7,12-dimethylbenz[a]anthracene 및 N-methyl-N-nitrosourea를 투여한 Rat 유선 조직 배양의 형태적 변이 Morphological Changes in the Mammary Gland Organ Culture of the Rat Treated with 7,12-dimethylbenz[a]anthracene and N-methyl-N-nitrosourea원문보기
유선의 조직배양을 이용한 연구는 유선의 생물학적 특성 구명과 유선암 유발 또는 억제에 관한 각종 연구에 필수적으로 활용되고 있다. 본 연구는 유선암 유발물질로 알려져 있는 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA) 또는 N-methyl-N-nitrosourea (MNU)를 3주령 랫드의 생체내에 투여한 후 적출한 유선을 조직 배양하면서 나타나는 변화를 전 형태 관찰법 (whole mount method) 및 병리조직학적 방법으로 조사하고자 수행하였다. ...
유선의 조직배양을 이용한 연구는 유선의 생물학적 특성 구명과 유선암 유발 또는 억제에 관한 각종 연구에 필수적으로 활용되고 있다. 본 연구는 유선암 유발물질로 알려져 있는 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA) 또는 N-methyl-N-nitrosourea (MNU)를 3주령 랫드의 생체내에 투여한 후 적출한 유선을 조직 배양하면서 나타나는 변화를 전 형태 관찰법 (whole mount method) 및 병리조직학적 방법으로 조사하고자 수행하였다. 발암물질 DMBA나 MNU를 투여한 후 적출한 유선의 육안적 변화는 유선 의 분지 정도가 약간 발달되었으며, 유선의 전체적인 부피가 증가하였다. 본 실험에서 형태변화는 terminal end buds (TEB), terminal ducts (TD), alveolar buds (AB), alveolar lobules (AL) 및 hyperplastic alveolar nodules (HAN) 등의 크기, 관찰빈도, 세포밀도, 괴사정도, 세포의 성장 및 분화 정도 등을 중심으로 관찰하였다. 이들에 대한 관찰결과는 전 형태 관찰법과 병리 조직학적 현미경 검사에서 일치되어 나타났다. 즉 발암물질을 투여한 후 적 출한 유선을 조직 배양한 군에서 높은 세포밀도를 가진 원형의 TEB가 관찰 되었으며, 정상적으로 유지된 구조의 AB 및 AL이 관찰되었고, 이들의 발견빈 도도 증가되어 나타났다. 유선암의 병리조직학적 전암병변 지표로 알려져 있 는 HAN이 발암물질을 투여한 군의 조직 배양에서만 특징적으로 나타났다. 발암물질을 투여한 군의 시료에서는 비교적 일부분 괴사가 관찰되었으며, 관 찰빈도도 낮았으나, 발암물질이 투여되지 않은 군의 시료에서는 전체적 괴사 가 흔한 빈도로 관찰되어 뚜f렷한 차이가 나타났다. 세포의 밀도 역시 발암물 질을 투여한 군에서 투여하지 않은 군 보다 매우 높게 관찰되었다. 이와 같 은 소견들을 상대로 발암물질별 비교를 해보면, DMBA를 투여한 군에서 MNU가 처치된 군보다 더 뚜렷한 소견을 보였으며, 세포의 증식 및 분화정도 역시 DMBA 투여군에서 더 확실하게 관찰되었다. 각각의 구조를 구성하는 세포의 조직학적 소견으로서, 유선 상피 세포 (mammary gland epithelial cell) 는 모두 정상으로 관찰되었다. Duct의 기저막 (balsal membrane)을 구성하는 근 상피 세포 (muscular epithelial cell)는 DES가 투여된 군에서 정상의 근 상 피 세포가 DES를 투여하지 않은 군에 비하여 많이 관찰되었으며, 기저막의 유지에도 뚜렷한 차이를 보였다. 위의 결과들로 생체내 투여한 유전 독성 발암물질의 변이 효과 (transformation effect)가 조직 배양에도 지속적으로 유지되는 것으로 조사되 었으며, 특히 DMBA를 투여한 군에서 더 뚜렷한 결과를 관찰할 수 있었다. 따라서 본 연구방법은 유선암의 유발 및 억제에 관한 연구분야에서 생체실험 의 일부분을 대체할 수 있을 것이며, 또한 유선에 영향을 미치는 호르몬의 작 용기전 연구 및 분자 생물학적 연구에 보다 폭넓게 이용될 수 있는 실험모델 의 확립에 기초적 자료가 될 것으로 사료된다.
유선의 조직배양을 이용한 연구는 유선의 생물학적 특성 구명과 유선암 유발 또는 억제에 관한 각종 연구에 필수적으로 활용되고 있다. 본 연구는 유선암 유발물질로 알려져 있는 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA) 또는 N-methyl-N-nitrosourea (MNU)를 3주령 랫드의 생체내에 투여한 후 적출한 유선을 조직 배양하면서 나타나는 변화를 전 형태 관찰법 (whole mount method) 및 병리조직학적 방법으로 조사하고자 수행하였다. 발암물질 DMBA나 MNU를 투여한 후 적출한 유선의 육안적 변화는 유선 의 분지 정도가 약간 발달되었으며, 유선의 전체적인 부피가 증가하였다. 본 실험에서 형태변화는 terminal end buds (TEB), terminal ducts (TD), alveolar buds (AB), alveolar lobules (AL) 및 hyperplastic alveolar nodules (HAN) 등의 크기, 관찰빈도, 세포밀도, 괴사정도, 세포의 성장 및 분화 정도 등을 중심으로 관찰하였다. 이들에 대한 관찰결과는 전 형태 관찰법과 병리 조직학적 현미경 검사에서 일치되어 나타났다. 즉 발암물질을 투여한 후 적 출한 유선을 조직 배양한 군에서 높은 세포밀도를 가진 원형의 TEB가 관찰 되었으며, 정상적으로 유지된 구조의 AB 및 AL이 관찰되었고, 이들의 발견빈 도도 증가되어 나타났다. 유선암의 병리조직학적 전암병변 지표로 알려져 있 는 HAN이 발암물질을 투여한 군의 조직 배양에서만 특징적으로 나타났다. 발암물질을 투여한 군의 시료에서는 비교적 일부분 괴사가 관찰되었으며, 관 찰빈도도 낮았으나, 발암물질이 투여되지 않은 군의 시료에서는 전체적 괴사 가 흔한 빈도로 관찰되어 뚜f렷한 차이가 나타났다. 세포의 밀도 역시 발암물 질을 투여한 군에서 투여하지 않은 군 보다 매우 높게 관찰되었다. 이와 같 은 소견들을 상대로 발암물질별 비교를 해보면, DMBA를 투여한 군에서 MNU가 처치된 군보다 더 뚜렷한 소견을 보였으며, 세포의 증식 및 분화정도 역시 DMBA 투여군에서 더 확실하게 관찰되었다. 각각의 구조를 구성하는 세포의 조직학적 소견으로서, 유선 상피 세포 (mammary gland epithelial cell) 는 모두 정상으로 관찰되었다. Duct의 기저막 (balsal membrane)을 구성하는 근 상피 세포 (muscular epithelial cell)는 DES가 투여된 군에서 정상의 근 상 피 세포가 DES를 투여하지 않은 군에 비하여 많이 관찰되었으며, 기저막의 유지에도 뚜렷한 차이를 보였다. 위의 결과들로 생체내 투여한 유전 독성 발암물질의 변이 효과 (transformation effect)가 조직 배양에도 지속적으로 유지되는 것으로 조사되 었으며, 특히 DMBA를 투여한 군에서 더 뚜렷한 결과를 관찰할 수 있었다. 따라서 본 연구방법은 유선암의 유발 및 억제에 관한 연구분야에서 생체실험 의 일부분을 대체할 수 있을 것이며, 또한 유선에 영향을 미치는 호르몬의 작 용기전 연구 및 분자 생물학적 연구에 보다 폭넓게 이용될 수 있는 실험모델 의 확립에 기초적 자료가 될 것으로 사료된다.
The organ culture model of the whole mammary gland has many advantages for the study of branching morphogenesis and biological characteristics, including tumorigenesis. Prior to whole gland organ culture, rats were treated with 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA) or N-methyl-N-nitrosourea (MNU) fo...
The organ culture model of the whole mammary gland has many advantages for the study of branching morphogenesis and biological characteristics, including tumorigenesis. Prior to whole gland organ culture, rats were treated with 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA) or N-methyl-N-nitrosourea (MNU) for one week. The transforming effect and the morphological changes were assessed by the whole mount preparations and histopathological examination in terminal end buds (TEB), terminal ducts (TD), alveolar buds (AB), alveolar lobules (AL) and hyperplastic alveolar nodules (HAN) of the mammary gland. Gross findings of the mammary glands at dissection were higher branching morphogenesis and larger volume in carcinogen-treated groups than in carcinogen-non-treated groups. Results of the whole mount method were coincided with those of the histopathological observations. Circular TEB, normally maintained AB, AL, and high cellular density were more frequently observed in carcinogen-treated groups than in carcinogen-non-treated groups. Histopathologically, as a preneoplastic marker, HAN was maintained only in mammary organ culture of the carcinogen-treated groups. These findings suggest that in vivo transformation effects by carcinogens persisted during the mammary gland organ culture. These results were more characteristic in DMBA than in MNU-treated group. Ducts and terminal ducts appeared to have lost morphology during their growths in case of without DES. The fact that in vitro organ culture without DES was resulted in abnormal ductular morphogenesis confirms that DES is a physiological regulator of ductular epithelial cell growth. In conclusion, this modified organ culture method provides an excellent system for studying the molecular mechanisms of action of growth-promoting hormones and their possible interactions with chemical carcinogens.
The organ culture model of the whole mammary gland has many advantages for the study of branching morphogenesis and biological characteristics, including tumorigenesis. Prior to whole gland organ culture, rats were treated with 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA) or N-methyl-N-nitrosourea (MNU) for one week. The transforming effect and the morphological changes were assessed by the whole mount preparations and histopathological examination in terminal end buds (TEB), terminal ducts (TD), alveolar buds (AB), alveolar lobules (AL) and hyperplastic alveolar nodules (HAN) of the mammary gland. Gross findings of the mammary glands at dissection were higher branching morphogenesis and larger volume in carcinogen-treated groups than in carcinogen-non-treated groups. Results of the whole mount method were coincided with those of the histopathological observations. Circular TEB, normally maintained AB, AL, and high cellular density were more frequently observed in carcinogen-treated groups than in carcinogen-non-treated groups. Histopathologically, as a preneoplastic marker, HAN was maintained only in mammary organ culture of the carcinogen-treated groups. These findings suggest that in vivo transformation effects by carcinogens persisted during the mammary gland organ culture. These results were more characteristic in DMBA than in MNU-treated group. Ducts and terminal ducts appeared to have lost morphology during their growths in case of without DES. The fact that in vitro organ culture without DES was resulted in abnormal ductular morphogenesis confirms that DES is a physiological regulator of ductular epithelial cell growth. In conclusion, this modified organ culture method provides an excellent system for studying the molecular mechanisms of action of growth-promoting hormones and their possible interactions with chemical carcinogens.
주제어
#7,12-dimethylbenz[a]anthracen N-methyl-N-nitrosourea 조직 배양
학위논문 정보
저자
문지영
학위수여기관
건국대학교 대학원
학위구분
국내석사
학과
생물학과
발행연도
1999
총페이지
v, 39p.
키워드
7,12-dimethylbenz[a]anthracen N-methyl-N-nitrosourea 조직 배양
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