초록 ▼

연구의 목적 및 내용
❍ 연구목적
본 연구는 인체 간조직으로 부터 분리한 primary human hepatocyte (PHH)를 마우스 간에 이식하여 마우스를 인간의 간으로 전환한 humanized liver mouse를 개발하고, 이를 이용하여 간염바이러스 감염 및 항바이러스제 효능 평가를 실시하여 검증하고자 함.

❍ 연구개발 내용
· 인체 간조직의 안정적 확보
· 간조직으로부터 PHH의 분리 및 배양법 구축
· 간염바이러스 동물 모델 구축 및 바이러스 생활사 분석 시스템 구축
· 면

연구의 목적 및 내용
❍ 연구목적
본 연구는 인체 간조직으로 부터 분리한 primary human hepatocyte (PHH)를 마우스 간에 이식하여 마우스를 인간의 간으로 전환한 humanized liver mouse를 개발하고, 이를 이용하여 간염바이러스 감염 및 항바이러스제 효능 평가를 실시하여 검증하고자 함.

❍ 연구개발 내용
· 인체 간조직의 안정적 확보
· 간조직으로부터 PHH의 분리 및 배양법 구축
· 간염바이러스 동물 모델 구축 및 바이러스 생활사 분석 시스템 구축
· 면역 부전 마우스를 개발
· 면역 부전 마우스에 PHH를 이식하여 humanized liver mouse 개발
· Humanized liver mouse에 바이러스 감염 및 효능 평가 연구

연구개발성과
❍ 인체 간조직으로부터 PHH의 분리법 및 배양법을 확보함
❍ 2종의 면역부전 마우스를 개발하였으며, 이들의 수정란을 확보하여 특허를 위한 수정란 기탁을 완료하였음 (KCTC18784P, KCTC18785P)
❍ 국내에 없는 최신 humanized liver mouse 동물을 모델 확보함
❍ 신약 개발, 간염바이러스 연구, 간독성 연구, 간질환 연구 등 다양한 분야에 적용 가능한 마우스 모델의 개발
❍ 3편의 SCI 논문 게재 (이중 2편은 Nature Communications (IF=11.878)에 개제함) 및 학술 발표
❍ 4명의 석사 인력 양성
❍ 특허 출원을 위한 KRIBB 심의 신청완료 (문서번호: S2020-018)

연구개발성과의 활용계획(기대효과)
❍ Humanized liver mouse 동물은 간염 바이러스가 감염 가능한 유일한 in vivo 모델로서 치료제 개발 및 관련 기초 연구에 적용 가능
❍ 신약 개발, 후보 물질의 간독성 연구, 효능 연구 등 비임상 연구 모델로 활용 가능
❍ 환자 유래의 PHH를 이식 (Patient-derived xenograft (PDX)) 후에 이를 증폭하여 다량의 PDX를 분리하여 바이러스 연구 및 신약개발 연구에 적용 또는 판매 가능
❍ 인간화 마우스 그 자체를 제품으로 바로 시장에 진출 가능, 향 후 인간 간세포 이식 효율(70% 이상)이 최적화된 마우스 개발에 활용 예정
❍ 상기 최적화마우스 개발 기술을 기업에 이전함으로써 다양한 약물 평가용 마우스로 공급함으로써 신약개발 활성화에 기여

(출처 : 요약문 4p)

Abstract ▼

Purpose&Contents
❍ Purpose
Developing humanized liver mice harboring human primary hepatocytes (PHH) that can be used for hepatitis virus infection and liver disease research

❍ Contents
· Isolation and culture of primary human hepatocytes from human liver tissues
· Establishment o

Purpose&Contents
❍ Purpose
Developing humanized liver mice harboring human primary hepatocytes (PHH) that can be used for hepatitis virus infection and liver disease research

❍ Contents
· Isolation and culture of primary human hepatocytes from human liver tissues
· Establishment of animal model system capable of hepatitis virus infection and basic viral research
· Development of immunodeficiency mice for generation of humanized liver mice
· Development of humanized liver mice by transplanting PHH into immunodeficiency mice
· Evaluation of humanized liver mouse by hepatitis virus infection and antiviral agents

Results
❍ Establishments of methods for isolation and culture of PHH from human liver tissues
❍ Securing fertilized eggs of two immunocompromised mice and their deposition for patent submission (KCTC18784P, KCTC18785P)
❍ Development of novel system for humanized liver mouse
❍ Development of humanized liver mouse models for the research including drug development, hepatitis virus infection, hepatotoxicity study, and several human liver diseases
❍ Three SCI papers including two papers (Nat Commun. IF = 11.878) and presentations in academic meeting.
❍ Supporting four master course students
❍ Under patent submission

Expected Contribution
❍ This mouse model can be used for hepatitis B and C virus infection and related basic studies
❍ Can be used for pre-clinical research for new drug development and hepatotoxicity studies of drug candidates
❍ Used for generation of patient-derived hepatocytes for the study of precision medicine
❍ Technology transfer to companies for business development
❍ Securing patents using novel immunocompromised mouse system

(출처 : SUMMARY 5p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제 출 문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 국문 요약문 ... 4
• SUMMARY ... 5
• 목차 ... 6
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 7
• 1-1. 연구개발 목적 ... 7
• 1-2. 연구개발의 필요성 ... 8
• 1-3. 연구개발 범위 ... 9
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 11
• 2-1. 국외 동향 ... 11
• 2-2. 국내 동향 ... 18
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 19
• 3-1. Primary Human Hepatocyte 분리/배양 기술 확립 ... 19
• 3-2. 모델 마우스의 간세포 이식 연구 ... 27
• 3-3. NSIG 면역부전마우스 개발 ... 29
• 3-4. NSIG 면역부전마우스를 이용한 인간간세포 이식 연구 ... 43
• 3-5. 인간화 간 마우스에서 바이러스 감염/생활사 분석 및 항바이러스제 효능 평가 ... 48
• 4. 목표달성도 및 관련분야 기여도 ... 53
• 4-1. 목표달성도 ... 53
• 4-2. 관련분야 기여도 ... 54
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 54
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 56
• 7. 연구개발성과의 보안등급 ... 56
• 8. 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구시설·장비 현황 ... 56
• 9. 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전조치 이행실적 ... 57
• 10. 연구개발과제의 대표적 연구실적 ... 58
• 11. 기타사항 ... 58
• 12. 참고문헌 ... 59
• [별첨3] 실적 증빙자료 ... 60
• [별첨4] 기타 첨부서류 ... 70
• 끝페이지 ... 74