[학위논문]Geranium sibiricum Linne 로부터 추출한 당단백질의 Chang liver 세포 증식억제 효과 Study on characterization of glycoprotein isolated from Geranium sibiricum Linne and on its anti-proliferative effect in Chang liver cells원문보기
오래 전부터 한국과 중국의 민간에서는 쥐손이풀 (Geranium sibiricum Linne; GSL, 이질풀) 을 장염 및 설사 치료에 사용되어왔다. 쥐손이풀에서 추출한 당단백질은 18kDa의 분자량을 가지며 10.45%의 당과 89.55%의 단백질로 구성되어 있다. GSL 당단백질의 생물학적 특성을 측정하기 위하여 여러 실험환경 속에서 라디칼 제거능력을 통하여 특성을 규명하였다. 우선 당단백질에서 pronase E와 NaIO₄를 이용하여 당단백질에서 단백질과 당 부분을 제거하고 라디칼 제거능력을 측정하였을 때, 두 실험군 모두 온전한 당단백질에 비하여 라디칼 제거능력이 현저히 줄어들었다. 그러나 산성과 중성 상태 (pH 9 까지)에서 제거능력이 활발했으며, 85℃ 까지 온도에서 뛰어난 라디칼 제거능력을 보여주었다. 그리고 금속 2가 이온상태에서의 라디칼 제거능력은 ...
오래 전부터 한국과 중국의 민간에서는 쥐손이풀 (Geranium sibiricum Linne; GSL, 이질풀) 을 장염 및 설사 치료에 사용되어왔다. 쥐손이풀에서 추출한 당단백질은 18kDa의 분자량을 가지며 10.45%의 당과 89.55%의 단백질로 구성되어 있다. GSL 당단백질의 생물학적 특성을 측정하기 위하여 여러 실험환경 속에서 라디칼 제거능력을 통하여 특성을 규명하였다. 우선 당단백질에서 pronase E와 NaIO₄를 이용하여 당단백질에서 단백질과 당 부분을 제거하고 라디칼 제거능력을 측정하였을 때, 두 실험군 모두 온전한 당단백질에 비하여 라디칼 제거능력이 현저히 줄어들었다. 그러나 산성과 중성 상태 (pH 9 까지)에서 제거능력이 활발했으며, 85℃ 까지 온도에서 뛰어난 라디칼 제거능력을 보여주었다. 그리고 금속 2가 이온상태에서의 라디칼 제거능력은 마그네슘 2가 이온을 제외하고 칼슘과 망간 2가 이온에서 활성이 낮아지는 것을 확인할 수 있었다. 또한 GSL 당단백질은 200 μg/mL 농도에서 4시간 동안 100 mU/mL 의 GO 를 처리한 Chang liver 세포에서 세포독성을 막아주는 효과를 보여주었다. 항산화 활성과 세포 독성 실험을 마친 후 glucose oxidase 를 처리한 Chang liver 세포내의 신호전달자 역할을 하는 세포 증식에 깊이 관여하며 중요한 역할을 수행하는 ROS 와 NO 발생 변화량을 측정하였다. 본 연구의 결과, GSL 당단백질은 세포에 100 mU/mL의 GO를 처리하였을 때, 5μg/mL 의 농도에서 iROS의 발생을 현격히 감소시키며, 20μg/mL의 농도에서 NO의 발생을 증가시켰다. 또한, 본 연구에서는 50 μg/mL의 GSL 당단백질이 Concanavalin A (Con A, 10μg/mL) 처리 시, proliferating cell nuclear antigen (PCNA) 를 억제하며, 세포의 수에서도 증식을 억제하는 것으로 나타났다. 결과적으로, 18 kDa 의 GSL 당단백질은 단백질 여러 실험적인 상황 내에서 안정적인 항산화 능력을 보이며, 당과 단백질이 구조를 이루지 못할 때엔 항산화 능력을 잃어버리게 된다. 이러한 항산화 능력을 기초로 Chang liver 세포에서 ROS 와 NO 의 발생 변화량을 확인하였을 때, ROS 를 억제하고, NO 를 증가시켰다. 그러므로 GSL 당단백질이 항산화 및 간세포 증식 억제 능력이 있다고 사료된다.
오래 전부터 한국과 중국의 민간에서는 쥐손이풀 (Geranium sibiricum Linne; GSL, 이질풀) 을 장염 및 설사 치료에 사용되어왔다. 쥐손이풀에서 추출한 당단백질은 18kDa의 분자량을 가지며 10.45%의 당과 89.55%의 단백질로 구성되어 있다. GSL 당단백질의 생물학적 특성을 측정하기 위하여 여러 실험환경 속에서 라디칼 제거능력을 통하여 특성을 규명하였다. 우선 당단백질에서 pronase E와 NaIO₄를 이용하여 당단백질에서 단백질과 당 부분을 제거하고 라디칼 제거능력을 측정하였을 때, 두 실험군 모두 온전한 당단백질에 비하여 라디칼 제거능력이 현저히 줄어들었다. 그러나 산성과 중성 상태 (pH 9 까지)에서 제거능력이 활발했으며, 85℃ 까지 온도에서 뛰어난 라디칼 제거능력을 보여주었다. 그리고 금속 2가 이온상태에서의 라디칼 제거능력은 마그네슘 2가 이온을 제외하고 칼슘과 망간 2가 이온에서 활성이 낮아지는 것을 확인할 수 있었다. 또한 GSL 당단백질은 200 μg/mL 농도에서 4시간 동안 100 mU/mL 의 GO 를 처리한 Chang liver 세포에서 세포독성을 막아주는 효과를 보여주었다. 항산화 활성과 세포 독성 실험을 마친 후 glucose oxidase 를 처리한 Chang liver 세포내의 신호전달자 역할을 하는 세포 증식에 깊이 관여하며 중요한 역할을 수행하는 ROS 와 NO 발생 변화량을 측정하였다. 본 연구의 결과, GSL 당단백질은 세포에 100 mU/mL의 GO를 처리하였을 때, 5μg/mL 의 농도에서 iROS의 발생을 현격히 감소시키며, 20μg/mL의 농도에서 NO의 발생을 증가시켰다. 또한, 본 연구에서는 50 μg/mL의 GSL 당단백질이 Concanavalin A (Con A, 10μg/mL) 처리 시, proliferating cell nuclear antigen (PCNA) 를 억제하며, 세포의 수에서도 증식을 억제하는 것으로 나타났다. 결과적으로, 18 kDa 의 GSL 당단백질은 단백질 여러 실험적인 상황 내에서 안정적인 항산화 능력을 보이며, 당과 단백질이 구조를 이루지 못할 때엔 항산화 능력을 잃어버리게 된다. 이러한 항산화 능력을 기초로 Chang liver 세포에서 ROS 와 NO 의 발생 변화량을 확인하였을 때, ROS 를 억제하고, NO 를 증가시켰다. 그러므로 GSL 당단백질이 항산화 및 간세포 증식 억제 능력이 있다고 사료된다.
Since long time ago in Korea and China, Geranium Sibiricum Linne (GSL) has been used as a traditional drug for intestinal inflammation and diarrhea. 18 kDa Glycoprotein isolated from GSL consist of carbohydrate moiety (10.45%) and protein moiety (89.55%). The GSL glycoprotein was characterized by it...
Since long time ago in Korea and China, Geranium Sibiricum Linne (GSL) has been used as a traditional drug for intestinal inflammation and diarrhea. 18 kDa Glycoprotein isolated from GSL consist of carbohydrate moiety (10.45%) and protein moiety (89.55%). The GSL glycoprotein was characterized by its radical scavenging activity under various experimental conditions. When GSL glycoprotein was treated with deactivation agents (pronase E or NaIO₄), its scavenging activity decreased in the both cases. It has optimal and maximal activity in acidic, neutral pH (up to pH9), and up to 85℃. Also, its activity reduced in the case of Ca^(2+) and Mn^(2+, exception of the Mg^(2+) case. Its activity in the presence of Mn^(2+) declined more than Ca^(2+) case. Also GSL glycoprotein (200 μg/mL) significantly protected from cytotoxicity in the glucose oxidase (100 mU/mL)-treated Chang liver cells for 4 h. GSL glycoprotein significantly reduced iROS production at 5 μg/mL and increased NO production at 20 μg/mL in the G/GO system (100 mU/mL). Also our finding indicated that the GSL glycoprotein (50 μg/mL) in the presence of Con A (10 μg/mL) resulted in inhibition of PCNA (cell proliferation marker). Taken together, GSL glycoprotein inhibits cell proliferation through modulation of intracellular ROS (iROS) and NO in the Chang liver cells. Therefore, GSL glycoprotein is an one of candicate compounds which have an anti-proliferative character.
Since long time ago in Korea and China, Geranium Sibiricum Linne (GSL) has been used as a traditional drug for intestinal inflammation and diarrhea. 18 kDa Glycoprotein isolated from GSL consist of carbohydrate moiety (10.45%) and protein moiety (89.55%). The GSL glycoprotein was characterized by its radical scavenging activity under various experimental conditions. When GSL glycoprotein was treated with deactivation agents (pronase E or NaIO₄), its scavenging activity decreased in the both cases. It has optimal and maximal activity in acidic, neutral pH (up to pH9), and up to 85℃. Also, its activity reduced in the case of Ca^(2+) and Mn^(2+, exception of the Mg^(2+) case. Its activity in the presence of Mn^(2+) declined more than Ca^(2+) case. Also GSL glycoprotein (200 μg/mL) significantly protected from cytotoxicity in the glucose oxidase (100 mU/mL)-treated Chang liver cells for 4 h. GSL glycoprotein significantly reduced iROS production at 5 μg/mL and increased NO production at 20 μg/mL in the G/GO system (100 mU/mL). Also our finding indicated that the GSL glycoprotein (50 μg/mL) in the presence of Con A (10 μg/mL) resulted in inhibition of PCNA (cell proliferation marker). Taken together, GSL glycoprotein inhibits cell proliferation through modulation of intracellular ROS (iROS) and NO in the Chang liver cells. Therefore, GSL glycoprotein is an one of candicate compounds which have an anti-proliferative character.
AI-Helper
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.