이 연구는 ROS으로 손상된 인체피부흑색종 세포에 대한 로즈마린산의 항산 화효과를 밝히기 위하여 H₂O₂의 매개에 의한 세포독성과 이에 대한 약재의 항산화효과를 MTT 분석에 의한 세포생존율 조사를 비롯하여 XTT 분석에 의한 세포부착능, LDH 활성, DPPH 라디칼소거능, ...
이 연구는 ROS으로 손상된 인체피부흑색종 세포에 대한 로즈마린산의 항산 화효과를 밝히기 위하여 H₂O₂의 매개에 의한 세포독성과 이에 대한 약재의 항산화효과를 MTT 분석에 의한 세포생존율 조사를 비롯하여 XTT 분석에 의한 세포부착능, LDH 활성, DPPH 라디칼소거능, 티로시나제 활성억제능을 측정하였다. 또한 광학현미경에 의한 세포형태의 변화관찰 및 염색에 의한 티 로시나제의 활성을 조사하였다.
그 결과는 다음과 같다.
H₂O₂를 20~ 110 uM의 농도에서 5~7 시간 동안 처리한 다음 MTT 분석에 의한 세포생존율과 XTT분석에 의한 세포부착능을 조사한 결과 H₂O₂의 처리농도와 시간에 비례하여 감소시켰다.
H₂O₂에 대한 IC_(50) 값은 MTT분석과 XTT분석에서 각각 80 uM과 90 uM 에서 나타나 이는 Borenfreund 등(1988)의 독성판정기준에 의해 높은 독성을 보였 다.(MTT50, XTT50<100 uM). H₂O₂는 처리농도에 비례하여 LDH활성 증가를 보였으며, 이 때 LDH50 값은 세포를 H₂O₂에서 8 시간 동안 처리한 결과 60 uM 에서 보였다.
로즈마린산은 세포생존율과 세포부착율의 증가를 비롯하여 LDH 활성감소, DPPH-라디칼소거능 증가, 티로시나제 활성억제 능의 증가를 보였다.
광학현미경적 관찰에서 과산화수소로 처리된 세포들은 대조군에 비하여 세 포수가 감소하였으며 또한 티로시나제 활성을 위한 염색에 있어서는 H₂O₂로 처리된 세포들은 흰색에서 검은색 (중간활성, +++)으로 변한 반면 로즈마린산 으로 처리된 세포들은 흰색에서 갈색 (보통활성, ++)으로 변하였다.
이상의 결과에서 과산화수소는 배양 인체피부흑색종 세포에 높은 독성을 보였다. 한편 과산화수소로 처리된 세포에서 로즈마린산은 세포생존율과 세포 부착능, DPPH-라디칼제거능의 증가를 비롯하여 티로시나제 활성억제를 나타 냈을 뿐만 아니라 LDH 활성 감소를 나타냄으로서 과산화수소와 같은 ROS 에 대하여 유효한 항산화효과를 나타냈다.
이 연구는 ROS으로 손상된 인체피부흑색종 세포에 대한 로즈마린산의 항산 화효과를 밝히기 위하여 H₂O₂의 매개에 의한 세포독성과 이에 대한 약재의 항산화효과를 MTT 분석에 의한 세포생존율 조사를 비롯하여 XTT 분석에 의한 세포부착능, LDH 활성, DPPH 라디칼소거능, 티로시나제 활성억제능을 측정하였다. 또한 광학현미경에 의한 세포형태의 변화관찰 및 염색에 의한 티 로시나제의 활성을 조사하였다.
그 결과는 다음과 같다.
H₂O₂를 20~ 110 uM의 농도에서 5~7 시간 동안 처리한 다음 MTT 분석에 의한 세포생존율과 XTT분석에 의한 세포부착능을 조사한 결과 H₂O₂의 처리농도와 시간에 비례하여 감소시켰다.
H₂O₂에 대한 IC_(50) 값은 MTT분석과 XTT분석에서 각각 80 uM과 90 uM 에서 나타나 이는 Borenfreund 등(1988)의 독성판정기준에 의해 높은 독성을 보였 다.(MTT50, XTT50<100 uM). H₂O₂는 처리농도에 비례하여 LDH활성 증가를 보였으며, 이 때 LDH50 값은 세포를 H₂O₂에서 8 시간 동안 처리한 결과 60 uM 에서 보였다.
로즈마린산은 세포생존율과 세포부착율의 증가를 비롯하여 LDH 활성감소, DPPH-라디칼소거능 증가, 티로시나제 활성억제 능의 증가를 보였다.
광학현미경적 관찰에서 과산화수소로 처리된 세포들은 대조군에 비하여 세 포수가 감소하였으며 또한 티로시나제 활성을 위한 염색에 있어서는 H₂O₂로 처리된 세포들은 흰색에서 검은색 (중간활성, +++)으로 변한 반면 로즈마린산 으로 처리된 세포들은 흰색에서 갈색 (보통활성, ++)으로 변하였다.
이상의 결과에서 과산화수소는 배양 인체피부흑색종 세포에 높은 독성을 보였다. 한편 과산화수소로 처리된 세포에서 로즈마린산은 세포생존율과 세포 부착능, DPPH-라디칼제거능의 증가를 비롯하여 티로시나제 활성억제를 나타 냈을 뿐만 아니라 LDH 활성 감소를 나타냄으로서 과산화수소와 같은 ROS 에 대하여 유효한 항산화효과를 나타냈다.
The purpose of this study was to evaluate the antioxidant effect of rosmarinic acid on the cultured human skin melanoma cells injured by reactive oxygen species (ROS). The cytotoxicity and antioxidant effect were analyzed by MTT assay for cell viability and XTT assay for cell adhesion activity, DPPH...
The purpose of this study was to evaluate the antioxidant effect of rosmarinic acid on the cultured human skin melanoma cells injured by reactive oxygen species (ROS). The cytotoxicity and antioxidant effect were analyzed by MTT assay for cell viability and XTT assay for cell adhesion activity, DPPH-radical scavenging activity, tyrosinase inhibitory activity, lactate dehydrogenase (LDH) activity after treated of cells with or without hydrogen peroxide (H₂O₂) for 1-10 hours. And light microscopic study was also carried out for morphological changes of the cells and tyrosinase activities.
The results were as follows :
H₂O₂ decreased the cell viability and cell adhesion activity in cultured human melanoma cells in a dose- and time-dependent manner after cells were treated with 20-110 uM of H₂O₂ for 5-7 hours.
IC_(50) values of H₂O₂ by the MTT assay and XTT assay were 80 uM and 90 uM, respectively. These values were highly toxic on cultured human melanoma cells according to the toxic criteria of Borenfreund et al.(1988).
H₂O₂ increased LDH activity dose dependently. LDH50 was determined at 60 uM H₂O₂ after treatment of cells with 50-90 uM H₂O₂ for 8 hours. Rosmarinic acid increases cell viability, cell adhesion activity, DPPHradical scavenging and inhibitory activity of tyrosinase, and decreases LDH activity.
In light microscopic study, the number of human skin melanoma cells treated with H₂O₂ were decreased compared with control, and H₂O₂ activated tyrosinase activity, which was observed through darkend cell color (mid-activity, +++).
However, colors of cells Rosmarinic acid changed from white to brown in cell staining due to tyrosinase activity (moderate-activity, ++).
The treatment of the cells with H₂O₂ shows highly toxic effects on cultured human skin melanoma cells. Rosmarinic acid increases cell viability, cell adhesion activity, DPPH-radical scavenging activity and tyrosinase inhibitory activity and decreases LDH activity in the cells treated with H₂O₂.
It is considered that Rosmarinic acid shows antioxidant effect on ROS such as H₂O₂.
The purpose of this study was to evaluate the antioxidant effect of rosmarinic acid on the cultured human skin melanoma cells injured by reactive oxygen species (ROS). The cytotoxicity and antioxidant effect were analyzed by MTT assay for cell viability and XTT assay for cell adhesion activity, DPPH-radical scavenging activity, tyrosinase inhibitory activity, lactate dehydrogenase (LDH) activity after treated of cells with or without hydrogen peroxide (H₂O₂) for 1-10 hours. And light microscopic study was also carried out for morphological changes of the cells and tyrosinase activities.
The results were as follows :
H₂O₂ decreased the cell viability and cell adhesion activity in cultured human melanoma cells in a dose- and time-dependent manner after cells were treated with 20-110 uM of H₂O₂ for 5-7 hours.
IC_(50) values of H₂O₂ by the MTT assay and XTT assay were 80 uM and 90 uM, respectively. These values were highly toxic on cultured human melanoma cells according to the toxic criteria of Borenfreund et al.(1988).
H₂O₂ increased LDH activity dose dependently. LDH50 was determined at 60 uM H₂O₂ after treatment of cells with 50-90 uM H₂O₂ for 8 hours. Rosmarinic acid increases cell viability, cell adhesion activity, DPPHradical scavenging and inhibitory activity of tyrosinase, and decreases LDH activity.
In light microscopic study, the number of human skin melanoma cells treated with H₂O₂ were decreased compared with control, and H₂O₂ activated tyrosinase activity, which was observed through darkend cell color (mid-activity, +++).
However, colors of cells Rosmarinic acid changed from white to brown in cell staining due to tyrosinase activity (moderate-activity, ++).
The treatment of the cells with H₂O₂ shows highly toxic effects on cultured human skin melanoma cells. Rosmarinic acid increases cell viability, cell adhesion activity, DPPH-radical scavenging activity and tyrosinase inhibitory activity and decreases LDH activity in the cells treated with H₂O₂.
It is considered that Rosmarinic acid shows antioxidant effect on ROS such as H₂O₂.
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