cells were established for each variant and were produced for in viro experiments and in vitro PBMC assays (for immunogenicity)
○ In vitro PBMC assay showed that immunogenicity of hzVSF v13 was less than hzVSF v12 and antiviral activity of hzVSF v13 was about 2.5 times higher than that of hzVSF v12. Stimulation index of T-cell activation for hzVSF v13 was 1.05, which was similar to that of the buffer. Only 3 of 51 patients had a stimulation index of 2 or higher, suggesting that the possibility of immunogenicity in the clinic is very low
○ hzVSF v13 was produced for in vitro and in vivo efficacy studies
○ The in vitro antiviral activity of HBV and HCV (genotype 1a, 1b and 2a) of hzVSF v13 was found to be excellent when compared with antiviral chemotherapeutic agents currently in clinical use
○ In combination with chemotherapeutic agents used for HBV and HCV, some of the HBV treatments showed a synergistic effect, but the addition effect was mainly in combination with HCV treatment.
○ The affinity between hzVSF v13 and the receptor was measured and PK data were obtained through single intravenous administration in mice, 4 week repetition in rats and beagle dogs and 4 week recovery test. In mice, hzVSF v13 had about 10 days of a half-life in a single dose, and had about 22 days of a half-life in a rat and a beagle dog with six times treatments over 2 weeks. When administered to humans, it is assumed to have a half-life of 21-30 days
○ We conducted a study on the mechanism of hzVSF v13 and its receptors in HBV and HCV infected cell lines.
○ The expression of hzVSF v13 receptor in viral infected tissues was examined to confirm the expression of the receptor specifically for viral infection
○ Immunohistochemistry of hzVSF v13 receptors in normal tissues of mouse, rat, and beagle dogs confirmed that the kidney cells were stained cytoplasm nonspecifically. In addition, it was confirmed to be stained in pancreas, liver and lymph node according to animal species. However, this staining is not correlated with the activity of VR by hzVSF v13
○ In normal tissues of humans, it was confirmed that hzVSF v13 staining was observed in skin and pancreas, though there were differences among individuals. However, this staining was evaluated as a nonspecific response that is not related to the activity of VR by hzVSF v13
○ It was confirmed that hzVSF v13 has excellent antiviral and anti - inflammatory activity in mice infected with mouse hepatitis virus (MHV).
○ We confirmed the possibility of the antiviral treatment of hzVSF v13 against HBV and HCV in a mouse transplanted mouse model.
○ It has been shown that the amount of cccDNA in HBV is remarkably reduced in HBV-infected mouse models and it is expected to have excellent efficacy different from the chemotherapeutic agents currently used as therapeutic agents
○ The antiviral activity of hzVSF v13 in woodchuck infected with woodchuck heptitis virus (WHV), which is similar to human hepatitis B, is highly anticipated as a treatment for hepatitis B virus
○ The efficacy of hzVSF v13 against Ebola virus was assessed in vitro and in mouse models at the BSL4 facility of the University of Texas Medical Branch at Galveston, but no antiviral efficacy against Ebola virus was confirmed
○ The presence of natural VSF (nVSF) present in the human body was confirmed, and the measurement method was set up.
○ Based on these results, we derived hzVSF v13 as a candidate substance of VSF

(출처 : SUMMARY 8p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제 출 문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 요약문 ... 4
• SUMMARY ... 7
• CONTENTS ... 10
• 목차 ... 12
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 14
• 제1절 연구개발의 목적 ... 14
• 제2절 연구개발의 필요성 ... 14
• 1. 타겟 환자군 (Target Patient Population) ... 14
• 2. 미충족 의학적 수요 (Unmet Medical Needs) ... 18
• 제3절 연구개발의 범위 ... 25
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 26
• 제1절 국내외 기술개발현황 ... 26
• 1. 시장규모와 성장세 (Size and Growth) ... 26
• 2. 경쟁 약물 (Competition) ... 30
• 제2절 연구결과의 국내외 기술개발현황에서 차지하는 위치 ... 34
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 35
• 제1절 연구 내용 ... 35
• 1. 마일스톤 1 : hzVSF variant 12와 13의 항바이러스 효능 및 면역원성 평가로 후보물질 선택 ... 35
• 제2절 연구 결과 ... 37
• 1. 후보확인용 hzVSF variant 12와 13의 세포주 개발 및 생산(후보 확인용 및 비임상시험용) ... 37
• 2. 다양한 MHC의 말초백혈구에서 hzVSF variant 12 및 13의 blastogenesis 유발 조사(Lonza에서 수행); Epibase in vitro screening ... 41
• 3. hzVSF의 in vitro 항-HBV 활성 평가 ... 44
• 4. hzVSF의 in vitro 항-HCV 활성 평가 ... 50
• 5. 체외에서 바이러스 감염시 hzVSF와 IFN의 시너지 효과 분석 ... 54
• 6. 체외에서 항바이러스 화학요법제와 hzVSF의 병용 투여 효과 평가 ... 55
• 7. hzVSF의 간염 바이러스에 대한 in vivo 항바이러스능 조사 ... 57
• 8. VSF 수용체와 반응성 및 정상조직과의 교차반응 조사 ... 76
• 9. 수용체와의 친화성 및 preADME 연구 ... 84
• 10. 항바이러스 작용기전(수용체 및 신호전달기전) ... 90
• 11. 사람에서 정상적으로 존재하는 인간VSF 확인 및 측정법 개발 ... 98
• 12. Ebola 바이러스에 대한 유효성 평가(국제 공동연구; 미국에 있는 University of Texas Medical Branch at Galveston) ... 101
• 13. hzVSF variant 12와 13중 선택 ... 104
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 105
• 제1절 연구목표 ... 105
• 제2절 연구개발 달성도 ... 106
• 제3절 관련분야 기술발전 기여도 ... 107
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 110
• 제1절 활용계획 ... 110
• 1. 연구개발 결과물 활용 방안 ... 110
• 2. 사업화 전략 및 방법 (Commercialization) ... 110
• 제2절 추가연구 필요성 ... 111
• 제3절 추진방향 ... 112
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 113
• 제1절 해외과학기술정보 ... 113
• 제7장 연구시설·장비 현황 ... 115
• 제8장 참고문헌 ... 116
• 끝페이지 ... 117