배경: 최근 바이오필름 형성과 연관되어 카테터연관 칸디다혈증이 급증하고 있다. 칸디다 바이오필름은 흔히 사용되고 있는 항진균제에는 잘 반응하지 않아 칸디다혈증 치료에 있어 문제점으로 부각되고 있다. 본 연구는 혈액에서 분리된 다양한 칸디다 균종에 의한 바이오필름을 생체 외에서 형성시킨 후, 이에 대해 각종 항진균제 감수성 검사를 실시하여 보았다. 방법: 혈액에서 분리된 칸디다 중 생체 외에서 바이오필름 형성을 보이는 43주(...
배경: 최근 바이오필름 형성과 연관되어 카테터연관 칸디다혈증이 급증하고 있다. 칸디다 바이오필름은 흔히 사용되고 있는 항진균제에는 잘 반응하지 않아 칸디다혈증 치료에 있어 문제점으로 부각되고 있다. 본 연구는 혈액에서 분리된 다양한 칸디다 균종에 의한 바이오필름을 생체 외에서 형성시킨 후, 이에 대해 각종 항진균제 감수성 검사를 실시하여 보았다. 방법: 혈액에서 분리된 칸디다 중 생체 외에서 바이오필름 형성을 보이는 43주(C. albicans 12주, C. parapsilosis 12주, C. tropicalis 10주 및 C. glabrata 9주)를 대상으로 하였다. 칸디다 바이오필름은 96-well 마이크로플레이트에서 형성시킨 후 amphotericin B (0.063~32 μg/mL), fluconazole (2~1,024 μg/mL), caspofungin (0.03~16 μg/mL) 및 micafungin (0.03~16 μg/mL)에 대한 감수성 검사를 실시하였다. 바이오필름에 대한 항진균제 MIC (sessile minimum inhibitory concentrations, SMIC)는 XTT의 감소를 분광광도계로 측정하는 방법을 이용하여, OD값이 대조 well에 비해 50% 및 80%미만으로 감소한 농도를 각각 SMIC50 및 SMIC80으로 판정하였다. 바이오필름을 형성하지 않은 부유 상태의 칸디다의 감수성 검사는 NCCLS M-27 broth microdilution법에 따라 실시하여 PMIC (planktonic MIC)로 표시하였다. 결과: 항진균제에 따라 정도의 차이는 다소 있었으나, 각 칸디다 균종의 SMIC는 PMIC에 비해 전체적으로 증가하는 경향이 있음이 관찰되었다. 전체 칸디다 바이오필름의 amphotericin B에 대한 SMIC50의 중앙값은 0.5~1 μg/mL로서 PMIC와 유사하였으나 SMIC80은 4~>32 μg/mL로서 더 높았다. Fluconazole에 대한 SMIC80은 모든 균주에서 1,024 μg/mL 이상으로 바이오필름에서 내성이 현저히 증가하였다. 반면 caspofungin과 micafungin에 대한 SMIC80의 중앙값은 C. parapsilosis와 C. tropicalis에서는 모두 16 μg/mL 이상인데 비해, C. albicans와 C. glabrata에서는 모두 0.5~1 μg/mL 사이로서 현저히 낮음이 관찰되었다. 결론: 칸디다 바이오필름은 생체 외 실험에서 fluconazole과 amphotericin B에 대해 증가된 내성을 보였고 균종간의 큰 차이는 없었다. 반면 C. albicans와 C. glabrata의 바이오필름은 caspofungin과 micafungin에 대해 다른 균종과는 달리 낮은 SMIC를 보여 추후 임상적 응용이 기대되었다.
배경: 최근 바이오필름 형성과 연관되어 카테터연관 칸디다혈증이 급증하고 있다. 칸디다 바이오필름은 흔히 사용되고 있는 항진균제에는 잘 반응하지 않아 칸디다혈증 치료에 있어 문제점으로 부각되고 있다. 본 연구는 혈액에서 분리된 다양한 칸디다 균종에 의한 바이오필름을 생체 외에서 형성시킨 후, 이에 대해 각종 항진균제 감수성 검사를 실시하여 보았다. 방법: 혈액에서 분리된 칸디다 중 생체 외에서 바이오필름 형성을 보이는 43주(C. albicans 12주, C. parapsilosis 12주, C. tropicalis 10주 및 C. glabrata 9주)를 대상으로 하였다. 칸디다 바이오필름은 96-well 마이크로플레이트에서 형성시킨 후 amphotericin B (0.063~32 μg/mL), fluconazole (2~1,024 μg/mL), caspofungin (0.03~16 μg/mL) 및 micafungin (0.03~16 μg/mL)에 대한 감수성 검사를 실시하였다. 바이오필름에 대한 항진균제 MIC (sessile minimum inhibitory concentrations, SMIC)는 XTT의 감소를 분광광도계로 측정하는 방법을 이용하여, OD값이 대조 well에 비해 50% 및 80%미만으로 감소한 농도를 각각 SMIC50 및 SMIC80으로 판정하였다. 바이오필름을 형성하지 않은 부유 상태의 칸디다의 감수성 검사는 NCCLS M-27 broth microdilution법에 따라 실시하여 PMIC (planktonic MIC)로 표시하였다. 결과: 항진균제에 따라 정도의 차이는 다소 있었으나, 각 칸디다 균종의 SMIC는 PMIC에 비해 전체적으로 증가하는 경향이 있음이 관찰되었다. 전체 칸디다 바이오필름의 amphotericin B에 대한 SMIC50의 중앙값은 0.5~1 μg/mL로서 PMIC와 유사하였으나 SMIC80은 4~>32 μg/mL로서 더 높았다. Fluconazole에 대한 SMIC80은 모든 균주에서 1,024 μg/mL 이상으로 바이오필름에서 내성이 현저히 증가하였다. 반면 caspofungin과 micafungin에 대한 SMIC80의 중앙값은 C. parapsilosis와 C. tropicalis에서는 모두 16 μg/mL 이상인데 비해, C. albicans와 C. glabrata에서는 모두 0.5~1 μg/mL 사이로서 현저히 낮음이 관찰되었다. 결론: 칸디다 바이오필름은 생체 외 실험에서 fluconazole과 amphotericin B에 대해 증가된 내성을 보였고 균종간의 큰 차이는 없었다. 반면 C. albicans와 C. glabrata의 바이오필름은 caspofungin과 micafungin에 대해 다른 균종과는 달리 낮은 SMIC를 보여 추후 임상적 응용이 기대되었다.
Background: Biofilm-mediated antifungal resistance is a well documented phenomenon among Candida species and likely contributes to its pathogenic niche in catheter-related bloodstream infection. In this study, in vitro antifungal activity of amphotericin B, fluconazole, caspofungin and micafungin ag...
Background: Biofilm-mediated antifungal resistance is a well documented phenomenon among Candida species and likely contributes to its pathogenic niche in catheter-related bloodstream infection. In this study, in vitro antifungal activity of amphotericin B, fluconazole, caspofungin and micafungin against biofilms of four different Candida species was investigated. Methods: A total of 34 bloodstream isolates of Candida (12 C. albicans, 12 C. parapsilosis, 10 C. tropicalis and 9 C. glabrata) were studied. A microtiter plate-based colorimetric assay was used for the susceptibility testing of Candida biofilms, and sessile MICs (SMICs) of fluconazole, amphotericin B, caspofungin and micafungin were determined at 50 and 80% inhibition (SMIC50 and SMIC80, respectively) by using the XTT reduction assay. Antifungal testing to determine the MICs of planktonic cells (PMIC) was performed by the NCCLS M-27A broth microdilution method. Results: Overall, the median SMICs for each Candida species had a tendency to be increased than PMIC, although differences were noted among antifungal agents. The median SMIC50 of all Candida species for amphotericin B ranged 0.5~1 μg/mL, with MICs similar to PMIC, but SMIC80 was inreased, ranging from 4 to >32 μg/mL. The SMIC80 of all Candida isolates for fluconazole was in excess of 1,024 μg/mL. Differences in both caspofungin and micafungin susceptibility among species were noted: the median SMIC80 ranged were 0.5 to 1 μg/mL for both C. albicans and C. glabrata, but the SMIC80 were > 16 μg/mL for both C. parapsilosis and C. tropicalis. Conclusions: Candida biofilms of all four Candida species showed increased MICs to amphotericin and fluconazole, compared to planktonic forms. Both caspofungin and micafungin displayed potent in vitro activities against biofilms of C. albicans and C. glabrata within the drugs' therapeutic range, and further clinical application for the treatment of biofilm-associated infections is expected.
Background: Biofilm-mediated antifungal resistance is a well documented phenomenon among Candida species and likely contributes to its pathogenic niche in catheter-related bloodstream infection. In this study, in vitro antifungal activity of amphotericin B, fluconazole, caspofungin and micafungin against biofilms of four different Candida species was investigated. Methods: A total of 34 bloodstream isolates of Candida (12 C. albicans, 12 C. parapsilosis, 10 C. tropicalis and 9 C. glabrata) were studied. A microtiter plate-based colorimetric assay was used for the susceptibility testing of Candida biofilms, and sessile MICs (SMICs) of fluconazole, amphotericin B, caspofungin and micafungin were determined at 50 and 80% inhibition (SMIC50 and SMIC80, respectively) by using the XTT reduction assay. Antifungal testing to determine the MICs of planktonic cells (PMIC) was performed by the NCCLS M-27A broth microdilution method. Results: Overall, the median SMICs for each Candida species had a tendency to be increased than PMIC, although differences were noted among antifungal agents. The median SMIC50 of all Candida species for amphotericin B ranged 0.5~1 μg/mL, with MICs similar to PMIC, but SMIC80 was inreased, ranging from 4 to >32 μg/mL. The SMIC80 of all Candida isolates for fluconazole was in excess of 1,024 μg/mL. Differences in both caspofungin and micafungin susceptibility among species were noted: the median SMIC80 ranged were 0.5 to 1 μg/mL for both C. albicans and C. glabrata, but the SMIC80 were > 16 μg/mL for both C. parapsilosis and C. tropicalis. Conclusions: Candida biofilms of all four Candida species showed increased MICs to amphotericin and fluconazole, compared to planktonic forms. Both caspofungin and micafungin displayed potent in vitro activities against biofilms of C. albicans and C. glabrata within the drugs' therapeutic range, and further clinical application for the treatment of biofilm-associated infections is expected.
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