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NADacse의 cDNA 클로닝을 하기 위한 일차적인 작업으로 Uni-ZAP^TMXR 가토 cDNA library를 만들었다. 가토 적혈구의 NADacse 활성이 다른 종과 조직에 비해 높기때문에 reticulocyte mRNA를 주형으로 cDNA를 합성하였으며 Xenopus 난세포 발현 기구를 이용하여 reticulocyte RNA가 온전한 NADase를 번역함을 확인하였다. 합성되어진cDNA를 Sephacrly S-400 column chromatography를 통과시커 적당한 크기의 cDNA를 얻고 Vector에 연결한다음 Gigapack II Gold ...

NADacse의 cDNA 클로닝을 하기 위한 일차적인 작업으로 Uni-ZAP^TMXR 가토 cDNA library를 만들었다. 가토 적혈구의 NADacse 활성이 다른 종과 조직에 비해 높기때문에 reticulocyte mRNA를 주형으로 cDNA를 합성하였으며 Xenopus 난세포 발현 기구를 이용하여 reticulocyte RNA가 온전한 NADase를 번역함을 확인하였다. 합성되어진cDNA를 Sephacrly S-400 column chromatography를 통과시커 적당한 크기의 cDNA를 얻고 Vector에 연결한다음 Gigapack II Gold Packaging Extact 이용하여 폐케징 하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

As a preliminary work for the cDNA cloning of NAD glycohydrolase (NADase), Uni-ZAP^XR rabbit cDNA library was constructed. Rabbit reticulocytes were chosen for mRNA source because rabbit erythrocytes have been known to possess relatively high NADase activity when compared to other tissues. By using ...

As a preliminary work for the cDNA cloning of NAD glycohydrolase (NADase), Uni-ZAP^XR rabbit cDNA library was constructed. Rabbit reticulocytes were chosen for mRNA source because rabbit erythrocytes have been known to possess relatively high NADase activity when compared to other tissues. By using Xenopus oocyte expression system, the reticulocyte RNA was estimated to be translated into functionally intact NADase. The cDNAs were selected by molecular sieve gel filtration, ligated into the vector, and packed.

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