브라시노스테로이드는 식물의 성장과 발달에 있어 필수적인 호르몬중의 하나이다. 현재는 브라시노스테로이드 생합성 과정이 상당부분 밝혀져 있고, 브라시노스테로이드 signaling에 관한 연구가 활발하게 진행되고 있다. Arabidopsis thaliana에서 브라시노스테로이드의 신호전달에 대한 지식을 넓히기 위해 우리는 브라시나졸에 저항성을 가진 3개의 돌연변이체(abz45, abz126, abz149)를 분리하였다. abz45에서 T-DNA가 삽입된 부분은 chromosome 5의 ...
브라시노스테로이드는 식물의 성장과 발달에 있어 필수적인 호르몬중의 하나이다. 현재는 브라시노스테로이드 생합성 과정이 상당부분 밝혀져 있고, 브라시노스테로이드 signaling에 관한 연구가 활발하게 진행되고 있다. Arabidopsis thaliana에서 브라시노스테로이드의 신호전달에 대한 지식을 넓히기 위해 우리는 브라시나졸에 저항성을 가진 3개의 돌연변이체(abz45, abz126, abz149)를 분리하였다. abz45에서 T-DNA가 삽입된 부분은 chromosome 5의 BAC clone MNC6의 GTPase-activator protein of Rab-like small GTPases-like protein(GTPase)을 code하는 유전자의 strat codon에서 300bp 앞쪽이다. 위치상으로 분명 GTPase가 overexpression 됐을 것이라 추정되었다. BRZ를 포함한 배지상에서 긴 hypocotyl길이를 보여주었으므로 이러한 표현형과 GTPase의 연관성을 알아보았다. 하지만, Northern과 표현형재현 실험은 GTPase가 이러한 표현형과 무관하다는 것을 보여주었다. GTPase 주변 유전자의 overexpression 여부를 확인하기 위해 RT-PCR을 해 보았다. RT-PCR 결과 또한 GTPase 주변 유전자들이 over-expression되지 않았다는 것을 보여주었다. 이러한 결과는 right boder쪽에 있는 네 개의 enhancer가 깨졌기 때문에 나타난 것으로 보여진다. abz126에서 T-DNA는 chromosome 1의 gigentea gene의 9번째 exon에 삽입되어 있으며, abz126 plant 표현형을 보았을 때 GI gene의 loss of funtion과 관계 있는 것으로 추정된다. WT 보다는 확실히 꽃피는 시기가 늦으며 다른 GI mutnat인 gi-1, gi-2, gi-3의 표현형과 비교해 봤을 때 비슷한 양상을 보였다. abz149에서 T-DNA는 chromosome 2의 T1J8 clone에서 XET의 1.7kb 앞쪽에 삽입되어 있는 것으로 밝혀졌다. Northern결과는 XET가 ovexpression 됐다는 것을 보여주며, recapitulation결과는 BRZ를 포함한 배지에서 long hypcotyl 표현형과 관계가 있다는 것을 말해준다. 이러한 결과로 인해 XET는 BRs signal transduction에 관여한다고 말할 수 있다.
브라시노스테로이드는 식물의 성장과 발달에 있어 필수적인 호르몬중의 하나이다. 현재는 브라시노스테로이드 생합성 과정이 상당부분 밝혀져 있고, 브라시노스테로이드 signaling에 관한 연구가 활발하게 진행되고 있다. Arabidopsis thaliana에서 브라시노스테로이드의 신호전달에 대한 지식을 넓히기 위해 우리는 브라시나졸에 저항성을 가진 3개의 돌연변이체(abz45, abz126, abz149)를 분리하였다. abz45에서 T-DNA가 삽입된 부분은 chromosome 5의 BAC clone MNC6의 GTPase-activator protein of Rab-like small GTPases-like protein(GTPase)을 code하는 유전자의 strat codon에서 300bp 앞쪽이다. 위치상으로 분명 GTPase가 overexpression 됐을 것이라 추정되었다. BRZ를 포함한 배지상에서 긴 hypocotyl길이를 보여주었으므로 이러한 표현형과 GTPase의 연관성을 알아보았다. 하지만, Northern과 표현형재현 실험은 GTPase가 이러한 표현형과 무관하다는 것을 보여주었다. GTPase 주변 유전자의 overexpression 여부를 확인하기 위해 RT-PCR을 해 보았다. RT-PCR 결과 또한 GTPase 주변 유전자들이 over-expression되지 않았다는 것을 보여주었다. 이러한 결과는 right boder쪽에 있는 네 개의 enhancer가 깨졌기 때문에 나타난 것으로 보여진다. abz126에서 T-DNA는 chromosome 1의 gigentea gene의 9번째 exon에 삽입되어 있으며, abz126 plant 표현형을 보았을 때 GI gene의 loss of funtion과 관계 있는 것으로 추정된다. WT 보다는 확실히 꽃피는 시기가 늦으며 다른 GI mutnat인 gi-1, gi-2, gi-3의 표현형과 비교해 봤을 때 비슷한 양상을 보였다. abz149에서 T-DNA는 chromosome 2의 T1J8 clone에서 XET의 1.7kb 앞쪽에 삽입되어 있는 것으로 밝혀졌다. Northern결과는 XET가 ovexpression 됐다는 것을 보여주며, recapitulation결과는 BRZ를 포함한 배지에서 long hypcotyl 표현형과 관계가 있다는 것을 말해준다. 이러한 결과로 인해 XET는 BRs signal transduction에 관여한다고 말할 수 있다.
Brassinosteroids(BRs) are a class of steroid hormones essential for normal plant growth and development. To expand our knowledge of the molecular mechanisms of the BRs signaling in Arabidopsis thaliana, we identified three mutants which have resistance against the brassinazole(BRZ) ;they were design...
Brassinosteroids(BRs) are a class of steroid hormones essential for normal plant growth and development. To expand our knowledge of the molecular mechanisms of the BRs signaling in Arabidopsis thaliana, we identified three mutants which have resistance against the brassinazole(BRZ) ;they were designated as abz45, abz126 and abz149. BRZ ,BRs biosynthesis inhibitor, is developed from the uniconazole, which is a triazole-type inhibitor targeting a cytochrome P450. Activation tagged columbia seeds were screened on the 1/2MS medium containing BRZ in the dark. Those mutants were analyzed for the genetic mapping and characterization. Genetic analysis of abz45 indicated that the T-DNA was inserted in about 300bp forward start codon of MNC6.11 in the chromosome 5. Therefore it might be activated by T-DNA tagging. Northern and recapitulation data showed that GTPase isn't related to longer hypocotyl. RT-PCR results indicated that the adjacent genes of the GTPase didn't activated by the four enhancers. Showing the genotyping PCR results, four enhancers of the right boder(RB) of the activation tagging vector appeared as a break. For that reason, any gene may be not activated. Genetic analysis of abz126 indicated that the T-DNA is inserted in the chromosome 1. The abz126 phenotypes suggest that the T-DNA insertion was likely to cause a loss-of-function in the gigantea. The mutant phenotype similar to the gi-1, gi-2 and gi-3 in aspect of the late flowering. The T-DNA of the abz149 mutant was inserted to the 1.7 kb upstream of the putative xyloglucan endo-transglycosylase(XET) gene in chromosome 2. Northern blot result showed that the XET over-expressed by the four enhancers and recapitulation results indicated that XET was related to the long hypocotyl phenotype. Therefore, the XET may play a role of the BRs signal transduction. As the experiment of the localization and linkage with the target gene of the XET is carried out, the relationship between BRs signal transduction and XET will be proven.
Brassinosteroids(BRs) are a class of steroid hormones essential for normal plant growth and development. To expand our knowledge of the molecular mechanisms of the BRs signaling in Arabidopsis thaliana, we identified three mutants which have resistance against the brassinazole(BRZ) ;they were designated as abz45, abz126 and abz149. BRZ ,BRs biosynthesis inhibitor, is developed from the uniconazole, which is a triazole-type inhibitor targeting a cytochrome P450. Activation tagged columbia seeds were screened on the 1/2MS medium containing BRZ in the dark. Those mutants were analyzed for the genetic mapping and characterization. Genetic analysis of abz45 indicated that the T-DNA was inserted in about 300bp forward start codon of MNC6.11 in the chromosome 5. Therefore it might be activated by T-DNA tagging. Northern and recapitulation data showed that GTPase isn't related to longer hypocotyl. RT-PCR results indicated that the adjacent genes of the GTPase didn't activated by the four enhancers. Showing the genotyping PCR results, four enhancers of the right boder(RB) of the activation tagging vector appeared as a break. For that reason, any gene may be not activated. Genetic analysis of abz126 indicated that the T-DNA is inserted in the chromosome 1. The abz126 phenotypes suggest that the T-DNA insertion was likely to cause a loss-of-function in the gigantea. The mutant phenotype similar to the gi-1, gi-2 and gi-3 in aspect of the late flowering. The T-DNA of the abz149 mutant was inserted to the 1.7 kb upstream of the putative xyloglucan endo-transglycosylase(XET) gene in chromosome 2. Northern blot result showed that the XET over-expressed by the four enhancers and recapitulation results indicated that XET was related to the long hypocotyl phenotype. Therefore, the XET may play a role of the BRs signal transduction. As the experiment of the localization and linkage with the target gene of the XET is carried out, the relationship between BRs signal transduction and XET will be proven.
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