국내 양식산 뱀장어 (Anguilla japonica)에서 분리되어진 버나바이러스의 특성에 관한 연구 Characteristics of a birnavirus isolated from cultured Japanese eel (Anguilla japonica) in Korea원문보기
국내 뱀장어 양식장에서 1999년 5월부터 2002년 3월까지 전라남북도 순천, 곡성, 나주, 고창, 영광, 여수, 벌교, 나주, 충남 논산, 경기도 아산 등의 사육되던 뱀장어로부터 두부에서 꼬리에 이르기까지 특이적인 피부 출혈증상을 보이면서 폐사하는 질병이 발생하여 심각한 피해를 입히는 일이 발생하였으며, 또한 아가미 울혈증상을 보이며 폐사하는 질병이 전남도의 지역을 중심으로 널리 발견되어지고 있지만, 한국에서 Japanese eel의 바이러스성 질병에 대한 뚜렷한 연구 보고의 예가 없는 실정이다. 본 연구는 뱀장어의 체표에 ...
국내 뱀장어 양식장에서 1999년 5월부터 2002년 3월까지 전라남북도 순천, 곡성, 나주, 고창, 영광, 여수, 벌교, 나주, 충남 논산, 경기도 아산 등의 사육되던 뱀장어로부터 두부에서 꼬리에 이르기까지 특이적인 피부 출혈증상을 보이면서 폐사하는 질병이 발생하여 심각한 피해를 입히는 일이 발생하였으며, 또한 아가미 울혈증상을 보이며 폐사하는 질병이 전남도의 지역을 중심으로 널리 발견되어지고 있지만, 한국에서 Japanese eel의 바이러스성 질병에 대한 뚜렷한 연구 보고의 예가 없는 실정이다. 본 연구는 뱀장어의 체표에 피부염과 아가미 울혈증상을 보이며 폐사하는 양식산 뱀장어를 채집하여 질병 원인을 규명하고 바이러스를 분리하여 바이러스의 혈청형과 유전형을 분류하고, 바이러스에 감염된 뱀장어의 분포를 밝히기 위하여 실시하였다. 병원체를 조사하기 위해 병어를 채집하여 배양, 관찰한 결과 각각의 양어장 뱀장어에서 서로 다른 병원체가 분리 되었으나, CHSE-214주화세포에서 20℃로 배양했을 때 모든 지역에서 세포핵의 농축, 융해되는 세포 변성 효과(CPE)를 보이는 바이러스를 배양, 관찰하였다. 분리된 바이러스는 envelop의 유무를 확인 할 수 있는 Chloroform처리에서 바이러스 감염가에 영향을 받지 않았으며, DNA저해제인 IUdR 10^(-4)M처리에 의해서는 바이러스 감염가에 영향을 받지 않았다. 투과 전자현미경으로 감염 세포내의 바이러스 입자 형태를 관찰해 본 결과 non-envelope, icosahedral이며 size는 50~60nm정도의 바이러스가 관찰되었다. IPNV Jasper strain segment A의 Primer set로 RT-PCR을 한 결과 359 bp의 밴드를 확인 하였다. 국내 뱀장어 양식장에서 분리한 7 strain과 IPNV Ab, Sp, VR-299, MABV Y-6는 3개의 genogroup으로 나뉘었다. 뱀장어에서 분리한 7 strain은 amino acid sequences분석에서 서로 95% 이상의 유사성을 보였으며, IPNV Ab와는 95-100%의 유사성을 보여 genogroupⅢ로 grouping하였다. 뱀장어에서 분리된 7 strain과 혈청학적으로 가장 유사성을 보인 IPNV Sp는 90-91%의 유사성을 보였으며 genogroup Ⅲ에 속하였다. 분리된 바이러스의 병원성을 확인하기 위해 분리한 바이러스와 에드워드균을 뱀장어에 감염시킨 결과 바이러스와 세균을 각각 감염시킨 실험구에서는 폐사량이 낮았지만, 바이러스와 세균을 동시에 감염시킨 뱀장어의 폐사량은 높게 나타났다.
국내 뱀장어 양식장에서 1999년 5월부터 2002년 3월까지 전라남북도 순천, 곡성, 나주, 고창, 영광, 여수, 벌교, 나주, 충남 논산, 경기도 아산 등의 사육되던 뱀장어로부터 두부에서 꼬리에 이르기까지 특이적인 피부 출혈증상을 보이면서 폐사하는 질병이 발생하여 심각한 피해를 입히는 일이 발생하였으며, 또한 아가미 울혈증상을 보이며 폐사하는 질병이 전남도의 지역을 중심으로 널리 발견되어지고 있지만, 한국에서 Japanese eel의 바이러스성 질병에 대한 뚜렷한 연구 보고의 예가 없는 실정이다. 본 연구는 뱀장어의 체표에 피부염과 아가미 울혈증상을 보이며 폐사하는 양식산 뱀장어를 채집하여 질병 원인을 규명하고 바이러스를 분리하여 바이러스의 혈청형과 유전형을 분류하고, 바이러스에 감염된 뱀장어의 분포를 밝히기 위하여 실시하였다. 병원체를 조사하기 위해 병어를 채집하여 배양, 관찰한 결과 각각의 양어장 뱀장어에서 서로 다른 병원체가 분리 되었으나, CHSE-214주화세포에서 20℃로 배양했을 때 모든 지역에서 세포핵의 농축, 융해되는 세포 변성 효과(CPE)를 보이는 바이러스를 배양, 관찰하였다. 분리된 바이러스는 envelop의 유무를 확인 할 수 있는 Chloroform처리에서 바이러스 감염가에 영향을 받지 않았으며, DNA저해제인 IUdR 10^(-4)M처리에 의해서는 바이러스 감염가에 영향을 받지 않았다. 투과 전자현미경으로 감염 세포내의 바이러스 입자 형태를 관찰해 본 결과 non-envelope, icosahedral이며 size는 50~60nm정도의 바이러스가 관찰되었다. IPNV Jasper strain segment A의 Primer set로 RT-PCR을 한 결과 359 bp의 밴드를 확인 하였다. 국내 뱀장어 양식장에서 분리한 7 strain과 IPNV Ab, Sp, VR-299, MABV Y-6는 3개의 genogroup으로 나뉘었다. 뱀장어에서 분리한 7 strain은 amino acid sequences분석에서 서로 95% 이상의 유사성을 보였으며, IPNV Ab와는 95-100%의 유사성을 보여 genogroupⅢ로 grouping하였다. 뱀장어에서 분리된 7 strain과 혈청학적으로 가장 유사성을 보인 IPNV Sp는 90-91%의 유사성을 보였으며 genogroup Ⅲ에 속하였다. 분리된 바이러스의 병원성을 확인하기 위해 분리한 바이러스와 에드워드균을 뱀장어에 감염시킨 결과 바이러스와 세균을 각각 감염시킨 실험구에서는 폐사량이 낮았지만, 바이러스와 세균을 동시에 감염시킨 뱀장어의 폐사량은 높게 나타났다.
From 1999 to 2002, Japanese eel Anguilla japonica, showing viral dermatitis and congestion of gills have been collected from farms of western regions in the peninsula of Korea. These diseases often occurred in eel reared at high densities and in warm water (over 20℃ throughout the year). The main sy...
From 1999 to 2002, Japanese eel Anguilla japonica, showing viral dermatitis and congestion of gills have been collected from farms of western regions in the peninsula of Korea. These diseases often occurred in eel reared at high densities and in warm water (over 20℃ throughout the year). The main symptoms were either dermatitis or congestion of gills, and virus was frequently isolated from those fish. Here, I investigated the virus identification and its regional distribution in Korea. Althogh several bacteria and parasite such as Aeromonas sp, Pseudomonas sp, Edwardsiella trada, Pseudodactylogyrus sp, were isolated from Japanese eel showing dermatitis on head to tail and congestion of gills, virus was commonly isolated from 33 among 51 samples collected in 10 regions. CHSE-214, FHM, EO-2, EPC and RTG-2 cell lines were showed CPE. IUdR were not effective in blocking viral replication. Chloroform treatment did not reduce infectivity of the isolates. The virus particles were non-enveloped, icosahedral with about 50~60nm in diameter. Viruses were neutralized with anti-IPNV Ab and Sp rabbit serum. Birnavirus of Japanese eel was serological most closely related to the Sp strain of infectious pancreatic necrosis virus (IPNV) . PCR positive reactions could be detected 21 out 29 samples. Specific 359 by DNA band was detected in all strains in RT-PCR. Comparative analysis of the nucleotide sequence and the deduced amino acid sequence among seven strains isolated from Anguilla japonica and the other birnaviruses. This result revealed the highest homology with that of a strain Ab of IPNV. The present study is the first report on a viral disease of Japanese eel in Korea.
From 1999 to 2002, Japanese eel Anguilla japonica, showing viral dermatitis and congestion of gills have been collected from farms of western regions in the peninsula of Korea. These diseases often occurred in eel reared at high densities and in warm water (over 20℃ throughout the year). The main symptoms were either dermatitis or congestion of gills, and virus was frequently isolated from those fish. Here, I investigated the virus identification and its regional distribution in Korea. Althogh several bacteria and parasite such as Aeromonas sp, Pseudomonas sp, Edwardsiella trada, Pseudodactylogyrus sp, were isolated from Japanese eel showing dermatitis on head to tail and congestion of gills, virus was commonly isolated from 33 among 51 samples collected in 10 regions. CHSE-214, FHM, EO-2, EPC and RTG-2 cell lines were showed CPE. IUdR were not effective in blocking viral replication. Chloroform treatment did not reduce infectivity of the isolates. The virus particles were non-enveloped, icosahedral with about 50~60nm in diameter. Viruses were neutralized with anti-IPNV Ab and Sp rabbit serum. Birnavirus of Japanese eel was serological most closely related to the Sp strain of infectious pancreatic necrosis virus (IPNV) . PCR positive reactions could be detected 21 out 29 samples. Specific 359 by DNA band was detected in all strains in RT-PCR. Comparative analysis of the nucleotide sequence and the deduced amino acid sequence among seven strains isolated from Anguilla japonica and the other birnaviruses. This result revealed the highest homology with that of a strain Ab of IPNV. The present study is the first report on a viral disease of Japanese eel in Korea.
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