초록 ▼

□ 연구개요
최근 본 연구실에서 발견한 강력한 노로바이러스(norovirus, NV) 게놈 복제 저해제(genome replication inhibitor) AC-1858의 항바이러스 메커니즘 (mechanism of action, MOA)을 분자 수준에서 규명하기 위해 숙주 세포(host cell)의 모든 숙주 유전자를 개별적으로 녹아웃(knock-out, KO)시킬 수 있는 CRISPR/Cas9 라이브러리를 활용해 AC-1858에 의해 유도되는 숙주 세포의 바이러스 저해 단백질(host restriction factors,

□ 연구개요
최근 본 연구실에서 발견한 강력한 노로바이러스(norovirus, NV) 게놈 복제 저해제(genome replication inhibitor) AC-1858의 항바이러스 메커니즘 (mechanism of action, MOA)을 분자 수준에서 규명하기 위해 숙주 세포(host cell)의 모든 숙주 유전자를 개별적으로 녹아웃(knock-out, KO)시킬 수 있는 CRISPR/Cas9 라이브러리를 활용해 AC-1858에 의해 유도되는 숙주 세포의 바이러스 저해 단백질(host restriction factors, HRFs)을 동정(identification)하고 이 HRFs의 NV 게놈 복제에 대한 효과를 검증(validation)하고자 함.

□ 연구 목표대비 연구결과
○ 1차년도: CRISPR-Cas9 라이브러리를 활용한 모든 숙주 유전자 KO 세포주 구축
ㆍ CRISPR-Cas9 라이브러리 제작용 렌티바이러스 플라스미드를 증폭하고 검증 완료
ㆍ CRISPR-Cas9 라이브러리 렌티바이러스 생산하고 검증 완료
ㆍ CRISPR-Cas9 라이브러리를 발현하는 렌티바이러스를 제작 완료
○ 2차년도: KO시 AC-1858에 저항성을 나타내는 HRF 후보 유전자군 동정 및 AC-1858에 의한 HSF-1조절 메커니즘 규명
ㆍ AC-1858과 G418 항생제를 동시에 처리 시 HG23 세포주에서 노로바이러스가 억제됨으로서 완전한 세포사멸을 유도하는 조건 검색 완료
ㆍ AC-1858에 의해 heat-shock factor(HSF)-1의 발현이 증가하고 증가된 HSF-1이핵 안으로 이동해서 다양한 유전자의 전사활성화를 통해 항바이러스 활성을 나타냄을 밝힘
ㆍ HSF-1의 KO과 과발현을 통해 노로바이러스의 RNA 복제가 증가하고 저해됨을 밝힘
○ 3차년도: AC-1858에 의한 숙주세포의 전체 전사체 변화 연구
ㆍ Total RNA-sequencing을 통한 AC-1858의 처리에 의해 변화하는 숙주세포의 전사체 연구를 완료함
ㆍ RNA-sequencing 분석 결과 AC-1858의 처리에 의해 myc 및 E2F 연관 신호전달 pathway가 선택적으로 활성화 되는 것을 밝힘

□ 연구개발성과의 활용 계획 및 기대효과 (연구개발결과의 중요성)
이번 연구를 통해 AC-1858의 분자수준에서 노로바이러스에 대한 항바이러스 메커니즘을 이해할 수 있게 됨. 특히 이번 연구에서 밝힌 AC-1858의 HSF-1의 기능 조절을 통한 노로바이러스 RNA 복제 조절 메커니즘은 바이러스를 타깃으로하는 항바이러스제가 아닌 숙주세포의 특정 전사인자의 기능을 조절함으로써 항바이러스 활성을 나타내는 방식으로 기존에 시판되고 있는 다양한 종류의 바이러스를 직접적으로 타깃하는 약물과 차별성을 지니고 있다고 판단됨. 숙주 단백질의 조절을 통한 바이러스 복제 저해는 우리 몸에 존재하는 면역활성을 증가시키는 방식으로 노로바이러스뿐만 아니라 코로나와 같은 다른 RNA 바이러스에도 적용가능하다는 점에서 이번 연구를 통해 개발된 AC-1858의 다른 RNA 바이러스 질환에 응용 가능한 범용성을 추후에 연구해볼 가치가 있다고 판단됨.


(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 2. 연구개발과제의 수행 과정 및 수행 내용 ... 4
• 3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 수준 ... 6
• 1) 정성적 연구개발성과(연구개발결과) ... 11
• 2) 세부 정량적 연구개발성과 ... 11
• 3) 목표 달성 수준 ... 11
• 4) 목표 미달 시 원인 분석 ... 11
• 4. 연구개발성과의 관련 분야에 대한 기여 정도(연구개발결과의 중요성) ... 12
• 5. 연구개발성과의 관리 및 활용 계획 ... 12
• 6. 참고문헌 ... 12
• 붙임1. 세부 정량적 연구개발성과 ... 13
• 붙임2. 연구책임자 대표적 연구실적 및 증빙(요약문 및 사본) ... 16
• 끝페이지 ... 28