초록 ▼

연구개요
본 연구는 NADPH 산화제 활성 억제제 투여가 전뇌허혈 동물모델에서 신경세포 사멸을 감소시킨 결과와, 저체온 유도 시 NADPH 산화제의 subnuit인 p47의 세포막발현이 감소된 결과를 보인 예비 실험의 결과를 바탕으로, 심정지 후 무산소성 뇌손상에서 NADPH 산화제 활성도, 중심체온, 그리고 신경세포사멸 양상간의 구체적인 연관성을 면역조직화학적, 분자생물학적 방법으로 확인함으로써, 현재의 표준 치료인 목표체온조절치료의 효과를 NADPH 산화제 활성 억제제 투여가 보완할 수 있을 지의 여부를 확인하고자 기획한

연구개요
본 연구는 NADPH 산화제 활성 억제제 투여가 전뇌허혈 동물모델에서 신경세포 사멸을 감소시킨 결과와, 저체온 유도 시 NADPH 산화제의 subnuit인 p47의 세포막발현이 감소된 결과를 보인 예비 실험의 결과를 바탕으로, 심정지 후 무산소성 뇌손상에서 NADPH 산화제 활성도, 중심체온, 그리고 신경세포사멸 양상간의 구체적인 연관성을 면역조직화학적, 분자생물학적 방법으로 확인함으로써, 현재의 표준 치료인 목표체온조절치료의 효과를 NADPH 산화제 활성 억제제 투여가 보완할 수 있을 지의 여부를 확인하고자 기획한 연구였음. 우선 연구 수행을 위한 동물모델 수립 실험세팅 및 모델의 재현성을 검증하였고, 추가로 in-vitro 효과 규명을 위한 oxygen-glucose deprivation 세포 모델을 수립하였음. 연구계획 수립시 저체온 유도의 치료적 효과에 대해 다소 회의적인 임상 증거가 제시된 상황으로 최적의 중심체온 유지 전략에 대한 비교 평가를 주 연구주제로 진행할 예정이었으나, 이후 저체온 치료의 효과를 입증하는 임상증거가 다수 제시된 상황으로 별도의 체온유지전략보다는 NADPH 산화제 활성 조절 기반의 중간엽줄기세포 투여의 효과를 확인하는 연구를 진행하였음.

연구 목표대비 연구결과
● 전뇌허혈 유효성 평가 모델 수립
- Bilateral common carotid artery occlusion with controlled exsanguination 방법을 이용한 in-vivo animal model 수립. EEG 모니터 기반으로 객관성 및 재현성을 최대화 하였음.
- SH-SY5Y 세포주를 이용한 oxygen-glucose deprivation (OGD) 세포모델 수립하였음.
● 중심체온 유지 전략에 따른 예후 확인
- 저체온 유도군과 비유도군간 신경세포사멸 수준을 비교평가하였음.
● NADPH 산화제 활성 조절의 효과 확인
- 전뇌허혈 동물모델에 NADPH 산화제 활성 억제제인 apocynin 투여 후 신경세포 사멸 및 신경염증 반응 발생에 미치는 영향 평가
- 전뇌허혈 동물모델에 대한 NADPH 산화제 활성 억제제 전처치 중간엽줄기세포 투여와 일반 중간엽줄기세포 투여의 효과 비교 평가
● NADPH 산화제 활성 조절에 따른 중간엽줄기세포 분비능(secretome) 변화 분석
- 중간엽줄기세포 배양액으로부터 엑소좀을 분리하여 이에 대한 LC-MS 및 ontology 분석을 하였고, NADPH 산화제 활성 억제제인 apocynin을 전처치 한 경우, 그렇지 않은 경우와 비교해 secretome이 변하는 양상을 분석하였음.

연구발성과의 활용 계획 및 기대효과 (연구개발결과의 중요성)
단순히 뇌허혈이나 외상성뇌손상 등과 같은 뇌손상에 대한 NADPH 산화제 활성 억제제 투여의 효과는 기존의 여러 연구를 통해 보고되어왔음. 하지만 본 연구에서 보여준 것처럼 전뇌허혈에 대한 치료적 효과를 위해 투여된 중간엽줄기세포의 NADPH 산화제의 활성 조절과 신경학적 예후와의 관계에 대해선 기존에 구체적으로 제시된 바 없었음. 이는 기존에 밝혀지지 않은 전뇌허혈 손상에 따른 신경손상의 새로운 치료 타겟을 밝히는 것으로, 특히 새로운 치료법을 개발할 유의한 임상근거가 희박한 해당 분야의 특성을 고려할 때, 본 연구의 결과는 단순히 전뇌허혈 치료를 위한 심부체온 유지 전략 수립이나 목표체온조절 치료 보완에 한정되지 않고 심정지 치료의 다양한 분야에 범용적 활용이 가능할 것으로 기대됨. 또한 본 연구의 결과는 심정지 외에도 외상성 뇌손상과 같은 기존 저체온 유도의 치료 효과가 제시되었던 다른 질환 분야에의 활용도 가능할 것으로 판단됨.

(출처 : 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 2. 연구개발과제의 수행 과정 및 수행 내용 ... 5
• 3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 수준 ... 7
• 1) 정성적 연구개발성과(연구개발결과) ... 7
• 2) 세부 정량적 연구개발성과 ... 13
• 3) 목표 달성 수준 ... 13
• 4. 연구개발성과의 관련 분야에 대한 기여 정도(연구개발결과의 중요성) ... 14
• 5. 연구개발성과의 관리 및 활용 계획 ... 14
• 6. 참고문헌 ... 14
• 붙임1. 세부 정량적 연구개발성과 ... 16
• 붙임2. 연구책임자 대표적 연구실적 및 증빙(요약문 및 사본) ... 17
• 끝페이지 ... 20