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오랜 시간 동안 인간은 식물의 2차 대사산물을 민간의료용 약으로 사용해왔다. 전통의약은 오랜 경험을 통해서 효과가 검증되었다. 이러한 검증을 바탕으로 신약을 개발하고 신약의 후보 물질을 찾기 위해서 많은 노력들을 하고 있다. 이런 관점에서 볼 때 동양의 전통적인 치료에 많은 관심을 가지는 것이 사실이다. 본 연구는 기존의 항 종양 활성을 가진 식물이나 항암제의 보조제로 사용하고 있는 약제를 중심으로 연구를 하였다. 이미 많은 식물들이 연구가 되었고 진행 중 이지만 대부분은 추출물을 중심으로 진행이 되고 있다. 이러한 추출물을 중심으로 bioassay guide separation을 해서 항암활성을 가진 물질을 탐색하고 이미 알려진 활성과는 다른 활성을 찾을 수 있을 것이다. 또한, 활성의 결과가 최종적인 것이 아니라 이러한 활성이 실제 세포 내에서의 event가 어떻게 진행되는 것을 밝히는 것 또한 신약을 개발하고 연구하는데 필요할 것이다. 연구 대상인 ...

오랜 시간 동안 인간은 식물의 2차 대사산물을 민간의료용 약으로 사용해왔다. 전통의약은 오랜 경험을 통해서 효과가 검증되었다. 이러한 검증을 바탕으로 신약을 개발하고 신약의 후보 물질을 찾기 위해서 많은 노력들을 하고 있다. 이런 관점에서 볼 때 동양의 전통적인 치료에 많은 관심을 가지는 것이 사실이다. 본 연구는 기존의 항 종양 활성을 가진 식물이나 항암제의 보조제로 사용하고 있는 약제를 중심으로 연구를 하였다. 이미 많은 식물들이 연구가 되었고 진행 중 이지만 대부분은 추출물을 중심으로 진행이 되고 있다. 이러한 추출물을 중심으로 bioassay guide separation을 해서 항암활성을 가진 물질을 탐색하고 이미 알려진 활성과는 다른 활성을 찾을 수 있을 것이다. 또한, 활성의 결과가 최종적인 것이 아니라 이러한 활성이 실제 세포 내에서의 event가 어떻게 진행되는 것을 밝히는 것 또한 신약을 개발하고 연구하는데 필요할 것이다. 연구 대상인 전호, 양제근, 천궁, 과루에 대하여 bioassay guide separation을 통해서 DPPT, 8-O-glucose musizin and -torachryson, 천궁에서 Z-Ligustilide, 과루근의 클로로포름층의 추출물 등을 생리활성분리 방법을 통해서 분리 하였다. 이들 중 DPPT의 경우는 기존에 항암 식물의 주요 성문으로 알려져 있었으며 tubulin생성에 관여한다고 알려져 왔다. 본 연구에서 DPPT는 단지 tubulin의 형성을 방해하는 것뿐만 아니라 24시간을 중심으로 Cell cycle arrest가 일어나고 이후에는 apoptosis로 진행한다는 것을 발견했다. 이러한 발견을 중심으로 세포 내에서의 caspase 3/7을 통해서 세포신호전달이 이루어짐을 밝혔다. 양제근에서 분리된 8-O-glucose-musizin은 약한 apoptosis유발 효과를 나타내었는데 이 약물의 경우는 48시간 이후에 약물의 효과가 나타나서 apoptosis를 진행시킨다. 이러한 것을 바탕으로 기본 구조와 치환기와의 변화를 바탕으로 좀더 나은 효과를 가진 약물을 개발하는데 본 연구가 기여 할 수 있을 것이다. 천궁의 Hexane층에서 apoptosis를 유발하는 물질을 확인하였으며 이들을 분리하여 CGHex F2를 분리/정제 하였다. CHHex F2의 주요 물질은 Z-Ligustilide로 확인하였으며 세포주기억제를 유발과 세포분화정지에 대한 자세한 실험이 필요하다. 전호의 경우 메탄올층에서 다른 약제와 비교하여 강력할 Apoptosis유발 물질의 존재를 발견하였다. 이것은 다른 추출물의 경우보다 적은 약의 메탄올 추출물로 세포사멸의 효과를 확인했기 때문이다. 이러한 결과를 근거로 극성을 중심을 핵산, 클로로포름, 에틸아세테이트와 물층의 분리를 한 후 세포사멸의 효과를 확인한 결과 클로로포름 층에서 가장 큰 활성을 보였다. 다른 분액층, 핵산과 에틸아세테이트 층에서도 약한 활성을 보였다. 이것은 세포사멸의 활성을 보이는 출발 물질을 찾는데 유용할 것이라 기대된다. 이미 전통 약제에서의 활성성분은 많은 부분 알려졌고 이러한 활성에 작용하는 화합물들도 또한 알려져 있다. 본 연구는 기존에 알려진 화합물이나 활성이 암세포에서 항암 활성을 나타내는 지를 확인했다. 이러한 연구 결과를 바탕으로 알려진 생리활성이 어떠한 과정을 통해서 시간경과와 농노에 따른 암세포의 자기사멸 또는 성장억제를 유발하는 지를 확인하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

There are lots of biologically active compounds in plants which have been used for traditional remedies as herbal medicines in the most of countries as well as Korea. In plants, the most of major compounds used with traditional medicines are mostly secondary metabolites which are employed for self-p...

There are lots of biologically active compounds in plants which have been used for traditional remedies as herbal medicines in the most of countries as well as Korea. In plants, the most of major compounds used with traditional medicines are mostly secondary metabolites which are employed for self-protection from abnormal conditions which are attacks of virus, fungus and insects. These secondary metabolites in plants have been applied to the remedy of human diseases for a long time because they are well-defined three dimensional structures of pharmacophore and well-conserved biological activities. Due to the secondary metabolites in self-defense system to protect themselves for outer risks, plant derived drugs are shown similar to biological effects on human diseases as well as plants. The effects of the plant-medicines have been verified and validated through the long time. Consequently, many plant-medicines are interesting in curing of acute and chronic humane diseases. However, many of medicines are generally used as crude extracts in local territories. There are many compounds in extracts and these mixtures have showed the synergy efficacies together. So, it is very important to separate and identify the biologically active compounds in the extracts. The more studies of the separation of the pre-drugs or leads and their structure elucidations are needed to make a best use of traditional medicines. Also, the importance of the discovery for new biological activity is on the increase to widen the use of extracts as medicine in relative research fields except of the verified effects. Due to the reasons, ethno-medicinal plants confirmed for a long time in countries are essential to study deeply. The detection of new effects from ethno-medicinal plants which are referred are needed more and more. Some of native medicinal plants in Korea, Anthriscus sylvestris, Rumex japonicus, Cnidium officinale and Trochosantes kirilowii are well known as the traditional drugs used in used in various kind diseases such as antifungal activity, antibacterial activity, anti-uterine hemorrhage, the cutaneous diseases and supplements with cancer drugs. Also, they have been applied to diseases with mixtures with various medicinal plants and supplements to improve the complex effects of active compounds in each plant. However, it is not unclear which compounds are more effective or reduce the rather effects to diseases in remedy although these the treatment of plant-derived drugs as mixtures have synergy efficacy to improve the remedial values comparing with single usages in most case. In this study, deoxypodophyllotoxin from Anthriscus sylvestris, 8-O-glucose musizine and -torachryson from Rumex japonicus, Z-Ligustilide from Cnidium officinale and chloroform extracts from Trochosantes kirilowii were separated. These compounds and extract were showing the effects apoptosis induction and cell cycle arrest on HeLa cell , cervical cancer cell line through the cell-based assay treated with extracts from liquid-liquid separation and normal/reverse phase column chromatography. The methods of nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy for 1H, 13C, DEPT135, COSY, HMQC and HMBC were used with the pure compounds to identify the structural elucidation of them in company with cell based assay about anti-tumor effects to induce apoptosis, cell cycle arrest or both. To confirm the effects of apoptosis, cell cycle arrest and signal pathway on cancer cell lines, deoxypodophyllotoxin, 8-O-glucose musizine, 8-O-glucose torachryson, Z-ligustilide from Cnidium officinale and chloroform extract from Trichosanthes kirilowii were treated on HeLa cell line through the concentration and time dependent methods.

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